林木病害的診斷

第四節(jié)林木病害的診斷診斷是從癥狀或表型特征來判斷其病因，確定病害種類。鑒定則是將病原物的種類和病害的種類同已知的種類比較異同，確定其科學(xué)名稱或分類上的地位。林果病害的防治，首先要對有病林果作準(zhǔn)確的診斷鑒定，然后才能提出合適的防治措施來控制病害，減少因病害造成的損失；如果診斷不當(dāng)或誤診，就回貽誤防治時(shí)機(jī)，造成重大損失。癥狀學(xué):(Symptomatology)第一頁，共二十四頁。一柯赫氏法則(Koch,spostulates)柯赫氏法則又稱柯赫氏假設(shè)（Koch,spostulate）,通常是用來確定侵染性病害病原物的操作程序。作病原鑒定時(shí),從病部表面或組織中發(fā)現(xiàn)的病原物,無論是真菌、細(xì)菌或線蟲,都不能立即確定這就是該病的病原物，因?yàn)樵诓〔窟€常常有一些二次寄生菌、腐生菌及腐生線蟲，做病組織鏡檢時(shí),應(yīng)排除雜菌干擾,分清那一種是真正的病原物。第二頁，共二十四頁。對常見病,一般通過癥狀鑒別、鏡檢鑒別、查閱有關(guān)資料進(jìn)行核對即可確定，對少見的或新的病害，不能僅僅依據(jù)病部發(fā)現(xiàn)的可疑病原物倉促的作出結(jié)論。通常應(yīng)進(jìn)行分離培養(yǎng)、接種和再分離，即做致病性的測定后，才能做結(jié)論。這種診斷步驟稱為柯赫氏法則。其具體內(nèi)容為:第三頁，共二十四頁。（1）在病植物上通常伴隨有一種病原物存在；

(Themicro-organismmustshowconstantassociationwiththedisese)（2）該微生物可在離體的或人工的培養(yǎng)基上分離純化而得到純培養(yǎng)；(Themicro-organismmustbeisolatedfromthedisesedhostangrowninpureculture)（3）將純培養(yǎng)接種到相同植物品種的健株上，表現(xiàn)出相同癥狀的病害；

(Thespecificdiseasemustbereproducedwhenthemicro-organismfrompurecultureisinoculatedintohost)（4）從接種發(fā)病的植株上再分離到其純培養(yǎng)，性狀與原來的記錄相同。

(Themicro-organismmustbereisolatedfromtheinoculatedhost)柯赫氏法則第四頁，共二十四頁。通過這一系列試驗(yàn)得到確實(shí)的證據(jù)，就可以確認(rèn)該微生物為其病原物。但有些專性寄生物如病毒、植原體、霜霉菌、白粉菌和一些銹菌等，目前還不能在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可采用其他方法來加以證明。如線蟲和病毒病害，在進(jìn)行人工接種時(shí)，直接用病株組織里的線蟲或采用病毒的汁液或或帶毒組織、昆蟲等進(jìn)行接種，當(dāng)接種株發(fā)病后，再從這種病株上取線蟲或病毒汁液或帶毒組織、昆蟲等，用同樣方法再進(jìn)行接種，當(dāng)?shù)玫酵瑯咏Y(jié)果后才能證實(shí)該病的病原為這種線蟲或這種病毒。第五頁，共二十四頁。二、非傳染性病害的鑒定非侵染性病害的診斷一般經(jīng)過以下步驟：1田間觀察各種病害在田間的發(fā)生和發(fā)展，都表現(xiàn)一定的規(guī)律，因此到發(fā)病現(xiàn)場作田間觀察是診斷病害首要的工作。在觀察中應(yīng)詳細(xì)記載和調(diào)查：病害發(fā)生的普遍性和嚴(yán)重性、病害發(fā)展的快慢、在田間的分布、發(fā)生時(shí)期、寄主品種、受害部位、癥狀以及發(fā)病田的地勢、土壤、昆蟲活動(dòng)等等環(huán)境條件。根據(jù)病害在田間分布與發(fā)展情況、病株發(fā)病情況及發(fā)病條件等，初步判定病害的類別。非侵染性病害在田間的分布狀況一般表現(xiàn)為較大面積的均勻發(fā)生，發(fā)病程度可由輕到重，沒有由點(diǎn)到面即由發(fā)病中心向四周逐步擴(kuò)展的過程；在病株上，除個(gè)別病原如高溫引起的日灼或藥害等引起局部病變外，通常表現(xiàn)為全株性癥狀。第六頁，共二十四頁。

2癥狀鑒別

非侵染性病害不是由病原物侵染引起的，在發(fā)病植物表面只有病狀沒有病征。在經(jīng)過保濕培養(yǎng)以及通過其它方法確定不是由病原物引起的病害后，可通過進(jìn)一步解剖檢驗(yàn)，鏡檢組織變化，提出可疑病因；或者通過對土壤、肥料、氣象以及大氣、藥物施用等的調(diào)查來判斷。第七頁，共二十四頁。3病原鑒定非侵染性病害的病原最后確定，還可通過以下方法。化學(xué)診斷法經(jīng)過初步鑒定，如懷疑病原可能是土壤或肥料中的因素。可進(jìn)一步采用化學(xué)診斷法，通常是對病株組織或病田土壤進(jìn)行化學(xué)分析，測定其成分和含量并與正常值進(jìn)行比較，從而查明過多或過少成分，確定病原。這一診斷法對缺素癥和鹽堿害的診斷較可靠。第八頁，共二十四頁。人工誘發(fā)及排除病因的檢驗(yàn)法根據(jù)初步分析的可疑原因,人為提供類似發(fā)病條件,如低溫、缺乏某種元素以及藥害等，對病株進(jìn)行處理，觀察是否發(fā)病，或采取治療措施排除病因，用可疑缺乏元素的鹽類對病株進(jìn)行噴灑注射灌根等方法治療，觀察是否可疑減輕病害或恢復(fù)健康。第九頁，共二十四頁。指示植物鑒定法這種方法用于鑒定缺素癥，當(dāng)提出可疑病因后，可選擇最容易缺乏該種元素、癥狀表現(xiàn)明顯、穩(wěn)定的植物，種植在疑為缺乏該種元素的林果附近，觀察其癥狀反應(yīng)，借以鑒定林果表現(xiàn)出的癥狀，是否為該種元素的缺乏癥。第十頁，共二十四頁。三、傳染性病害

傳染性病害的病原有真菌、細(xì)菌、植原體、病毒、類病毒、線蟲及寄生性種子植物等，這些病原物所致的病害都具有傳染性，在田間發(fā)生時(shí)，一般呈分散狀分布，具有明顯的由點(diǎn)到面，即由一個(gè)發(fā)病中心逐漸向四周擴(kuò)大的發(fā)展過程，有的病害在田間擴(kuò)展還與某些昆蟲有聯(lián)系。第十一頁，共二十四頁。傳染性病害的診斷也需要進(jìn)行田間觀察，癥狀鑒別,然后再做病原鑒定。第十二頁，共二十四頁。田間觀察與癥狀鑒別傳染性病害的各類病原除病毒、植原體、病毒及類病毒外，在病部都產(chǎn)生病征。真菌病害的病征很明顯，在病部表面可見粉狀物、霉?fàn)钗?、粒狀物、銹狀物等各種特征的結(jié)構(gòu)。細(xì)菌病害在潮濕條件下一般在病部都可見滴狀或一層薄薄的膿狀物，通常呈黃色或乳白色，干燥時(shí)干枯成為小珠狀、不定型粒狀或發(fā)亮的薄層。這些是細(xì)菌的溢膿,是細(xì)菌病害的病癥。不過真菌病害和細(xì)菌病害在田間有時(shí)由于發(fā)病條件的限制，癥狀特點(diǎn)尤其是病征表現(xiàn)不明顯，也較難區(qū)別。當(dāng)遇見這種情況時(shí)，一方面可繼續(xù)觀察田間病害發(fā)生情況，另一方面可將病株或病部采回實(shí)驗(yàn)室，用清水第十三頁，共二十四頁。洗凈后，置于保溫保濕條件下，促使癥狀充分表現(xiàn)，再進(jìn)行鑒定。寄生性種子植物所致的病害，在病部很容易看見寄生的植株，線蟲病害在病部有時(shí)也能看見線蟲。病毒、類病毒、植原體等所致的病害都不產(chǎn)生病征，但它們的病狀有顯著的特點(diǎn)，如變色、畸形等全株性病狀，這些病狀表現(xiàn)首先是從分枝頂端開始，然后再其他部分陸續(xù)出現(xiàn)。確診這幾種病害，如內(nèi)含體的觀察，抗生素處理試驗(yàn)，等等。第十四頁，共二十四頁。病原鑒定傳染性病害的病原種類很多,一般說病原不同，癥狀也不同，但有時(shí)相同病原在不同部位、不同發(fā)病時(shí)期和不同條件下所致病害癥狀各異；也有病原不同,癥狀相似的情況。如蘋果褐斑病在葉片上可產(chǎn)生同心輪紋狀、針芒狀及混合型三種不同的病斑類型。即使同一病原物在相同的感病部位上，也可表現(xiàn)不同的癥狀。至于病原不同，產(chǎn)生相似癥狀的情況也不少，如桃的細(xì)菌穿孔病、褐斑穿孔病及霉斑穿孔病，在葉片上都表現(xiàn)為穿孔癥狀，但這三種病原是完全不同的。因此僅以癥狀為依據(jù)，往往還不能對病害作出確切的診斷，必須進(jìn)一步做病原鑒定，才能得出可靠結(jié)果。第十五頁，共二十四頁。

作病原鑒定時(shí)，從病部表面或組織中發(fā)現(xiàn)的病原物，無論是真菌、細(xì)菌或線蟲，都不能立即確定這就是該病的病原物。因?yàn)樵诓〔窟€常常有一些二次寄生菌、腐生菌及腐生線蟲，做病組織鏡檢時(shí)，應(yīng)排除雜菌干擾,分清那一種是真正的病原物。對常見病，一般通過癥狀鑒別、鏡檢鑒別、查閱有關(guān)資料進(jìn)行核對即可確定，對少見的或新的病害，不能僅就病部發(fā)現(xiàn)的可疑病原物倉促的作出結(jié)論，通常應(yīng)按照柯赫氏證病律進(jìn)行致病性的測定后，才能做結(jié)論。第十六頁，共二十四頁。

通過柯赫氏證病律證實(shí)病原后還需對病原做進(jìn)一步鑒定，不同的傳染性病害的病原各具不同特性，因此在病原鑒定時(shí)各有一些特殊的方法，現(xiàn)將病害病原的鑒定方法簡介于后。第十七頁，共二十四頁。真菌病害的病原鑒定

真菌病原的鑒定，通常是由解剖針直接從病組織上挑取子實(shí)體制片,在顯微鏡下觀察其形態(tài)特征,并根據(jù)病菌繁殖結(jié)構(gòu)的形態(tài)、孢子的形態(tài)、大小、顏色及著生情況等進(jìn)行鑒定，一般可根據(jù)這些形態(tài)特征確定屬名。對常見病在進(jìn)行癥狀鑒別及鏡檢病原后即可確定病原真菌種名和病名。對少見的或新發(fā)現(xiàn)的病害的病原真菌必須進(jìn)行致病性鑒定。在確定致病性后，可通過對有性、無性孢子等繁殖器官體積大小的測定，分清其它形態(tài)特征和查閱有關(guān)資料，查證核實(shí)后才能確定病原的種，有些病原真菌尚需測定其寄主范圍才確定種或變種，對寄生性高度?；恼婢?，在確定其生理小種時(shí)，還要測定它對不同品種或一定的鑒別寄主的致病性反應(yīng)。第十八頁，共二十四頁。細(xì)菌病害

通過癥狀鑒別尚不能確定為細(xì)菌病害時(shí)，需要用顯微鏡檢查病部是否存在大量病原細(xì)菌。植物的細(xì)菌病害大多數(shù)在病組織中都有大量細(xì)菌，用顯微鏡檢查病組織有無細(xì)菌是診斷細(xì)菌病害的簡單而又可靠的方法，但要注意排除雜菌的干擾。檢查時(shí)，要選擇典型、新鮮、早期的病組織，用流水沖洗干凈，吸干水分，用滅菌剪刀將病部剪下。大小懷0.5—1cm。置于消毒載玻片中央，加入滅菌生理食鹽水或滅菌水一滴，然后用滅菌剪刀或解剖針將病組織從中心處撕破，加上蓋玻片，靜置10分鐘后進(jìn)行顯微鏡檢查。注意觀察病組織周圍，如發(fā)現(xiàn)有大量細(xì)菌似云霧狀逸出，即可確定為細(xì)菌病害。一般常見病經(jīng)過田間觀察，癥狀鑒別及鏡檢病原為細(xì)菌時(shí)。即可確定病名及病菌種名。少見的或新的細(xì)菌病害，在鏡檢后確定病原細(xì)菌時(shí)，除采用柯赫氏證病律證實(shí)這種細(xì)菌為該病的病原體外，要確定該病原細(xì)菌的屬、種時(shí)。還要觀察記載和測定細(xì)菌的形態(tài)、染色反應(yīng)、培養(yǎng)性狀、生理特性、生化反應(yīng)、DNA中G+C的克分子百分比以及血清學(xué)反應(yīng)等。有的還需要進(jìn)行噬菌體測定。第十九頁，共二十四頁。

植原體、螺原體的鑒定1.采用電子顯微鏡對病株組織或帶病媒介昆蟲組織進(jìn)行超薄切片進(jìn)行檢查，一般媒介昆蟲是取唾液腺組織。在檢查時(shí)必須用相應(yīng)的健株組織做對照。若病組織中或帶菌昆蟲發(fā)現(xiàn)菌體，而在對照中沒發(fā)現(xiàn)，即得證明。也可利用光學(xué)顯微鏡暗視野法或相差顯微鏡直接觀察病植物維管束抽出液或培養(yǎng)物懸液中的螺原體2.治療試驗(yàn)：對病植物施用四環(huán)素和青霉素。根據(jù)其敏感性不同和施用后的癥狀是否消失或減輕的情況來判斷病原。第二十頁，共二十四頁。病毒病害和類病毒病害的鑒定病毒病害的鑒定，過去主要是根據(jù)癥狀特點(diǎn)、傳播方式、寄主范圍、鑒別寄主上癥狀的表現(xiàn)、物理性狀以及交互保護(hù)作用等來進(jìn)行。1978年國際病毒命名委員會(huì)海牙會(huì)議以后，提出以病毒分類八項(xiàng)原則作為鑒定新病毒的依據(jù)，不過目前對一般生產(chǎn)上出現(xiàn)的病毒的鑒定，都不必全部按照八項(xiàng)原則，主要還要以其生物學(xué)性、物理性狀、電子顯微鏡觀察病毒的立體形態(tài)和用血清學(xué)方法，然測定的結(jié)果等為依據(jù),然后與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的病毒進(jìn)行分析，最后確定其種類。第二十一頁，共二十四頁。類病毒的鑒定采用下列三種方法：1.指示植物：植物類病毒象植物病毒一樣也有特定寄主，在這些寄主上，類病毒有特異反應(yīng)，利用這些寄主可以診斷類病毒，如柑橘裂皮病類病毒的指示植物有利瑪橘的Rangpur品種和構(gòu)椽的Etrog品種以及爪哇三七等。用這種方法在生產(chǎn)上進(jìn)行診斷較切實(shí)可行，2.凝膠電泳：此法應(yīng)用比較廣，即通過測定膠柱上類病毒的RNA轉(zhuǎn)錄成DNA，由于這種DNA鏈與RNA鏈?zhǔn)峭耆パa(bǔ)的，它一碰到和模板RNA相同的核酸分子量就與之結(jié)合。這種方法非常靈敏，比凝膠電泳的靈敏度高的多。一般在一天內(nèi)即可完成測定工作。第二十二頁，共二十四頁。線蟲病害的病原鑒定

病原線蟲的病原鑒定，一般是將已初步確定為線蟲病害病部產(chǎn)生的蟲癭或腫瘤切開，挑取線蟲制片或病組織切片鏡檢，根據(jù)線蟲的形態(tài)可確定其分類地位，但有的線蟲病害不形成蟲癭，從病部也較難看見蟲體，對這些病原線蟲的鑒定需要采用漏斗分離法，或葉片染色法等進(jìn)行檢查，鑒定時(shí)要排除腐生線蟲的干擾。特別是對寄生在植物地下部位的線蟲病害，更要排除土壤中腐生線蟲的干擾，必要時(shí)也應(yīng)進(jìn)行人工接種，通過致病性測定后再確診。第二十三頁，共二十四頁。內(nèi)容梗概第四節(jié)林木病害的診斷。但有些專性寄生物如病毒、植原體、霜霉菌、白粉菌和一些銹菌等，目前還不能在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可采用其他方法來加以證明。如線蟲和病毒病害，在進(jìn)行人工接種時(shí)，直接用病株組織里的線蟲或采用病毒的汁液或或帶毒組織、昆蟲等進(jìn)行接種，當(dāng)接種株發(fā)病后，再從這種病株上取線蟲或病毒汁液或帶毒組織、昆蟲等，用同樣方法再進(jìn)行接種，當(dāng)?shù)玫酵瑯咏Y(jié)果后才能證實(shí)該病的病原為這種線蟲或這種病毒?；蛘咄ㄟ^對土壤、肥料、氣象以及大氣、藥物施用等的調(diào)查來判斷。傳染性病害的病原有真菌、細(xì)菌、植原體、病毒、類病毒、線蟲及寄生性種子植物等，這些病原物所致的病害都具有傳染性，在田間發(fā)生時(shí)