人教版高中生物選修3全套課件

人教版高中生物選修3全套課件人教版高中生物選修3全套課件操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程結(jié)果生物體外基因ＤＮＡ分子水平剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)人類需要的基因產(chǎn)物一、基因工程DNA重組技術(shù)實(shí)質(zhì)：基因重組操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程結(jié)果生物體外基因ＤＮＡ分二、基因操作的工具1、基因的剪刀——限制酶2、基因的針線——DNA連接酶3、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體二、基因操作的工具1、基因的剪刀——限制酶2、基因的針線——2、基因的的針線——DNA連接酶連接的部位：磷酸二酯鍵（在“梯子”的扶手處），不是氫鍵（在“梯子”的踏板處）。結(jié)果：兩個相同的黏性末端的連接。

思考（１）用DNA連接酶連接兩個相同的黏性末端要連接幾個磷酸二酯鍵？（２）用限制酶切一個特定基因要切斷幾個磷酸二酯鍵？２個４個2、基因的的針線——DNA連接酶連接的部位：磷酸二酯鍵（在３、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體作用：具備的條件種類：將外源基因送入受體細(xì)胞。能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存具有多個限制酶切點(diǎn)具有某些標(biāo)記基因質(zhì)粒、噬菌體的衍生物和動植物病毒。使用運(yùn)載體的目的：用它作為運(yùn)載工具，將目的基因送到宿主細(xì)胞中去。３、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體作用：將外源基因送入受體細(xì)胞。能質(zhì)粒上會存在某些標(biāo)記基因，標(biāo)記基因有什么用途？（鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因并篩選含目的基因的受體細(xì)胞）

思考質(zhì)粒上會存在某些標(biāo)記基因，標(biāo)記基因有什么用途？（鑒別受體細(xì)三、基因操作的基本步驟1、目的基因的獲取2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4、目的基因的檢測和鑒定三、基因操作的基本步驟1、目的基因的獲取2、基因表達(dá)載體的構(gòu)1、目的基因的獲取(一)、目的基因主要是______________________編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因（二）、獲取目的基因的常用方法有哪些?（1）從基因文庫中獲?。?）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增（3）人工合成1、目的基因的獲取(一)、目的基因主要是__________（1）、從基因文庫中獲取目的基因

將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫.基因文庫

基因組文庫部分基因文庫（如:cDNA文庫）基因文庫:（1）、從基因文庫中獲取目的基因?qū)⒑心撤N生物①概念：PCR全稱為_______________，是一項(xiàng)在生物____復(fù)制___________的核酸合成技術(shù)③條件：___________、_______________、___________、___________

.

②原理：__________多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外特定DNA片段DNA雙鏈復(fù)制模板DNA四種脫氧核苷酸DNA引物熱穩(wěn)定DNA聚合酶利用PCR擴(kuò)增目的基因①概念：PCR全稱為_______________，是一項(xiàng)④過程：a、DNA變性（90℃-95℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成___________b、退火（復(fù)性55℃-60℃）：系統(tǒng)溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部________。c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，合成與模板互補(bǔ)的________。D、循環(huán)氫鍵單鏈DNA雙鏈DNA鏈④過程：a、DNA變性（90℃-95℃）：雙鏈DNA模板b、人工合成：——根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成人工合成：——根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA蛋白質(zhì)的氨基酸2基因表達(dá)載體的構(gòu)建：它們有什么作用？a、目的基因b、啟動子c、終止子d、標(biāo)記基因位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合位點(diǎn)位于基因的末端,終止轉(zhuǎn)錄鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因并篩選含目的基因的受體細(xì)胞2基因表達(dá)載體的構(gòu)建：它們有什么作用？a、目的基因b、啟動常用的受體細(xì)胞：

有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細(xì)胞等。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原理借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的受體細(xì)胞：有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法②基因槍法③花粉管通道法（2）將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞顯微注射技術(shù)：將基因表達(dá)載體提純，用顯微儀注射到受精卵中（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（2）將目的基因?qū)В?）導(dǎo)入微生物細(xì)胞①原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少用Ca2+處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子②方法：（3）導(dǎo)入微生物細(xì)胞①原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)四、目的基因的檢測與鑒定檢測①導(dǎo)入檢測：目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞DNADNA——DNA分子雜交②表達(dá)檢測轉(zhuǎn)錄檢測——分子雜交翻譯檢測——抗原抗體雜交分子檢測法鑒定抗蟲鑒定抗病鑒定活性鑒定等個體水平的鑒定四、目的基因的檢測與鑒定檢測①導(dǎo)入檢測：目的基因是否導(dǎo)入受體小結(jié)基因工程的基本內(nèi)容基因操作的基本步驟基因操作的工具限制性內(nèi)切酶DNA連接酶運(yùn)載體目的基因與運(yùn)載體結(jié)合目的基因的檢測和表達(dá)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的提取小結(jié)基因工程的基本內(nèi)容基因操作基因操作限制性內(nèi)切酶D基因工程藥品的生產(chǎn)基因診斷返回基因治療（一）基因工程與醫(yī)藥衛(wèi)生基因工程的應(yīng)用基因工程藥品的生產(chǎn)基因診斷返回基因治療（一）基因工程與蛋白質(zhì)工程

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程流程圖從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測應(yīng)用的氨基酸序列找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列蛋白質(zhì)工程流程圖從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)比較：基因工程和蛋白質(zhì)工程基因工程蛋白質(zhì)工程相同點(diǎn)都要改造基因，都屬于分子水平產(chǎn)生新的基因型，無新基因基因（型）產(chǎn)生的蛋白質(zhì)原有的新的聯(lián)系蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)，是基因工程的應(yīng)用和延伸比較：基因工程和蛋白質(zhì)工程基因工程蛋白質(zhì)工程相同點(diǎn)都要改造基32．用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖-21所示。

32．用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖-21（1）經(jīng)過程②獲得的目的基因兩側(cè)除應(yīng)含有相關(guān)

的酶切位點(diǎn)外，目的基因的兩端還必須有

。（2）由圖分析，構(gòu)建的重組質(zhì)粒上含有的標(biāo)記基因是

基因。（3）過程⑤采用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加

，以保證受體細(xì)胞能培養(yǎng)再生成植株。限制酶啟運(yùn)子和終止子卡那霉素抗性植物激素（1）經(jīng)過程②獲得的目的基因兩側(cè)除應(yīng)含有相關(guān)21．（6分，每空1分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn)，圖甲、圖乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請回答下列問題：

21．（6分，每空1分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切（1）一個圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有

、

個游離的磷酸基團(tuán)。（2）若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越

。（1）一個圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是

。（4）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入

酶。（5）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了

。（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna21．(6分，每空1分)

（1）0、2（2）高（3）SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因（4）DNA連接（5）鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞21．(6分，每空1分)

專題2細(xì)胞工程

專題2細(xì)胞工程

細(xì)胞工程應(yīng)用的原理和方法研究的水平研究的目的細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品概念分類植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程細(xì)胞工程應(yīng)用的原理和方法細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)細(xì)胞整體水平或植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是：

植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交全能性高低：

①受精卵＞胚胎干細(xì)胞＞生殖細(xì)胞＞體細(xì)胞②植物細(xì)胞＞動物細(xì)胞2.1.1植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是：植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的條件1）離體細(xì)胞、組織或器官2）適宜的外界環(huán)境條件，例如無菌、適宜的溫度、濕度、光照等3）培養(yǎng)基（一定的營養(yǎng)物質(zhì)，植物激素）

植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的條件植物組織培養(yǎng)的過程離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化（又叫去分化）愈傷組織（排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞）再分化根或芽等器官植物體植物組織培養(yǎng)的過程離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化（又叫去分植物A細(xì)胞植物B細(xì)胞去壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合融合體再生壁雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂愈傷組織雜種植株去壁的常用方法：酶解法（纖維素酶、果膠酶等）

原生質(zhì)體融合方法：物理法：離心、振動、電刺激等化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）植物體細(xì)胞雜交過程示意圖植物A細(xì)胞植物B細(xì)胞去壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合融合概念：應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)，快速繁殖植物（也叫快速繁殖技術(shù)）原理：植物細(xì)胞的全能性優(yōu)點(diǎn)：繁殖率高，可大批量生產(chǎn)取材少培養(yǎng)周期短保持優(yōu)良性狀微型繁殖2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用概念：應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)，快速繁殖植物（也叫快速繁殖技術(shù)）微型作物脫毒病毒在作物體內(nèi)逐年積累，會導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差分生區(qū)附近（莖尖、根尖）的病毒極少，甚至沒有采用莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)作物脫毒病毒在作物體內(nèi)逐年積累，會導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差人工種子結(jié)構(gòu)：人工薄膜+胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽技術(shù)：植物組織培養(yǎng)原理：植物細(xì)胞全能性人工種子結(jié)構(gòu)：單倍體育種方法：花藥離體培養(yǎng)（植物組織培養(yǎng)）

技術(shù)：組織培養(yǎng)獲得單倍體秋水素處理單倍體的幼苗，使染色體加倍優(yōu)點(diǎn)：明顯縮短了育種年限后代穩(wěn)定遺傳單倍體育種方法：2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用繁殖植物的新途徑微型育種作物脫毒人工種子育種新方法單倍體育種誘導(dǎo)突變體細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用繁殖植物的新途徑細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)紅豆杉與紫杉醇人參皂甘的生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)紅豆杉與紫杉醇人參皂甘的生產(chǎn)動物細(xì)胞工程2.2動物細(xì)胞工程2.2動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植動物細(xì)胞工程常用技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植動物細(xì)胞工程常用2、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。（分解彈性纖維）2、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸液細(xì)胞貼壁過程細(xì)胞貼壁過程植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖動物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞動物細(xì)胞融合與單克隆抗體2.2.2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體2.2.21、動物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）－2個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程細(xì)胞A細(xì)胞B雜交細(xì)胞滅活的病毒物理法化學(xué)法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒離心振動電激聚乙二醇一、動物細(xì)胞融合1、動物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）－2個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜一定流動性、細(xì)胞膜一定流動性細(xì)胞融合的方法去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法物理（離心、振蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒用途獲得雜種植株制備單克隆抗體植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動物單克隆抗體由單個B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克?。?，形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。

特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、能大量制備、

單克隆抗體由單個B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克隆），形成基如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特性利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能單克隆抗體制備過程

注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融

1下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中B為________過程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______5、C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個階段。制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒雙親細(xì)胞分泌特異性抗體無限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC1下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿2、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答

(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自___________。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是__________，然后用

酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開來。這樣做的目的是_______________.(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行。瓶中的培養(yǎng)基成分有_______

___等。(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用_____處理，然后配置成___________，再分裝。(5)在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是_________________________。幼齡動物的器官或組織、動物胚胎剪碎胰蛋白

使每個細(xì)胞能與培養(yǎng)液接觸

葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清

胰蛋白酶細(xì)胞懸液細(xì)胞沒有發(fā)生瘤癌變2、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答幼齡動22．(11分，每空1分)下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答：(1)若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已處理，一般用

法除去

；A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的化學(xué)方法是用

加以誘導(dǎo)。融合完成的標(biāo)志是

。(2)若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞一般應(yīng)用

技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。(3)若A、B是動物細(xì)胞，一般取自

，然后用

處理使其分散開來。(4)若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了

，圖中B為

。在A、B到C的過程中，所形成的C有

種，用來培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是

。22．(11分，每空1分)下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖22．(11分，每空1分)

（1）酶解細(xì)胞壁聚乙二醇形成新的細(xì)胞壁（2）植物組織培養(yǎng)（3）幼齡動物組織或胚胎胰蛋白酶（4）相應(yīng)的抗原骨髓瘤細(xì)胞3雜交瘤細(xì)胞22．(11分，每空1分)專題3胚胎工程專題3:胚胎工程專題3胚胎工程專題3:胚胎工程操作對象：早期胚胎和配子技術(shù)手段：胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等理論基礎(chǔ)：哺乳動物的受精卵和早期胚胎的發(fā)育規(guī)律操作對象：早期胚胎和配子實(shí)例1：1.下列不屬于胚胎工程技術(shù)的是（）A.體外受精B.胚胎分割、胚胎移植C.胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)D.轉(zhuǎn)基因鯉魚的培育實(shí)例1：1.下列不屬于胚胎工程技術(shù)的是（）精原細(xì)胞有絲分裂初級精母細(xì)胞次級精母細(xì)胞精細(xì)胞精子MⅠ第一階段第二階段第三階段MⅡ精子發(fā)生的過程多個精原細(xì)胞染色體復(fù)制變形精原細(xì)胞有絲分裂初級精母細(xì)胞次級精母細(xì)胞精細(xì)胞精子MⅠ第一階精子細(xì)胞變形中的主要變化：1.細(xì)胞核——2.高爾基體——3.中心體——4.線粒體——5.細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)——精子頭的主要部分頭部的頂體精子的尾線粒體鞘(尾的基部)原生質(zhì)滴(球狀,最后脫落)精子細(xì)胞變形中的主要變化：1.細(xì)胞核——精子頭的主要部分頭部2.卵子的發(fā)生(1)發(fā)生部位：卵巢(2)時間：減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成；減數(shù)第二次分裂是在精子和卵子結(jié)合的過程完成的。2.卵子的發(fā)生(1)發(fā)生部位：卵巢卵原細(xì)胞有絲分裂多個卵原細(xì)胞染色體復(fù)制初級卵母細(xì)胞MⅠ第一極體次級卵母細(xì)胞兩個第二極體第二極體卵子退化消失（3）卵子發(fā)生過程MⅡ排卵前后完成在受精過程完成被卵泡細(xì)胞包圍,形成卵泡胎兒時期完成卵原細(xì)胞有絲分裂多個卵原細(xì)胞染色體復(fù)制初級卵母細(xì)胞MⅠ第一極1.一個卵泡中能形成幾個成熟的卵子？2.排卵是指卵子從卵泡中排出，還是指卵泡從卵巢中排出？3.剛排出的卵是成熟的卵子嗎？它在母體的什么部位與精子受精？答：剛排出的卵子尚未完全成熟，僅完成第一次減數(shù)分裂，需要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，直到減數(shù)第二次分裂的中期才能與精子結(jié)合完成受精過程。排出的卵子是在輸卵管內(nèi)與精子受精的。答：正常情況下，一個卵泡只能形成一個成熟的卵子。答：是指卵子從卵泡中排出。1.一個卵泡中能形成幾個成熟的卵子？答：剛排出的卵二)受精階段:1)精子穿越放射冠和透明帶

頂體反應(yīng)使頂體內(nèi)的頂體酶釋放出來并溶解放射冠內(nèi)的卵丘細(xì)胞

透明帶反應(yīng)是防止多精入卵受精的第一道屏障2)精子進(jìn)入卵細(xì)胞膜

卵細(xì)胞膜反應(yīng)是防止多精入卵受精的第二道屏障3)原核形成：雄原核形成和雌原核形成4)配子結(jié)合：雌雄原核融合形成合子(受精卵)受精二)受精階段:受精穿過放射冠：在卵子外圍集聚有幾十個精子，它們首先穿放射冠。穿過放射冠：在卵子外圍集聚有幾十個精子，它們首先穿放射冠。受精卵卵裂期桑椹胚囊胚（內(nèi)含囊胚腔）原腸胚（內(nèi)含原腸腔）胎兒形成：在透明帶內(nèi)進(jìn)行有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積并不增加，或略有減少。：由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞數(shù)在32個左右，排列緊密，形似桑椹內(nèi)細(xì)胞團(tuán)：發(fā)育成胎兒各組織滋養(yǎng)層細(xì)胞：發(fā)育成胎膜和胎盤：最初發(fā)育在輸卵管進(jìn)行有絲分裂三.胚胎發(fā)育滋養(yǎng)層外胚層中胚層內(nèi)胚層原腸腔受精卵卵裂期桑椹胚囊胚（內(nèi)含囊胚腔）原腸胚（內(nèi)含原腸腔）胎兒試管動物技術(shù)

是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件試管動物技術(shù)過程：第一步：體外受精第二步：早期胚胎的培養(yǎng)第三步：胚胎移植請同學(xué)們分小組設(shè)計(jì)并繪制“試管?！惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖解。試管動物技術(shù)過程：第一步：體外受精第二步：早期胚胎的培養(yǎng)第胚胎移植采集卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)受體牛小結(jié)（時期：）1）超數(shù)排卵（試劑）2）活體取卵（儀器）3）從屠宰的卵巢取卵方法①②③（方法，試劑）（試劑）（培養(yǎng)條件、目的階段）成熟的卵子獲能的精子MII中期方法胚胎移植采集卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎人教版高中生物選修3全套課件人教版高中生物選修3全套課件操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程結(jié)果生物體外基因ＤＮＡ分子水平剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)人類需要的基因產(chǎn)物一、基因工程DNA重組技術(shù)實(shí)質(zhì)：基因重組操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程結(jié)果生物體外基因ＤＮＡ分二、基因操作的工具1、基因的剪刀——限制酶2、基因的針線——DNA連接酶3、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體二、基因操作的工具1、基因的剪刀——限制酶2、基因的針線——2、基因的的針線——DNA連接酶連接的部位：磷酸二酯鍵（在“梯子”的扶手處），不是氫鍵（在“梯子”的踏板處）。結(jié)果：兩個相同的黏性末端的連接。

思考（１）用DNA連接酶連接兩個相同的黏性末端要連接幾個磷酸二酯鍵？（２）用限制酶切一個特定基因要切斷幾個磷酸二酯鍵？２個４個2、基因的的針線——DNA連接酶連接的部位：磷酸二酯鍵（在３、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體作用：具備的條件種類：將外源基因送入受體細(xì)胞。能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存具有多個限制酶切點(diǎn)具有某些標(biāo)記基因質(zhì)粒、噬菌體的衍生物和動植物病毒。使用運(yùn)載體的目的：用它作為運(yùn)載工具，將目的基因送到宿主細(xì)胞中去。３、基因的運(yùn)輸工具——運(yùn)載體作用：將外源基因送入受體細(xì)胞。能質(zhì)粒上會存在某些標(biāo)記基因，標(biāo)記基因有什么用途？（鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因并篩選含目的基因的受體細(xì)胞）

思考質(zhì)粒上會存在某些標(biāo)記基因，標(biāo)記基因有什么用途？（鑒別受體細(xì)三、基因操作的基本步驟1、目的基因的獲取2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4、目的基因的檢測和鑒定三、基因操作的基本步驟1、目的基因的獲取2、基因表達(dá)載體的構(gòu)1、目的基因的獲取(一)、目的基因主要是______________________編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因（二）、獲取目的基因的常用方法有哪些?（1）從基因文庫中獲?。?）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增（3）人工合成1、目的基因的獲取(一)、目的基因主要是__________（1）、從基因文庫中獲取目的基因

將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫.基因文庫

基因組文庫部分基因文庫（如:cDNA文庫）基因文庫:（1）、從基因文庫中獲取目的基因?qū)⒑心撤N生物①概念：PCR全稱為_______________，是一項(xiàng)在生物____復(fù)制___________的核酸合成技術(shù)③條件：___________、_______________、___________、___________

.

②原理：__________多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外特定DNA片段DNA雙鏈復(fù)制模板DNA四種脫氧核苷酸DNA引物熱穩(wěn)定DNA聚合酶利用PCR擴(kuò)增目的基因①概念：PCR全稱為_______________，是一項(xiàng)④過程：a、DNA變性（90℃-95℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成___________b、退火（復(fù)性55℃-60℃）：系統(tǒng)溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部________。c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，合成與模板互補(bǔ)的________。D、循環(huán)氫鍵單鏈DNA雙鏈DNA鏈④過程：a、DNA變性（90℃-95℃）：雙鏈DNA模板b、人工合成：——根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成人工合成：——根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA蛋白質(zhì)的氨基酸2基因表達(dá)載體的構(gòu)建：它們有什么作用？a、目的基因b、啟動子c、終止子d、標(biāo)記基因位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合位點(diǎn)位于基因的末端,終止轉(zhuǎn)錄鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因并篩選含目的基因的受體細(xì)胞2基因表達(dá)載體的構(gòu)建：它們有什么作用？a、目的基因b、啟動常用的受體細(xì)胞：

有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細(xì)胞等。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原理借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的受體細(xì)胞：有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法②基因槍法③花粉管通道法（2）將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞顯微注射技術(shù)：將基因表達(dá)載體提純，用顯微儀注射到受精卵中（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（2）將目的基因?qū)В?）導(dǎo)入微生物細(xì)胞①原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少用Ca2+處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子②方法：（3）導(dǎo)入微生物細(xì)胞①原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)四、目的基因的檢測與鑒定檢測①導(dǎo)入檢測：目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞DNADNA——DNA分子雜交②表達(dá)檢測轉(zhuǎn)錄檢測——分子雜交翻譯檢測——抗原抗體雜交分子檢測法鑒定抗蟲鑒定抗病鑒定活性鑒定等個體水平的鑒定四、目的基因的檢測與鑒定檢測①導(dǎo)入檢測：目的基因是否導(dǎo)入受體小結(jié)基因工程的基本內(nèi)容基因操作的基本步驟基因操作的工具限制性內(nèi)切酶DNA連接酶運(yùn)載體目的基因與運(yùn)載體結(jié)合目的基因的檢測和表達(dá)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的提取小結(jié)基因工程的基本內(nèi)容基因操作基因操作限制性內(nèi)切酶D基因工程藥品的生產(chǎn)基因診斷返回基因治療（一）基因工程與醫(yī)藥衛(wèi)生基因工程的應(yīng)用基因工程藥品的生產(chǎn)基因診斷返回基因治療（一）基因工程與蛋白質(zhì)工程

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程流程圖從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測應(yīng)用的氨基酸序列找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列蛋白質(zhì)工程流程圖從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)比較：基因工程和蛋白質(zhì)工程基因工程蛋白質(zhì)工程相同點(diǎn)都要改造基因，都屬于分子水平產(chǎn)生新的基因型，無新基因基因（型）產(chǎn)生的蛋白質(zhì)原有的新的聯(lián)系蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)，是基因工程的應(yīng)用和延伸比較：基因工程和蛋白質(zhì)工程基因工程蛋白質(zhì)工程相同點(diǎn)都要改造基32．用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖-21所示。

32．用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖-21（1）經(jīng)過程②獲得的目的基因兩側(cè)除應(yīng)含有相關(guān)

的酶切位點(diǎn)外，目的基因的兩端還必須有

。（2）由圖分析，構(gòu)建的重組質(zhì)粒上含有的標(biāo)記基因是

基因。（3）過程⑤采用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加

，以保證受體細(xì)胞能培養(yǎng)再生成植株。限制酶啟運(yùn)子和終止子卡那霉素抗性植物激素（1）經(jīng)過程②獲得的目的基因兩側(cè)除應(yīng)含有相關(guān)21．（6分，每空1分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn)，圖甲、圖乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請回答下列問題：

21．（6分，每空1分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切（1）一個圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有

、

個游離的磷酸基團(tuán)。（2）若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越

。（1）一個圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是

。（4）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入

酶。（5）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了

。（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna21．(6分，每空1分)

（1）0、2（2）高（3）SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因（4）DNA連接（5）鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞21．(6分，每空1分)

專題2細(xì)胞工程

專題2細(xì)胞工程

細(xì)胞工程應(yīng)用的原理和方法研究的水平研究的目的細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品概念分類植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程細(xì)胞工程應(yīng)用的原理和方法細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)細(xì)胞整體水平或植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是：

植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交全能性高低：

①受精卵＞胚胎干細(xì)胞＞生殖細(xì)胞＞體細(xì)胞②植物細(xì)胞＞動物細(xì)胞2.1.1植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是：植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的條件1）離體細(xì)胞、組織或器官2）適宜的外界環(huán)境條件，例如無菌、適宜的溫度、濕度、光照等3）培養(yǎng)基（一定的營養(yǎng)物質(zhì)，植物激素）

植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的條件植物組織培養(yǎng)的過程離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化（又叫去分化）愈傷組織（排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞）再分化根或芽等器官植物體植物組織培養(yǎng)的過程離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化（又叫去分植物A細(xì)胞植物B細(xì)胞去壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合融合體再生壁雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂愈傷組織雜種植株去壁的常用方法：酶解法（纖維素酶、果膠酶等）

原生質(zhì)體融合方法：物理法：離心、振動、電刺激等化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）植物體細(xì)胞雜交過程示意圖植物A細(xì)胞植物B細(xì)胞去壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合融合概念：應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)，快速繁殖植物（也叫快速繁殖技術(shù)）原理：植物細(xì)胞的全能性優(yōu)點(diǎn)：繁殖率高，可大批量生產(chǎn)取材少培養(yǎng)周期短保持優(yōu)良性狀微型繁殖2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用概念：應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)，快速繁殖植物（也叫快速繁殖技術(shù)）微型作物脫毒病毒在作物體內(nèi)逐年積累，會導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差分生區(qū)附近（莖尖、根尖）的病毒極少，甚至沒有采用莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)作物脫毒病毒在作物體內(nèi)逐年積累，會導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差人工種子結(jié)構(gòu)：人工薄膜+胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽技術(shù)：植物組織培養(yǎng)原理：植物細(xì)胞全能性人工種子結(jié)構(gòu)：單倍體育種方法：花藥離體培養(yǎng)（植物組織培養(yǎng)）

技術(shù)：組織培養(yǎng)獲得單倍體秋水素處理單倍體的幼苗，使染色體加倍優(yōu)點(diǎn)：明顯縮短了育種年限后代穩(wěn)定遺傳單倍體育種方法：2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用繁殖植物的新途徑微型育種作物脫毒人工種子育種新方法單倍體育種誘導(dǎo)突變體細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用繁殖植物的新途徑細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)紅豆杉與紫杉醇人參皂甘的生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)紅豆杉與紫杉醇人參皂甘的生產(chǎn)動物細(xì)胞工程2.2動物細(xì)胞工程2.2動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植動物細(xì)胞工程常用技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植動物細(xì)胞工程常用2、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。（分解彈性纖維）2、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸液細(xì)胞貼壁過程細(xì)胞貼壁過程植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖動物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞動物細(xì)胞融合與單克隆抗體2.2.2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體2.2.21、動物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）－2個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程細(xì)胞A細(xì)胞B雜交細(xì)胞滅活的病毒物理法化學(xué)法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒離心振動電激聚乙二醇一、動物細(xì)胞融合1、動物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）－2個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜一定流動性、細(xì)胞膜一定流動性細(xì)胞融合的方法去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法物理（離心、振蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒用途獲得雜種植株制備單克隆抗體植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動物單克隆抗體由單個B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克隆），形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。

特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、能大量制備、

單克隆抗體由單個B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克?。?，形成基如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特性利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能單克隆抗體制備過程

注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融

1下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中B為________過程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______5、C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個階段。制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒雙親細(xì)胞分泌特異性抗體無限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC1下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿2、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答

(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自___________。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是__________，然后用

酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開來。這樣做的目的是_______________.(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行。瓶中的培養(yǎng)基成分有_______

___等。(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用_____處理，然后配置成___________，再分裝。(5)在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是_________________________。幼齡動物的器官或組織、動物胚胎剪碎胰蛋白

使每個細(xì)胞能與培養(yǎng)液接觸

葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清

胰蛋白酶細(xì)胞懸液細(xì)胞沒有發(fā)生瘤癌變2、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答幼齡動22．(11分，每空1分)下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答：(1)若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已處理，一般用

法除去

；A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的化學(xué)方法是用

加以誘導(dǎo)。融合完成的標(biāo)志是

。(2)若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞一般應(yīng)用

技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。(3)若A、B是動物細(xì)胞，一般取自

，然后用

處理使其分散開來。(4)若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了

，圖中B為

。在A、B到C的過程中，所形成的C有

種，用來培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是

。22．(11分，每空1分)下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖22．(11分，每空1分)

（1）酶解細(xì)胞壁聚乙二醇形成新的細(xì)胞壁（2）植物組織培養(yǎng)（3）幼齡動物組織或胚胎