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臨床常用免疫學(xué)檢查蘭州大學(xué)第一醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷教研室李燕平1臨床常用免疫學(xué)檢查蘭州大學(xué)第一醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷教研室1基本概念(1)
免疫(Immune)是機(jī)體識(shí)別“自身”與“非己”抗原,對(duì)自身抗原形成天然免疫耐受,對(duì)“非己”抗原產(chǎn)生排斥作用的一種生理功能。正常情況下,這種生理功能對(duì)機(jī)體有益,可產(chǎn)生抗感染、抗腫瘤等維持機(jī)體生理平衡和穩(wěn)定的免疫保護(hù)作用。在一定條件下,當(dāng)免疫功能失調(diào)時(shí),也會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生有害的反應(yīng)和結(jié)果,如引發(fā)超敏反應(yīng)、自身免疫病和腫瘤.
2基本概念(1)免疫(Immune)2免疫功能
▲
是免疫系統(tǒng)在識(shí)別和清除“非己”抗原的過程中所產(chǎn)生的各種生物學(xué)作用的總稱。
▲主要包括免疫防御免疫自穩(wěn)免疫監(jiān)視3免疫功能免疫防御免疫自穩(wěn)免疫監(jiān)視3免疫防御(Immunologicaldefence)
---是機(jī)體排斥微生物的侵襲及其他外源性抗原異物的一種免疫保護(hù)功能
■正常時(shí)可產(chǎn)生抗感染免疫的作用,防御功能過強(qiáng)會(huì)產(chǎn)生超敏反應(yīng),
■過弱則產(chǎn)生免疫缺陷(后兩種情況均屬異常反應(yīng))4免疫防御(Immunologicaldefence)4免疫自穩(wěn)(Homeostasis)
---是機(jī)體免疫系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定的一種生理功能■正常時(shí):機(jī)體可及時(shí)清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的血細(xì)胞和抗原-抗體復(fù)合物,而對(duì)自身成份保持免疫耐受
■異常時(shí):發(fā)生生理功能紊亂、自身免疫病等5免疫自穩(wěn)(Homeostasis)5免疫監(jiān)視
(Immunesurveillance)
---是機(jī)體免疫系統(tǒng)及時(shí)識(shí)別、清除體內(nèi)突變、畸變和病毒干擾細(xì)胞的一種生理保護(hù)作用。機(jī)體借以防止、監(jiān)視和抑制惡性腫瘤在體內(nèi)生長(zhǎng)。
■喪失:機(jī)體突變細(xì)胞失控,
有可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生;
或出現(xiàn)病毒的持續(xù)感染。6免疫監(jiān)視(Immunesurveillance)6
免疫學(xué)檢查內(nèi)容
1.血清免疫球蛋白檢測(cè)2.血清補(bǔ)體檢測(cè)3.細(xì)胞免疫檢測(cè)4.腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)5.自身抗體檢測(cè)6.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)7.器官與骨髓移植的檢測(cè)7
免疫學(xué)檢查內(nèi)容
1.血清免疫球蛋白檢測(cè)7一、血清免疫球蛋白測(cè)定(1)免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)
是一組具有抗體活性和(或)抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。Ig由漿細(xì)胞產(chǎn)生,存在于血液和體液(包括組織液和外分泌液)中,也可作為抗原受體表達(dá)于B細(xì)胞表面,稱為膜表面免疫球蛋白。多數(shù)Ig具有抗體活性,可以特異性的識(shí)別和結(jié)合抗原,并引發(fā)一系列生物學(xué)效應(yīng)。所有的抗體均是免疫球蛋白,但并非所有的免疫球蛋白都是抗體。8一、血清免疫球蛋白測(cè)定(1)免疫球蛋白(immunoglo一、血清免疫球蛋白測(cè)定(2)免疫球蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu):
Ig分子由四條肽鏈借二硫鍵連接組成,即兩條相同的重鏈和相同的輕鏈。免疫球蛋白的血清型:
根據(jù)Ig重鏈恒定區(qū)肽鏈抗原特異性的不同,可將分為五類,在人體的含量由多到少依次為:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。9一、血清免疫球蛋白測(cè)定(2)免疫球蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu):9免疫球蛋白的生物學(xué)活性:
■與抗原結(jié)合作用■補(bǔ)體活化作用■親細(xì)胞作用■調(diào)理作用■膜傳遞作用10免疫球蛋白的生物學(xué)活性:10免疫球蛋白G測(cè)定
IgG占血清Ig的70%~80%,大部分抗細(xì)菌、抗病毒、抗毒素抗體都屬于IgG型,具有調(diào)理作用、中和毒素、中和病毒介導(dǎo)ADCC、激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑,也是唯一能通過胎盤的Ig。IgG合成速度快,分解慢,半衰期長(zhǎng),在血中含量最高。
【參考值】:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法7.6-16.6g/L。
IgG11免疫球蛋白G測(cè)定IgG占血清Ig的70%【臨床意義】
■
IgG增高:
多克隆性增高:即IgG、IgA、IgM均增高,常見于各種慢性感染、以及自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。單克隆性增高僅有某一種Ig增高而其他種不增高,主要見于免疫增殖性疾病如MM。
■
IgG降低
見于各種先天性和獲得性體液免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病,也見于病毒感染和應(yīng)用免疫抑制劑患者。IgG12【臨床意義】IgG12
IgA可分為血清型和分泌型■
大部分血清IgA為單體,少量為雙聚體或多聚體。占血清中免疫球蛋白10~15%?!龇置谛驮诜置谝褐惺亲钪饕腎g,在外分泌系統(tǒng)中表現(xiàn)其重要的免疫功能,呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴樣組織可合成大量的分泌型IgA(即sIgA),sIgA性能穩(wěn)定,在局部濃度大,能抑制病原體和有害抗原黏附在黏膜上,阻擋其進(jìn)入體內(nèi);同時(shí)也因其具有條理吞噬和溶解作用,構(gòu)成了黏膜第一防御機(jī)制;與這些部位炎癥、感染、腫瘤等密切相關(guān)。
■母乳中的sIgA提高了嬰兒出生后4-6個(gè)月內(nèi)的局部免疫屏障,常為局部抗體。■
參考值和臨床意義:為了解內(nèi)容IgA免疫球蛋白A測(cè)定13IgA可分為血清型和分泌型IgA免疫球蛋白A測(cè)定13
IgM:
是分子量最大的Ig,為五聚體,半衰期短、出現(xiàn)早、消失快、組織穿透力弱。占血清總Ig的5-10%。
■血型中天然凝集素和冷凝集素的抗體類型是IgM,不能通過胎盤,新生兒臍血中若IgM增高,提示有宮內(nèi)感染。在感染或疫苗接種以后,最先出現(xiàn)的抗體是IgM,是有效的凝集和溶解細(xì)胞的因子。
免疫球蛋白M測(cè)定IgM14IgM:免疫球蛋白M測(cè)定IgM14
IgD:
血清含量極少,其功能尚不完全清楚,已發(fā)現(xiàn)有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和鏈球菌溶血素“O”抗體等均屬IgD,但活性甚低免疫球蛋白D測(cè)定IgD15IgD:免疫球蛋白D測(cè)定IgD15
IgE:
介導(dǎo)?型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生,為重要的變態(tài)反應(yīng)指標(biāo),與寄生蟲感染及過敏有關(guān)免疫球蛋白E測(cè)定IgEIg的檢測(cè)---常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等16IgE:免疫球蛋白E測(cè)定IgEIg的檢測(cè)---常用免疫
IgE:
介導(dǎo)?型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生,為重要的變態(tài)反應(yīng)指標(biāo),與寄生蟲感染及過敏有關(guān)免疫球蛋白E測(cè)定IgEIg的檢測(cè):
常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等Ig的檢測(cè)---常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等17IgE:免疫球蛋白E測(cè)定IgEIg的檢測(cè):17二、血清補(bǔ)體的測(cè)定
補(bǔ)體系統(tǒng):補(bǔ)體加上其調(diào)節(jié)因子和相關(guān)膜蛋白共同組成一個(gè)反應(yīng)系統(tǒng),稱為補(bǔ)體系統(tǒng)。補(bǔ)體系統(tǒng)參與機(jī)體的抗感染及免疫調(diào)節(jié),也可介導(dǎo)病理反應(yīng)(如參與破壞自身組織和細(xì)胞而導(dǎo)致自身免疫病的發(fā)生)補(bǔ)體系統(tǒng)是體內(nèi)主要的免疫系統(tǒng)和放大系統(tǒng)。
補(bǔ)體(complement,C):
存在于人和脊椎動(dòng)物正常新鮮血液及組織液中的一組具有酶樣活性的球蛋白。18二、血清補(bǔ)體的測(cè)定補(bǔ)體系統(tǒng):補(bǔ)體(complement組成
由傳統(tǒng)途徑的9種成分C1~C9,旁路途徑的三種成分及其衍生物B、D、P、H、I等因子組成常作項(xiàng)目總補(bǔ)體溶血活性檢測(cè)、補(bǔ)體旁路途徑溶血活性檢測(cè)、補(bǔ)體C1q檢測(cè)、C3檢測(cè)、C4檢測(cè)等方法單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法等二、血清補(bǔ)體的測(cè)定19組成二、血清補(bǔ)體的測(cè)定19三、自身抗體的檢查自身免疫:
當(dāng)某種原因使自身免疫耐受削弱或破壞,免疫系統(tǒng)會(huì)對(duì)自身成分產(chǎn)生免疫應(yīng)答,這種現(xiàn)象稱為自身免疫自身免疫性病的概念及特征
健康個(gè)體的免疫調(diào)節(jié)功能會(huì)將自身耐受和自身免疫協(xié)調(diào)在一個(gè)相符相承的合理水平。當(dāng)某種原因使自身免疫應(yīng)答過分強(qiáng)烈時(shí),也會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的自身組織、器官損傷或攻能障礙,這種病理狀態(tài)稱為自身免疫?。ˋID)
特征:
■患者血清中可檢出高滴度的自身抗體
■患者組織器官的病理特征為免疫炎癥
■動(dòng)物中可復(fù)制出相應(yīng)的動(dòng)物模型20三、自身抗體的檢查自身免疫:20類風(fēng)濕因子(RF)測(cè)定RF:是抗變性IgG的自身抗體,主要為IgM,也可有見IgG、IgA、IgD、IgE型,可與人或動(dòng)物的變性IgG結(jié)合,而不與正常IgG發(fā)生凝集,最多見于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)患者。RF在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)患者中的檢出率70%,RF陽性支持早期RA的傾向性診斷,如對(duì)于年輕女性應(yīng)進(jìn)行RA和風(fēng)濕熱的鑒別;而對(duì)非活動(dòng)期RA的診斷,需參考病史。RF并不是RA的特異性抗體,在SLE患者約有50%RF陽性,在其他結(jié)締組織病如SS、硬皮病、慢性活動(dòng)性肝炎及老年人中均可有不同程度的陽性率。
■檢測(cè)方法:乳膠凝集法(定性)免疫比濁法(可準(zhǔn)確測(cè)其含量)。21類風(fēng)濕因子(RF)測(cè)定RF:21抗核抗體檢測(cè)(1)ANA:
泛指核成分的抗體,是一種廣泛存在的自身抗體。性質(zhì)主要是IgG,也有IgM、IgA、IgD、IgE,可與不同來源的細(xì)胞核起反應(yīng),無器官特異性和種屬特異性。ANA主要存在與血清中
■抗核抗體(ANA)類型及意義
■
類型:抗核蛋白抗體(DNP),即脫氧核糖蛋白、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等22抗核抗體檢測(cè)(1)ANA:22抗雙鏈DNA(ds-DNA抗核抗體檢測(cè))抗體:抗ds-DNA的靶抗原是細(xì)胞核中DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu),是SLE的標(biāo)志性抗體.抗核抗體檢測(cè)(2)23抗雙鏈DNA(ds-DNA抗核抗體檢測(cè))抗體:抗核抗體抗RNP抗體:即核糖核蛋白,高效價(jià)的抗RNP抗體對(duì)混合性結(jié)締組織病有診斷意義,低效價(jià)的抗RNP抗體可在SLE患者中發(fā)現(xiàn)抗Sm抗體:是SLE的特征性標(biāo)志之一,若抗ds-DNA和抗Sm抗體同時(shí)檢測(cè),可提高SLE的診斷率抗SS-A抗體:為干燥綜合正(SS)的A抗原,抗SS-A抗體主要見于SS,但也見于其他自身免疫病如SLE中抗SS-B抗體:為干燥綜合正(SS)的B抗原,13%的SLE及30%的SS患者有抗SS-B抗體抗ENA抗體:
可提取性核抗原(ENA),多從動(dòng)物胸腺中提取24抗ENA抗體:24組織和細(xì)胞抗體檢測(cè)(1)
抗線粒體抗體(AMA)
是一種針對(duì)肝細(xì)胞質(zhì)中線粒體內(nèi)膜脂蛋白成分的自身抗體,無器官和組織特異性抗體,該抗體主要是IgG.常用大白鼠胃或腎皮質(zhì)作抗原進(jìn)行免疫熒光法測(cè)定【臨床意義】
原發(fā)性膽汁性肝硬化(PAB)可有70%~94%為陽性反應(yīng)或效價(jià)>=1:160;長(zhǎng)期持續(xù)性肝阻塞、慢性活動(dòng)性肝炎、原因不明肝硬化等也呈陽性反應(yīng)25組織和細(xì)胞抗體檢測(cè)(1)抗線粒體抗體(AMA)25抗甲狀腺球蛋白抗體及微粒體抗體:這種抗體可以針對(duì)甲狀腺的多種成分,以甲狀腺球蛋白抗體和微粒體為代表??贵w主要是IgG,可以介導(dǎo)ADCC活性,引起慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎,又稱喬本甲狀腺炎26抗甲狀腺球蛋白抗體及微粒體抗體:26
抗乙酰膽堿抗體(AchR)抗AchR抗體的檢測(cè)對(duì)重癥肌無力(MG)具有診斷意義。且特異性和敏感性較高。大約90%的MG患者陽性;伴有眼肌癥狀的患者,抗體效價(jià)低于普通癥狀患者;同時(shí)還用來檢測(cè)對(duì)該病免疫抑制療效的效果。肌萎縮側(cè)索硬化癥患者用蛇毒治療后可出現(xiàn)假陽性27抗乙酰膽堿抗體(AchR)27抗平滑肌抗體(ASMA)檢出陽性率較高的疾病有慢性活動(dòng)性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化(PAB),而在肝外性膽汁阻塞、藥物誘發(fā)性肝病、急性病毒性肝炎及肝細(xì)胞癌等時(shí),ASMA的檢出率極低其他:抗心肌抗體、抗胃壁細(xì)胞抗體、抗胰島素抗體、抗腎小球基底膜抗體、抗精子抗體、抗血細(xì)胞抗體等28抗平滑肌抗體(ASMA)28血清C-反應(yīng)蛋白的測(cè)定
C-反應(yīng)蛋白(CRP)是一種由肝臟產(chǎn)生的急性時(shí)相蛋白。CRP能激活補(bǔ)體,促進(jìn)吞噬并有其他的免疫調(diào)節(jié)功能。因能與肺炎鏈球菌菌體的C多糖起沉淀反應(yīng)而得名。CRP的檢測(cè)對(duì)炎癥,組織壞死,惡性腫瘤等診斷及療效的觀察有重要意義。常用方法有:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法、免疫比濁法、膠乳凝集法等。注意其含量與年齡相關(guān)29血清C-反應(yīng)蛋白的測(cè)定C-反應(yīng)蛋白(CRP)295、腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)(1)概念是由腫瘤細(xì)胞本身合成釋放或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì).分類蛋白類糖類酶類
305、腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)(1)概念30蛋白類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)
甲種胎兒球蛋白(AFP)
概念:參考值:RIA或ELISA法低于25μg/L;定性試驗(yàn)陰性臨床意義
(主要用于診斷干細(xì)胞癌及滋養(yǎng)細(xì)胞惡性腫瘤)
原發(fā)性肝細(xì)胞性肝癌生殖腺胚胎癌病毒性肝炎孕婦31蛋白類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)甲種胎兒球蛋白(AFP)31癌胚抗原測(cè)定(CEA)概念:參考值:RIA或ELISA法低于15μg/L;定性試驗(yàn)陰性臨床意義
(主要用于對(duì)消化道腫瘤的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
■CEA明顯升高:胰腺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌
■CEA濃度下降,病情好轉(zhuǎn);濃度升高病情加重
■CEA輕度升高:結(jié)腸炎、胰腺炎、肺氣腫等
■其他體液CEA檢測(cè):胃液和唾液中CEA的檢測(cè)有助于對(duì)胃癌診斷32癌胚抗原測(cè)定(CEA)32組織多肽抗原(TPA)概念:存在于胎盤和腫瘤組織中的單鏈多肽參考值:ELISA法低于130U/L;
臨床意義
(主要用于惡性腫瘤的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
TPA明顯升高:急性肝炎胰腺炎肺炎、妊娠3個(gè)月濃度下降,病情好轉(zhuǎn);濃度升高病情加重
33組織多肽抗原(TPA)概念:存在于胎盤和腫瘤組織中的單鏈多肽前列腺特異抗原測(cè)定(PSA)概念:參考值:
臨床意義
(主要用于前列腺癌的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
34前列腺特異抗原測(cè)定(PSA)概念:34鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原(SCC)概念:參考值:臨床意義
(主要用于宮頸癌肺鱗狀上皮細(xì)胞癌食官癌等的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
35鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原(SCC)概念:35糖脂類腫瘤標(biāo)志物癌抗原-50測(cè)定概念:參考值:臨床意義
(主要用于胰腺癌膽囊癌原發(fā)性肝癌的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
36糖脂類腫瘤標(biāo)志物癌抗原-50測(cè)定36癌抗原72-4測(cè)定
概念:
參考值:
臨床意義
(主要用于卵巢癌大腸癌胃癌的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
37癌抗原72-4測(cè)定
概念:
參考值:
臨床意義
(主要用于糖鏈抗原19-9測(cè)定
概念:參考值:臨床意義
(主要用于胰腺癌肝膽和胃腸道疾病的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
38糖鏈抗原19-9測(cè)定
概念:38癌抗原125測(cè)定
概念:
參考值:
臨床意義
(主要用于卵巢腫瘤的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
39癌抗原125測(cè)定
概念:
參考值:
臨床意義
(主要用于卵癌抗原242測(cè)定
概念:
參考值:
臨床意義
(主要用于胰腺癌結(jié)腸癌的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
40癌抗原242測(cè)定
概念:
參考值:
臨床意義
(主要用于胰癌抗原15-3測(cè)定
概念:
參考值:
臨床意義
(主要用于乳腺癌的診斷/預(yù)后/復(fù)發(fā)的判斷)
41癌抗原15-3測(cè)定
概念:
參考值:
臨床意義
(主要用于酶類腫瘤標(biāo)志物前列腺酸性磷酸酶(PAP)神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)異常凝集酶原(APT)a-L-巖藻糖苷酶(AFU)42酶類腫瘤標(biāo)志物前列腺酸性磷酸酶(PAP)42臨床常用免疫學(xué)檢查蘭州大學(xué)第一醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷教研室李燕平43臨床常用免疫學(xué)檢查蘭州大學(xué)第一醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷教研室1基本概念(1)
免疫(Immune)是機(jī)體識(shí)別“自身”與“非己”抗原,對(duì)自身抗原形成天然免疫耐受,對(duì)“非己”抗原產(chǎn)生排斥作用的一種生理功能。正常情況下,這種生理功能對(duì)機(jī)體有益,可產(chǎn)生抗感染、抗腫瘤等維持機(jī)體生理平衡和穩(wěn)定的免疫保護(hù)作用。在一定條件下,當(dāng)免疫功能失調(diào)時(shí),也會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生有害的反應(yīng)和結(jié)果,如引發(fā)超敏反應(yīng)、自身免疫病和腫瘤.
44基本概念(1)免疫(Immune)2免疫功能
▲
是免疫系統(tǒng)在識(shí)別和清除“非己”抗原的過程中所產(chǎn)生的各種生物學(xué)作用的總稱。
▲主要包括免疫防御免疫自穩(wěn)免疫監(jiān)視45免疫功能免疫防御免疫自穩(wěn)免疫監(jiān)視3免疫防御(Immunologicaldefence)
---是機(jī)體排斥微生物的侵襲及其他外源性抗原異物的一種免疫保護(hù)功能
■正常時(shí)可產(chǎn)生抗感染免疫的作用,防御功能過強(qiáng)會(huì)產(chǎn)生超敏反應(yīng),
■過弱則產(chǎn)生免疫缺陷(后兩種情況均屬異常反應(yīng))46免疫防御(Immunologicaldefence)4免疫自穩(wěn)(Homeostasis)
---是機(jī)體免疫系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定的一種生理功能■正常時(shí):機(jī)體可及時(shí)清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的血細(xì)胞和抗原-抗體復(fù)合物,而對(duì)自身成份保持免疫耐受
■異常時(shí):發(fā)生生理功能紊亂、自身免疫病等47免疫自穩(wěn)(Homeostasis)5免疫監(jiān)視
(Immunesurveillance)
---是機(jī)體免疫系統(tǒng)及時(shí)識(shí)別、清除體內(nèi)突變、畸變和病毒干擾細(xì)胞的一種生理保護(hù)作用。機(jī)體借以防止、監(jiān)視和抑制惡性腫瘤在體內(nèi)生長(zhǎng)。
■喪失:機(jī)體突變細(xì)胞失控,
有可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生;
或出現(xiàn)病毒的持續(xù)感染。48免疫監(jiān)視(Immunesurveillance)6
免疫學(xué)檢查內(nèi)容
1.血清免疫球蛋白檢測(cè)2.血清補(bǔ)體檢測(cè)3.細(xì)胞免疫檢測(cè)4.腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)5.自身抗體檢測(cè)6.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)7.器官與骨髓移植的檢測(cè)49
免疫學(xué)檢查內(nèi)容
1.血清免疫球蛋白檢測(cè)7一、血清免疫球蛋白測(cè)定(1)免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)
是一組具有抗體活性和(或)抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。Ig由漿細(xì)胞產(chǎn)生,存在于血液和體液(包括組織液和外分泌液)中,也可作為抗原受體表達(dá)于B細(xì)胞表面,稱為膜表面免疫球蛋白。多數(shù)Ig具有抗體活性,可以特異性的識(shí)別和結(jié)合抗原,并引發(fā)一系列生物學(xué)效應(yīng)。所有的抗體均是免疫球蛋白,但并非所有的免疫球蛋白都是抗體。50一、血清免疫球蛋白測(cè)定(1)免疫球蛋白(immunoglo一、血清免疫球蛋白測(cè)定(2)免疫球蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu):
Ig分子由四條肽鏈借二硫鍵連接組成,即兩條相同的重鏈和相同的輕鏈。免疫球蛋白的血清型:
根據(jù)Ig重鏈恒定區(qū)肽鏈抗原特異性的不同,可將分為五類,在人體的含量由多到少依次為:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。51一、血清免疫球蛋白測(cè)定(2)免疫球蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu):9免疫球蛋白的生物學(xué)活性:
■與抗原結(jié)合作用■補(bǔ)體活化作用■親細(xì)胞作用■調(diào)理作用■膜傳遞作用52免疫球蛋白的生物學(xué)活性:10免疫球蛋白G測(cè)定
IgG占血清Ig的70%~80%,大部分抗細(xì)菌、抗病毒、抗毒素抗體都屬于IgG型,具有調(diào)理作用、中和毒素、中和病毒介導(dǎo)ADCC、激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑,也是唯一能通過胎盤的Ig。IgG合成速度快,分解慢,半衰期長(zhǎng),在血中含量最高。
【參考值】:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法7.6-16.6g/L。
IgG53免疫球蛋白G測(cè)定IgG占血清Ig的70%【臨床意義】
■
IgG增高:
多克隆性增高:即IgG、IgA、IgM均增高,常見于各種慢性感染、以及自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。單克隆性增高僅有某一種Ig增高而其他種不增高,主要見于免疫增殖性疾病如MM。
■
IgG降低
見于各種先天性和獲得性體液免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病,也見于病毒感染和應(yīng)用免疫抑制劑患者。IgG54【臨床意義】IgG12
IgA可分為血清型和分泌型■
大部分血清IgA為單體,少量為雙聚體或多聚體。占血清中免疫球蛋白10~15%。■分泌型在分泌液中是最主要的Ig,在外分泌系統(tǒng)中表現(xiàn)其重要的免疫功能,呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴樣組織可合成大量的分泌型IgA(即sIgA),sIgA性能穩(wěn)定,在局部濃度大,能抑制病原體和有害抗原黏附在黏膜上,阻擋其進(jìn)入體內(nèi);同時(shí)也因其具有條理吞噬和溶解作用,構(gòu)成了黏膜第一防御機(jī)制;與這些部位炎癥、感染、腫瘤等密切相關(guān)。
■母乳中的sIgA提高了嬰兒出生后4-6個(gè)月內(nèi)的局部免疫屏障,常為局部抗體?!?/p>
參考值和臨床意義:為了解內(nèi)容IgA免疫球蛋白A測(cè)定55IgA可分為血清型和分泌型IgA免疫球蛋白A測(cè)定13
IgM:
是分子量最大的Ig,為五聚體,半衰期短、出現(xiàn)早、消失快、組織穿透力弱。占血清總Ig的5-10%。
■血型中天然凝集素和冷凝集素的抗體類型是IgM,不能通過胎盤,新生兒臍血中若IgM增高,提示有宮內(nèi)感染。在感染或疫苗接種以后,最先出現(xiàn)的抗體是IgM,是有效的凝集和溶解細(xì)胞的因子。
免疫球蛋白M測(cè)定IgM56IgM:免疫球蛋白M測(cè)定IgM14
IgD:
血清含量極少,其功能尚不完全清楚,已發(fā)現(xiàn)有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和鏈球菌溶血素“O”抗體等均屬IgD,但活性甚低免疫球蛋白D測(cè)定IgD57IgD:免疫球蛋白D測(cè)定IgD15
IgE:
介導(dǎo)?型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生,為重要的變態(tài)反應(yīng)指標(biāo),與寄生蟲感染及過敏有關(guān)免疫球蛋白E測(cè)定IgEIg的檢測(cè)---常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等58IgE:免疫球蛋白E測(cè)定IgEIg的檢測(cè)---常用免疫
IgE:
介導(dǎo)?型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生,為重要的變態(tài)反應(yīng)指標(biāo),與寄生蟲感染及過敏有關(guān)免疫球蛋白E測(cè)定IgEIg的檢測(cè):
常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等Ig的檢測(cè)---常用免疫擴(kuò)散法,ELISA法,免疫比濁法等59IgE:免疫球蛋白E測(cè)定IgEIg的檢測(cè):17二、血清補(bǔ)體的測(cè)定
補(bǔ)體系統(tǒng):補(bǔ)體加上其調(diào)節(jié)因子和相關(guān)膜蛋白共同組成一個(gè)反應(yīng)系統(tǒng),稱為補(bǔ)體系統(tǒng)。補(bǔ)體系統(tǒng)參與機(jī)體的抗感染及免疫調(diào)節(jié),也可介導(dǎo)病理反應(yīng)(如參與破壞自身組織和細(xì)胞而導(dǎo)致自身免疫病的發(fā)生)補(bǔ)體系統(tǒng)是體內(nèi)主要的免疫系統(tǒng)和放大系統(tǒng)。
補(bǔ)體(complement,C):
存在于人和脊椎動(dòng)物正常新鮮血液及組織液中的一組具有酶樣活性的球蛋白。60二、血清補(bǔ)體的測(cè)定補(bǔ)體系統(tǒng):補(bǔ)體(complement組成
由傳統(tǒng)途徑的9種成分C1~C9,旁路途徑的三種成分及其衍生物B、D、P、H、I等因子組成常作項(xiàng)目總補(bǔ)體溶血活性檢測(cè)、補(bǔ)體旁路途徑溶血活性檢測(cè)、補(bǔ)體C1q檢測(cè)、C3檢測(cè)、C4檢測(cè)等方法單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法等二、血清補(bǔ)體的測(cè)定61組成二、血清補(bǔ)體的測(cè)定19三、自身抗體的檢查自身免疫:
當(dāng)某種原因使自身免疫耐受削弱或破壞,免疫系統(tǒng)會(huì)對(duì)自身成分產(chǎn)生免疫應(yīng)答,這種現(xiàn)象稱為自身免疫自身免疫性病的概念及特征
健康個(gè)體的免疫調(diào)節(jié)功能會(huì)將自身耐受和自身免疫協(xié)調(diào)在一個(gè)相符相承的合理水平。當(dāng)某種原因使自身免疫應(yīng)答過分強(qiáng)烈時(shí),也會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的自身組織、器官損傷或攻能障礙,這種病理狀態(tài)稱為自身免疫?。ˋID)
特征:
■患者血清中可檢出高滴度的自身抗體
■患者組織器官的病理特征為免疫炎癥
■動(dòng)物中可復(fù)制出相應(yīng)的動(dòng)物模型62三、自身抗體的檢查自身免疫:20類風(fēng)濕因子(RF)測(cè)定RF:是抗變性IgG的自身抗體,主要為IgM,也可有見IgG、IgA、IgD、IgE型,可與人或動(dòng)物的變性IgG結(jié)合,而不與正常IgG發(fā)生凝集,最多見于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)患者。RF在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)患者中的檢出率70%,RF陽性支持早期RA的傾向性診斷,如對(duì)于年輕女性應(yīng)進(jìn)行RA和風(fēng)濕熱的鑒別;而對(duì)非活動(dòng)期RA的診斷,需參考病史。RF并不是RA的特異性抗體,在SLE患者約有50%RF陽性,在其他結(jié)締組織病如SS、硬皮病、慢性活動(dòng)性肝炎及老年人中均可有不同程度的陽性率。
■檢測(cè)方法:乳膠凝集法(定性)免疫比濁法(可準(zhǔn)確測(cè)其含量)。63類風(fēng)濕因子(RF)測(cè)定RF:21抗核抗體檢測(cè)(1)ANA:
泛指核成分的抗體,是一種廣泛存在的自身抗體。性質(zhì)主要是IgG,也有IgM、IgA、IgD、IgE,可與不同來源的細(xì)胞核起反應(yīng),無器官特異性和種屬特異性。ANA主要存在與血清中
■抗核抗體(ANA)類型及意義
■
類型:抗核蛋白抗體(DNP),即脫氧核糖蛋白、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等64抗核抗體檢測(cè)(1)ANA:22抗雙鏈DNA(ds-DNA抗核抗體檢測(cè))抗體:抗ds-DNA的靶抗原是細(xì)胞核中DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu),是SLE的標(biāo)志性抗體.抗核抗體檢測(cè)(2)65抗雙鏈DNA(ds-DNA抗核抗體檢測(cè))抗體:抗核抗體抗RNP抗體:即核糖核蛋白,高效價(jià)的抗RNP抗體對(duì)混合性結(jié)締組織病有診斷意義,低效價(jià)的抗RNP抗體可在SLE患者中發(fā)現(xiàn)抗Sm抗體:是SLE的特征性標(biāo)志之一,若抗ds-DNA和抗Sm抗體同時(shí)檢測(cè),可提高SLE的診斷率抗SS-A抗體:為干燥綜合正(SS)的A抗原,抗SS-A抗體主要見于SS,但也見于其他自身免疫病如SLE中抗SS-B抗體:為干燥綜合正(SS)的B抗原,13%的SLE及30%的SS患者有抗SS-B抗體抗ENA抗體:
可提取性核抗原(ENA),多從動(dòng)物胸腺中提取66抗ENA抗體:24組織和細(xì)胞抗體檢測(cè)(1)
抗線粒體抗體(AMA)
是一種針對(duì)肝細(xì)胞質(zhì)中線粒體內(nèi)膜脂蛋白成分的自身抗體,無器官和組織特異性抗體,該抗體主要是IgG.常用大白鼠胃或腎皮質(zhì)作抗原進(jìn)行免疫熒光法測(cè)定【臨床意義】
原發(fā)性膽汁性肝硬化(PAB)可有70%~94%為陽性反應(yīng)或效價(jià)>=1:160;長(zhǎng)期持續(xù)性肝阻塞、慢性活動(dòng)性肝炎、原因不明肝硬化等也呈陽性反應(yīng)67組織和細(xì)胞抗體檢測(cè)(1)抗線粒體抗體(AMA)25抗甲狀腺球蛋白抗體及微粒體抗體:這種抗體可以針對(duì)甲狀腺的多種成分,以甲狀腺球蛋白抗體和微粒體為代表。抗體主要是IgG,可以介導(dǎo)ADCC活性,引起慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎,又稱喬本甲狀腺炎68抗甲狀腺球蛋白抗體及微粒體抗體:26
抗乙酰膽堿抗體(AchR)抗AchR抗體的檢測(cè)對(duì)重癥肌無力(MG)具有診斷意義。且特異性和敏感性較高。大約90%的MG患者陽性;伴有眼肌癥狀的患者,抗體效價(jià)低于普通癥狀患者;同時(shí)還用來檢測(cè)對(duì)該病免疫抑制療效的效果。肌萎縮側(cè)索硬化癥患者用蛇毒治療后可出現(xiàn)假陽性69抗乙酰膽堿抗體(AchR)27抗平滑肌抗體(ASMA)檢出陽性率較高的疾病有慢性活動(dòng)性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化(PAB),而在肝外性膽汁阻塞、藥物誘發(fā)性肝病、急性病毒性肝炎及肝細(xì)胞癌等時(shí),ASMA的檢出率極低其他:抗心肌抗體、抗胃壁細(xì)胞抗體、抗胰島素抗體、抗腎小球基底膜抗體、抗精子抗體、抗血細(xì)胞抗體等70抗平滑肌抗體(ASMA)28血清C-反應(yīng)蛋白的測(cè)定
C-反應(yīng)蛋白(CRP)是一種由肝臟產(chǎn)生的急性時(shí)相蛋白。CRP能激活補(bǔ)體,促進(jìn)吞噬并有其他的免疫調(diào)節(jié)功能。因能與肺炎鏈球菌菌體的C多糖起沉淀反應(yīng)而得名。CRP的檢測(cè)對(duì)炎癥,組織壞死,惡性腫瘤等診斷及療效的觀察有重要意義。常用方法有:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法、免疫比濁法、膠乳凝集法等。注意其含量與年齡相關(guān)71血清C-反應(yīng)蛋白的測(cè)定C-反應(yīng)蛋白(CRP)295、腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)(1)概念是由腫瘤細(xì)胞本身合成釋放或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì).分類蛋白類糖類酶類
725、腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)(1)概念30蛋白類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)
甲種胎兒球蛋白(AFP)
概念:參考值:RIA或ELISA法低于25μg/L;
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