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ChemiluminescenceAssay光激化學(xué)發(fā)光(LiCA)LightInitiatedChemiluminesce1光激化學(xué)發(fā)光(LiCA)介紹以高分子微粒為基礎(chǔ)兩種微粒近距離離子氧能量傳遞主要特點:高靈敏度低本底穩(wěn)定均相免洗廣泛應(yīng)用于生物分子間的相互作用光激化學(xué)發(fā)光(LiCA)介紹以高分子微粒為基礎(chǔ)2微粒的組成感光微粒內(nèi)含感光化合物發(fā)光微粒內(nèi)含發(fā)光化合物和鑭系元素微粒直徑188nm,表面覆蓋水凝膠共價連接增大的表面積成百上千個生物分子,捕獲目標(biāo)分子微粒的組成感光微粒內(nèi)含感光化合物3LiCA發(fā)光原理核心原理是能量的近距離轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移的介質(zhì)是高能態(tài)離子氧紅色激光680nm照射,感光微粒釋放離子氧(4微秒),傳播直徑200nm,發(fā)光微粒(520~618nm),高能級的光反應(yīng)的基礎(chǔ)有賴于兩種微粒的相互接近反應(yīng)體系中,微粒的濃度很低,碰撞機(jī)率很低,本底信號微弱LiCA發(fā)光原理核心原理是能量的近距離轉(zhuǎn)移4原理(1)發(fā)射光520-620nm發(fā)光微球1O2AB激發(fā)光680nm感光微球200nm原理(1)發(fā)射光發(fā)光微球1O2AB激發(fā)光感光微球200nm5原理(2)激發(fā)光680nm感光微球A發(fā)光微球CO2-原理(2)激發(fā)光感光微球A發(fā)光微球CO2-6LiCA的技術(shù)特點(一)高靈敏度信號產(chǎn)生逐級放大的結(jié)果每個感光微粒釋放出近6萬個離子氧離子氧作用于二甲基噻吩,產(chǎn)生大量紫外光紫外光激發(fā)鑭系元素實際檢測能力為10-15摩爾理論檢測能力為10-18摩爾LiCA的技術(shù)特點(一)高靈敏度7LiCA的技術(shù)特點(二)低本底時間分辨模式采集光信號(延遲150ms),天然熒光的壽命小于100ns采用680nm紅光激發(fā),生物樣品中的熒光物質(zhì)不敏感發(fā)射光的波長比激發(fā)光的波長短,能量更高,有別于熒光,有效避免熒光物質(zhì)干擾LiCA的技術(shù)特點(二)低本底8穩(wěn)定均相環(huán)境使反應(yīng)更充分免洗操作杜絕隨機(jī)誤差和交叉污染感光和發(fā)光的有機(jī)分子受到微粒的保護(hù),環(huán)境穩(wěn)定和安全溶液中的氧濃度是一個常數(shù)不易受到pH值、離子強(qiáng)度和溫度的影響LiCA的技術(shù)特點(三)穩(wěn)定LiCA的技術(shù)特點(三)9臨床免疫的各項檢測生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究新藥的篩選標(biāo)記簡便檢測過程簡單廣泛應(yīng)用臨床免疫的各項檢測廣泛應(yīng)用10基本包被模式GG-Streptavidin(SA)FG-Antibody(Ab)基本包被模式GG-Streptavidin(SA)FG-11基本反應(yīng)模式biotin-antigenprimaryAbsecondaryAb(orproteinA,G,LA)基本反應(yīng)模式biotin-antigenprimaryAb12應(yīng)用類型配體-受體激酶蛋白-蛋白免疫蛋白酶蛋白-DNA應(yīng)用類型配體-受體13配體-受體(1)TNFa-sTNFR1Biotinanti-TNFR1IgGFG-TNFaProteinA-sTNFR1配體-受體(1)TNFa-sTNFR1Biotinanti-14配體-受體(1)TNFa-sTNFR1GG-SABiotinanti-TNFR1IgGFG-TNFaProteinA-sTNFR1配體-受體(1)TNFa-sTNFR1GG-SABiotin15配體-受體(1)TNFa-sTNFR1GG-SABiotinanti-TNFR1IgGFG-TNFaProteinA-sTNFR1配體-受體(1)TNFa-sTNFR1GG-SABiotin16配體-受體(2)環(huán)磷酸腺苷
cAMPBiotinFG-cAMPanti-cAMP-配體-受體(2)環(huán)磷酸腺苷cAMPBiotinFG-cA17配體-受體(2)環(huán)磷酸腺苷
cAMPGG-SABiotinFG-cAMPanti-cAMP-配體-受體(2)環(huán)磷酸腺苷cAMPGG-SABiotinF18激酶AktBiotinanti-Gsk3IgGFG-Gsk3ProteinA-激酶AktBiotinanti-Gsk3IgGFG-Gs19激酶AktBiotinanti-Gsk3IgGFG-Gsk3ProteinA-激酶AktBiotinanti-Gsk3IgGFG-Gs20激酶AktGG-SABiotinanti-Gsk3IgGFG-Gsk3ProteinA-Akt磷酸化激酶AktGG-SABiotinanti-Gsk3IgGF21激酶AktGG-SABiotinanti-Gsk3IgGFG-Gsk3ProteinA-Akt激酶AktGG-SABiotinanti-Gsk3IgGF22蛋白-蛋白BiotinFG-p53Anti-GST-p53/HDM2HDM2-GST蛋白-蛋白BiotinFG-p53Anti-GST-p5323蛋白-蛋白GG-SABiotinFG-p53Anti-GST-p53/HDM2HDM2-GST蛋白-蛋白GG-SABiotinFG-p53Anti-GS24免疫(1)腫瘤壞死因子TNFaBiotinFG-anti-TNFaanti-TNFa-TNFa免疫(1)腫瘤壞死因子TNFaBiotinFG-anti25免疫(1)腫瘤壞死因子TNFaGG-SABiotinFG-anti-TNFaanti-TNFa-TNFa免疫(1)腫瘤壞死因子TNFaGG-SABiotinFG-26免疫(2)Biotinanti-TNFaFG-anti-TNFaProteinA-TNFa腫瘤壞死因子TNFaGG-SA免疫(2)Biotinanti-TNFaFG-anti-T27免疫(2)GG-SABiotinanti-TNFaFG-anti-TNFaProteinA-TNFa腫瘤壞死因子TNFa免疫(2)GG-SABiotinanti-TNFaFG-a28蛋白酶(1)GG-SABiotinFG-substrateanti-digoxigenin-組織蛋白酶CathepsinD-digoxigeninCathepsinD
水解蛋白酶(1)GG-SABiotinFG-substrat29蛋白酶(2)ACEBiotinFG-angiotensinIanti-angiotensinII-ACE切割蛋白酶(2)ACEBiotinFG-angiotensin30蛋白酶(2)ACEGG-SABiotinFG-angiotensinIIanti-angiotensinII-蛋白酶(2)ACEGG-SABiotinFG-angiot31蛋白-DNAERa-DNABiotinFG-ERaanti-digoxigenin--digoxigeninDNA蛋白-DNAERa-DNABiotinFG-ERaanti32蛋白-DNAERa-EREGG-SABiotinFG-ERaanti-digoxigenin--digoxigeninDNA蛋白-DNAERa-EREGG-SABiotinFG-ER33當(dāng)前成功應(yīng)用實例當(dāng)前成功應(yīng)用實例34HBsAgGG-SABiotin-Anti-HBsAnti-HBs-FGHBsAgHBsAgGG-SABiotin-Anti-HBsAnti35Anti-HBsGG-SABiotin-HBsAgFGHBsAg-Anti-HBsAnti-HBsGG-SABiotin-HBsAgFGHB36HBeAgGG-SABiotinFG-Anti-HBeAnti-HBe-HBeAgHBeAgGG-SABiotinFG-Anti-HBeAn37Anti-HBeGG-SABiotinFG-Anti-HBeAnti-HBe-中和HBeAgSampleAnti-HBeAnti-HBeGG-SABiotinFG-Anti-HB38Anti-HBcGG-SABiotinFG-HBcAgAnti-HBc-Anti-HBcAnti-HBcGG-SABiotinFG-HBcAgAn39檢測平臺檢測平臺40LiCASP雙加樣臂氣置換式微量進(jìn)樣泵液面自動檢測功能標(biāo)本、試劑裝載100個標(biāo)本10個試劑位LiCASP雙加樣臂41LiCAHT一次裝載300個測試自動高速進(jìn)樣:0.5秒/孔自動溫育、震蕩和讀數(shù)300個測試僅需50分鐘LiCAHT一次裝載300個測試42謝謝!謝謝!43此課件下載可自行編輯修改,此課件供參考!部分內(nèi)容來源于網(wǎng)絡(luò),如有侵權(quán)請與我聯(lián)系刪除!此課件下載可自行編輯修改,此課件供參考!44Light
Initiated
ChemiluminescenceAssay光激化學(xué)發(fā)光(LiCA)LightInitiatedChemiluminesce45光激化學(xué)發(fā)光(LiCA)介紹以高分子微粒為基礎(chǔ)兩種微粒近距離離子氧能量傳遞主要特點:高靈敏度低本底穩(wěn)定均相免洗廣泛應(yīng)用于生物分子間的相互作用光激化學(xué)發(fā)光(LiCA)介紹以高分子微粒為基礎(chǔ)46微粒的組成感光微粒內(nèi)含感光化合物發(fā)光微粒內(nèi)含發(fā)光化合物和鑭系元素微粒直徑188nm,表面覆蓋水凝膠共價連接增大的表面積成百上千個生物分子,捕獲目標(biāo)分子微粒的組成感光微粒內(nèi)含感光化合物47LiCA發(fā)光原理核心原理是能量的近距離轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移的介質(zhì)是高能態(tài)離子氧紅色激光680nm照射,感光微粒釋放離子氧(4微秒),傳播直徑200nm,發(fā)光微粒(520~618nm),高能級的光反應(yīng)的基礎(chǔ)有賴于兩種微粒的相互接近反應(yīng)體系中,微粒的濃度很低,碰撞機(jī)率很低,本底信號微弱LiCA發(fā)光原理核心原理是能量的近距離轉(zhuǎn)移48原理(1)發(fā)射光520-620nm發(fā)光微球1O2AB激發(fā)光680nm感光微球200nm原理(1)發(fā)射光發(fā)光微球1O2AB激發(fā)光感光微球200nm49原理(2)激發(fā)光680nm感光微球A發(fā)光微球CO2-原理(2)激發(fā)光感光微球A發(fā)光微球CO2-50LiCA的技術(shù)特點(一)高靈敏度信號產(chǎn)生逐級放大的結(jié)果每個感光微粒釋放出近6萬個離子氧離子氧作用于二甲基噻吩,產(chǎn)生大量紫外光紫外光激發(fā)鑭系元素實際檢測能力為10-15摩爾理論檢測能力為10-18摩爾LiCA的技術(shù)特點(一)高靈敏度51LiCA的技術(shù)特點(二)低本底時間分辨模式采集光信號(延遲150ms),天然熒光的壽命小于100ns采用680nm紅光激發(fā),生物樣品中的熒光物質(zhì)不敏感發(fā)射光的波長比激發(fā)光的波長短,能量更高,有別于熒光,有效避免熒光物質(zhì)干擾LiCA的技術(shù)特點(二)低本底52穩(wěn)定均相環(huán)境使反應(yīng)更充分免洗操作杜絕隨機(jī)誤差和交叉污染感光和發(fā)光的有機(jī)分子受到微粒的保護(hù),環(huán)境穩(wěn)定和安全溶液中的氧濃度是一個常數(shù)不易受到pH值、離子強(qiáng)度和溫度的影響LiCA的技術(shù)特點(三)穩(wěn)定LiCA的技術(shù)特點(三)53臨床免疫的各項檢測生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究新藥的篩選標(biāo)記簡便檢測過程簡單廣泛應(yīng)用臨床免疫的各項檢測廣泛應(yīng)用54基本包被模式GG-Streptavidin(SA)FG-Antibody(Ab)基本包被模式GG-Streptavidin(SA)FG-55基本反應(yīng)模式biotin-antigenprimaryAbsecondaryAb(orproteinA,G,LA)基本反應(yīng)模式biotin-antigenprimaryAb56應(yīng)用類型配體-受體激酶蛋白-蛋白免疫蛋白酶蛋白-DNA應(yīng)用類型配體-受體57配體-受體(1)TNFa-sTNFR1Biotinanti-TNFR1IgGFG-TNFaProteinA-sTNFR1配體-受體(1)TNFa-sTNFR1Biotinanti-58配體-受體(1)TNFa-sTNFR1GG-SABiotinanti-TNFR1IgGFG-TNFaProteinA-sTNFR1配體-受體(1)TNFa-sTNFR1GG-SABiotin59配體-受體(1)TNFa-sTNFR1GG-SABiotinanti-TNFR1IgGFG-TNFaProteinA-sTNFR1配體-受體(1)TNFa-sTNFR1GG-SABiotin60配體-受體(2)環(huán)磷酸腺苷
cAMPBiotinFG-cAMPanti-cAMP-配體-受體(2)環(huán)磷酸腺苷cAMPBiotinFG-cA61配體-受體(2)環(huán)磷酸腺苷
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水解蛋白酶(1)GG-SABiotinFG-substrat73蛋白酶(2)ACEBiotinFG-angiotensinIanti-angiotensinII-ACE切割蛋白酶(2)ACEBiotinFG-angiotensin74蛋白酶(2)ACEGG-SABiotinFG-angiotensinIIanti-angiotensinII-蛋白酶(2)ACEGG-SABiotinFG-angiot75蛋白-DNAERa-DNABiotinFG-ERaanti-digoxigenin--digoxigeninDNA蛋白-DNAERa-DNABiotinFG-ERaanti76蛋白-DNAE
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