顯微鏡及微生物染色簡介課件

廢水光學(xué)生物顯微鏡及微生物染色介紹Part1Part2Part3INDEX光學(xué)生物顯微鏡介紹Part4微生物染色Part5光學(xué)生物顯微鏡日常維護(hù)保養(yǎng)光學(xué)生物顯微鏡基本操作Part1光學(xué)生物顯微鏡結(jié)構(gòu)介紹1目鏡2鏡筒3鏡臂4物鏡粗動調(diào)焦器56微動調(diào)焦器物鏡轉(zhuǎn)換器8活動載物臺9可變孔徑光欄和聚光鏡10亮度調(diào)節(jié)鈕LED燈源11XSP-2CA光學(xué)生物顯微鏡結(jié)構(gòu)12電源開關(guān)13鏡座反光鏡147XSP-2CA光學(xué)生物顯微鏡主要參數(shù)光學(xué)系統(tǒng)有限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)觀察方法目鏡筒雙目鏡筒光學(xué)方式透射光照明目鏡參數(shù)倍率10x（標(biāo)）16X（標(biāo)）視場范圍（mm）1811物鏡參數(shù)倍率4x10x40x100x(油)數(shù)值孔徑NA0.100.250.651.25工作距離（mm）37.57.310.630.18物鏡轉(zhuǎn)換四孔轉(zhuǎn)換器載物工作臺1.雙層移動平臺2.臺尺寸：125mm*120mm3.移動范圍：76mm*35mm調(diào)焦范圍15mm、20mm

微調(diào)格值：0.002mm照明裝置LED光源外型尺寸

重量

Part1.1光學(xué)生物顯微鏡介紹顯微鏡的總放大倍數(shù)為物鏡放大倍數(shù)和目鏡放大倍數(shù)的乘積Part1.3光學(xué)生物顯微鏡介紹目鏡與物鏡的比較16x10x透鏡大小鏡頭長度放大倍數(shù)長短大小透鏡放大倍數(shù)16x放大倍數(shù)鏡口率鏡筒長度蓋玻片厚度放大倍數(shù)鏡頭長度10x40x長短物體經(jīng)物鏡、目鏡放大后得到放大的倒立的虛像Part1.4光學(xué)生物顯微鏡介紹凸透鏡成像規(guī)律:u>2ff<u<2f成倒立縮小實像f<u<2fu>2f成倒立放大實像u<f正立放大虛像u=f不成像u=2f成倒立等大實像f表示透鏡焦距u表示物體與透鏡之間距離（簡稱物距）Part2污泥鏡檢樣品制作污泥鏡檢樣品制作步驟：

采樣采樣要有代表性，曝氣時間，每個曝氣池

沉降沉降大約5分鐘，去掉上清液，保留泥水部分

標(biāo)本片用膠頭滴管吸取泥水混合物，滴一滴到干凈的載玻片上，用蓋玻片蓋上，用濾紙吸掉多余水

載玻片0.17mm蓋玻片Part3光學(xué)生物顯微鏡基本操作取鏡安放開機(jī)預(yù)熱調(diào)整工作條件放置玻片標(biāo)本低倍鏡觀察高倍鏡觀察收鏡、整理記錄光學(xué)顯微鏡的使用程序Part3.2光學(xué)生物顯微鏡基本操作二、開機(jī)預(yù)熱

檢查顯微鏡是否有毛病，是否清潔，亮度調(diào)節(jié)鈕開到最小，打電源預(yù)熱10分鐘。三、調(diào)整工作條件

工作條件包括：亮度調(diào)節(jié)、目鏡選擇、物鏡選擇、可變徑光欄調(diào)節(jié)、聚光鏡高度、活動載物臺高度下圖表明了物鏡選擇與光圈大小的關(guān)系：Part3.4光學(xué)生物顯微鏡基本操作六、高倍鏡觀察

從低倍鏡轉(zhuǎn)至高倍時，只需略微調(diào)動細(xì)調(diào)焦旋鈕，即可使物像清晰。操作注意：使用高倍鏡時切勿使用粗調(diào)焦旋鈕，否則易壓碎蓋玻片并損傷鏡頭。轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器時，不可用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡，這樣容易使物鏡的光軸發(fā)生偏斜，轉(zhuǎn)換器螺紋受力不均勻而破壞，最后導(dǎo)致轉(zhuǎn)換器就會報廢七、收鏡、整理記錄

1、觀察完畢，關(guān)掉電源，先提升鏡筒，取下玻片標(biāo)本2、用紗布將顯微鏡外表擦拭干凈3、轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，將物鏡遠(yuǎn)離載物臺4、取下目鏡，將目鏡放回原位置，蓋好鏡筒蓋5、將塑料口袋罩好顯微鏡放回原處6、收拾雜物，清洗玻璃儀器，整理記錄油鏡的觀察：先用低倍鏡及高倍鏡將被檢物體移至視野中央后，再換油鏡觀察。油鏡觀察前，應(yīng)將顯微鏡亮度調(diào)整至最亮，光圈完全打開。使用油鏡時，先在蓋玻片上滴加一滴香柏油（鏡油），然后降低鏡筒并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到油鏡浸入香柏油并貼近玻片標(biāo)本，然后用目鏡觀察，并用細(xì)調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本的焦段時停止并調(diào)節(jié)清晰。香柏油滴加要適量。油鏡使用完畢后一定要用擦鏡紙沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦鏡紙擦去多余二甲苯。機(jī)械系統(tǒng)的維護(hù)保養(yǎng)滑動部位：定期涂些中性潤滑脂油漆和塑料表面的清潔：頑固的污跡可以使用軟性的清潔劑來清洗，建議使用硅布。塑料部分：用軟布蘸水就可以清洗了。注意：不要使用有機(jī)溶劑（如酒精，乙醚，稀釋劑等）。因為會腐蝕機(jī)械和油漆，造成損壞。光學(xué)系統(tǒng)的維護(hù)保養(yǎng)透鏡的清潔使用后用干凈柔軟的綢布輕輕擦拭目鏡和物鏡鏡片。聚光鏡和反光鏡只要擦干凈就可以了。有較頑固的污跡，可用長纖維脫脂棉或干凈的細(xì)棉布蘸少些二甲笨或鏡頭清洗液（３份酒精∶１份乙醚）擦拭，然后用干凈細(xì)軟的綢布擦干或用吹風(fēng)球吹干。注意：清洗液千萬不能滲入到物鏡鏡片內(nèi)部，否則會損壞物鏡鏡片。純酒精和二甲苯容易燃燒，在將電源開關(guān)打開或關(guān)閉時要特別當(dāng)心不要引燃這些液體。Part4.1光學(xué)生物顯微鏡日常保養(yǎng)物鏡和目鏡的生霉生霧的處理辦法

準(zhǔn)備30%無水乙醇

+

70%乙醚，將不同鏡頭單獨分開放置干燥劑器皿中，最好用棉花棒，紗布，柔軟的刷子等比較柔軟的東西來擦拭油鏡當(dāng)時就要清洗。特別是100X的油鏡，處理不當(dāng)?shù)脑?，前片容易浸油或開膠。目鏡可以自己拆下來清洗，16X目鏡注意別裝反了，前片凹面在上。物鏡不要隨便拆下。注意：擦洗鏡頭時，不能過用力，以防止損傷鍍膜層。一般2個月最好能集中保養(yǎng)一次。顯微鏡多時，各個鏡頭要標(biāo)號以免弄錯了搭配。Part4.2光學(xué)生物顯微鏡日常保養(yǎng)特別提示：如果沒有十足把握，不要輕易拆卸顯微鏡，有問題找專業(yè)人員維修Part5微生物染色染色原理

由于微生物細(xì)胞含有大量水分，對光線的吸收和反射與水溶液的差別不大,機(jī)體是無色透明的，與周圍背景沒有明顯的反差,在普通光學(xué)顯微鏡下不易識別，必須對它們進(jìn)行染色，使經(jīng)染色后的菌體與背景形成明顯的色差，從而能更清楚地觀察到其形態(tài)和結(jié)構(gòu)。微生物細(xì)胞是由蛋白質(zhì)、核酸等兩性電解質(zhì)及其他化合物組成。所以，微生物細(xì)胞表現(xiàn)出兩性電解質(zhì)的性質(zhì)。兩性電解質(zhì)兼有堿性基和酸性基，在酸性溶液中離解出堿性基呈堿性帶正電。在堿性溶液中離解出酸性基呈酸性帶負(fù)電。經(jīng)測定，細(xì)菌等電點pH在2-5之間，故在中性、堿性或偏酸性溶液中，細(xì)菌的等電點均低于上述溶液的pH值，所以細(xì)菌帶負(fù)電荷，容易與帶正電荷的堿性染料結(jié)合，故用堿性染料染色的較多。微生物體內(nèi)各結(jié)構(gòu)與染料結(jié)合力不同，故可用各種染料分別染微生物的各結(jié)構(gòu)以便觀察。染色方法(一)簡單染色法

簡單染色法又叫作普通染色法，只用一種染料使細(xì)菌染上顏色，如果僅為了在顯微鏡下看清細(xì)菌的形態(tài)，用簡單染色即可。

(二)復(fù)染色法用兩種或多種染料染細(xì)菌，目的是為了鑒別不同性質(zhì)的細(xì)菌，所以又叫鑒別染色法。主要的復(fù)染色法有革蘭氏染色法和抗酸性染色法。革蘭氏染色法：不僅能觀察到細(xì)菌的形態(tài)，而且還可將所有細(xì)菌區(qū)分為兩大類：染色反應(yīng)呈藍(lán)紫色的稱為革蘭氏陽性細(xì)菌，用G+表示；染色反應(yīng)呈紅色（復(fù)染顏色）的稱為革蘭氏陰性細(xì)菌，用G-表示。細(xì)菌對革蘭氏染色的不同反應(yīng)，是由于它們細(xì)胞壁的成分和結(jié)構(gòu)不同而造成的。Part5.1微生物染色細(xì)菌的簡單染色步驟：涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→鏡檢

1．涂片

取干凈的載玻片于實驗臺上，活性污泥染色是用膠頭滴管取一滴活性污泥于載玻片上鋪成一薄層即可，涂布面不宜過大。

2．干燥

涂片最好在室溫下使其自然干燥，有時為了使之干得更快些，可將標(biāo)本面向上，手持載玻片一端的兩側(cè)，小心地在酒精燈上高處微微加熱，使水分蒸發(fā)，但切勿緊靠火焰或加熱時間過長，以防標(biāo)本烤枯而變形。

3．固定固定常常利用高溫，手持載玻片的