醫(yī)院感染監(jiān)測與操作課件

院內(nèi)感染監(jiān)測與操作

院內(nèi)感染監(jiān)測與操作醫(yī)院感染又稱醫(yī)院內(nèi)獲得性感染，指患者在入院時既不存在，又不處于潛伏期，而在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的感染，包括在醫(yī)院獲得而于出院后發(fā)病的感染。一、醫(yī)院感染的定義一、醫(yī)院感染的定義1、外源性感染又稱交叉感染，病原體來自患者體外，即來自其他住院患者、醫(yī)務人員、陪護家屬和醫(yī)院環(huán)境等。2、內(nèi)源性感染又稱自身感染，病原體來自患者自身貯菌庫（皮膚、鼻咽口腔、泌尿生殖道、腸道）的正常菌群或外來的定植菌。在醫(yī)院中當人體免疫功能下降、體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境失衡或發(fā)生細菌易位時即可發(fā)生感染。二、醫(yī)院感染的分類1、外源性感染又稱交叉感染，病原體來自患者體外，即來自其醫(yī)院感染可發(fā)生在與醫(yī)院相關的人群中，如門診和住院患者、醫(yī)務人員、陪護家屬、探視者等均可發(fā)生。三、醫(yī)院感染的對象三、醫(yī)院感染的對象1、手的微生物監(jiān)測采樣時間：在接觸患者或從事醫(yī)療活動前進行。采樣方法：被檢人五指并攏，將浸有無菌生理鹽水的棉拭子一支在雙手曲面從指根到指端來回涂擦各兩遍（一只手涂擦面積約30

c㎡），并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有5ml采樣液的試管內(nèi)送檢。采樣面積按平方厘米(c㎡)計算。四、醫(yī)院感染監(jiān)控中常用的檢測方法1、手的微生物監(jiān)測四、醫(yī)院感染監(jiān)控中常用的檢測方法細菌菌落總數(shù)檢查：200ul采樣液接種普通養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)，放35℃溫箱內(nèi)24~48h計數(shù)菌落。手細菌菌落總數(shù)（cfu/c㎡）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)

30X2=0.42*平板上菌落數(shù)

（cfu：是菌落形成單位，將稀釋后的一定量的菌液通過涂布的方法，讓其內(nèi)的微生物單細胞分散在瓊脂平板上，待培養(yǎng)后，每一活細胞就形成一個菌落。）細菌菌落總數(shù)檢查：200ul采樣液接種普通養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)，放3采樣時間：消毒處理后4h內(nèi)采樣。采樣面積：被采表面<100c㎡

，取全部表面；被采表面≥100c㎡，取100c㎡。采樣方法：用5cm×5cm的標準滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣1～4個規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子裝入5ml采樣液的試管內(nèi)送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體的方法采樣。2、物體表面的微生物學監(jiān)測采樣時間：消毒處理后4h內(nèi)采樣。2、物體表面的微生物學監(jiān)測細菌菌落總數(shù)檢查：

200ul采樣液接種普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)，放35℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24~48h計數(shù)菌落。物體表面細菌菌落總數(shù)（cfu/c㎡

）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)采樣面積（c㎡）細菌菌落總數(shù)檢查：采樣時間：選擇消毒處理后與進行醫(yī)療活動之前期 間采樣。采樣方法：自然沉降法，國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院采用。采樣高度：與地面垂直高度0.8～1.5m。布點方法：室內(nèi)面積≤30㎡

，設一條對角線上取3點，即中心一點、兩端各距墻1m處取一點；室內(nèi)面積>30㎡

，設東、西、南、北、中5點，其中東、西、南、北點均距墻1m。采樣方法：用9cm直徑的普通營養(yǎng)瓊脂平板，在采樣點將平板蓋打開，把蓋子扣在平板的邊緣上，暴露5min/15min/30min后送檢培養(yǎng)，每個被監(jiān)測的房間菌落數(shù)以平均數(shù)計算。3、空氣消毒效果的監(jiān)測3、空氣消毒效果的監(jiān)測1、采樣時間Ⅰ類環(huán)境在潔凈系統(tǒng)自凈后與從事醫(yī)療活動前取樣；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境在消毒或規(guī)定的通風換氣后與從事醫(yī)療活動前取樣。2、檢測方法Ⅰ類環(huán)境可選擇平板暴露法和空氣采樣器法，參照GB50333《醫(yī)院潔凈手術部建筑技術規(guī)范》要求進行檢測。空氣采樣器法可選擇六級撞擊式空氣采樣器或其他經(jīng)驗證的空氣采樣器。檢測時將采樣器置于室中央0.8m-1.5m高度，按采樣器使用說明書進行操作。每次采樣時間不應超過30min。房間大于10㎡者，每增加10㎡增設一個采樣點。1、采樣時間Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境采用平板暴露法室內(nèi)面積≦30㎡，設內(nèi)、中、外對角線三點，內(nèi)、外點應距墻壁1M處；室內(nèi)面積>30㎡，設4角及中央5點，4角的布點部位應距墻壁1m處。將普通營養(yǎng)瓊脂平皿（Φ90mm）放置各采樣點，采樣高度為距地面0.8m-1.5m；采樣時將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露規(guī)定時間（Ⅱ類環(huán)境暴露15min，Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境暴露5分鐘）后蓋上平皿蓋及時送檢。

將送檢平皿置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)，必要時分離致病性微生物。3、結果計算

平板暴露法按平均每皿的菌落數(shù)報告：cfu/皿·暴露時間。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境采用平板暴露法室內(nèi)面積

各類環(huán)境空氣、物體表面、醫(yī)護人員手細菌菌落總數(shù)1.

Ⅰ類區(qū)域-潔凈手術室(分成4個等級)：Ⅰ特別潔凈手術室—手術區(qū)0.2個/30min?φ90皿，周邊區(qū)0.4個/30min?φ90皿；Ⅱ標準潔凈手術室—手術區(qū)0.75個/30min?φ90皿，周邊區(qū)1.5個/30min?φ90皿；Ⅲ一般潔凈手術室—手術區(qū)2個/30min?φ90皿，周邊區(qū)4個/30min?φ90皿；Ⅳ準潔凈手術室—手術區(qū)5個/30min?φ90皿；

2.Ⅱ類區(qū)域:非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房重癥監(jiān)護病房、血液病病區(qū)空氣中的細菌菌落總數(shù)≤4cfu／（15min?直徑9cm平皿）。

3.Ⅲ-IV類區(qū)域：兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細菌菌落總數(shù)≤4cfu/(5min?直徑9cm平皿)。1.

Ⅰ類區(qū)域-潔凈手術室(分成4個等級)：Ⅰ特別潔凈手a、層流手術室采樣布點在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上。層流手術室空氣監(jiān)測細菌菌落數(shù)，以沉降法為標準：①Ⅰ級特別潔凈手術室手術區(qū)的菌落數(shù)是0.2個/30min；周邊區(qū)是0.4個/30min；②Ⅱ級標準潔凈手術室手術區(qū)的菌落數(shù)是0.75個/30min；周邊區(qū)是1.5個/30min

③Ⅲ級一般潔凈手術室手術區(qū)的菌落數(shù)是2個/30min；周邊區(qū)是4個/30min

④Ⅳ級準潔凈手術室手術區(qū)的菌落數(shù)是5個/30min；周邊區(qū)是5個/30min。層流手術室空氣監(jiān)測a、層流手術室采樣布點在地面上或不高于地面0.8m的任意b、層流手術室空氣監(jiān)測細菌菌落數(shù)衛(wèi)生標準（表）

手術室分類衛(wèi)生標準（以沉降法為標準）手術區(qū)周邊區(qū)Ⅰ級特別潔凈手術室0.2個/30min0.4個/30minⅡ級標準潔凈手術室0.75個/30min1.5個/30minⅢ一般潔凈手術室2個/30min4個/30minⅣ級標準潔凈手術室5個/30min5個/30minb、層流手術室空氣監(jiān)測細菌菌落數(shù)衛(wèi)生標準（表）

c、百級手術間每間至少需要平板13個，暴露時間為30分鐘。手術區(qū)周邊區(qū)手術區(qū)周邊區(qū)d、千級手術室每間至少需要平板5個，暴露時間為30分鐘。手術區(qū)周邊區(qū)d、千級手術室每間至少需要平板5個，暴露時間為30分鐘。手術e、萬級手術室，每間至少需要3個，暴露時間為30分鐘。手術區(qū)周邊區(qū)e、萬級手術室，每間至少需要3個，暴露時間為30分鐘。手術區(qū)f、層流手術室空氣監(jiān)測沉降法空氣采樣選擇平皿數(shù)（表）被測區(qū)域潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)（9cm，以沉降30min計）100131000510000310000023000002被測區(qū)域潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)（9cm，以沉降30min計采樣時間：采取更換前使用中的消毒劑與無菌器械保存液。請抽取被檢樣品5ml送檢醇類和酚類消毒劑用普通營養(yǎng)肉湯作稀釋液。含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒液需在肉湯內(nèi)加入0.1%硫代硫酸鈉作稀釋液。季銨鹽類消毒液需在肉湯中加入3%Tween80和0.3％卵磷脂作稀液。含有表面活性劑的各種復方消毒劑需在肉湯中加入3％Tween80作稀釋液。4消毒劑和無菌器械保存液的微生物學監(jiān)測采樣時間：采取更換前使用中的消毒劑與無菌器械保存液。4細菌菌落總數(shù)檢查：取1ml采樣液加入到4ml稀釋液中，搖勻后取200ul接種普通營養(yǎng)瓊脂平板，將平板放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時計數(shù)菌落。

菌落數(shù)計算方法：每毫升含菌量=25*平板菌落數(shù)平板上有菌生長，證明被檢樣液有殘存活菌，若每個平板菌落數(shù)在4個以下，仍可用于消毒使用（但不能用于滅菌）；若每個平板菌落數(shù)超過4個，說明每毫升被檢樣液含菌量已超過100個，不宜再用。細菌菌落總數(shù)檢查：紫外線燈管輻射強度值的測定：

1、開啟紫外線燈5min后，按說明書操作，將測定波長為253.7nm的紫外線強度測定儀（指定有效期內(nèi)）探頭置被檢紫外線燈下垂直1m的中央處，儀表穩(wěn)定后所示數(shù)據(jù)即為紫外線燈管的輻射強度值。其中30W直管型紫外燈新燈管輻射強度值≥90微瓦·秒/

c㎡

，使用中輻射強度值≥70微瓦·秒/c㎡；150W高強度紫外線新燈的輻射強度值≥200微瓦·秒/

c㎡。5、紫外線消毒效果監(jiān)測紫外線燈管輻射強度值的測定：5、紫外線消毒效果監(jiān)測

2、紫外線強度指示卡監(jiān)測法（四環(huán)R牌）【性能與原理】紫外線強度指示卡由紫外線光敏色塊、標準色塊和卡片紙組成。

紫外線光敏色塊以涂有聚乙烯膜的卡片紙為片基，將對波長253.7nm的紫外線敏感的化學物質(zhì)和輔料均勻的涂布于片基上制成涂料卡，并粘貼在卡片紙中央制成。標準色塊的輻照強度值分別為90微瓦·秒/

c㎡和70微瓦·秒/c㎡，印制在紫外線光敏色塊的兩側。受到規(guī)定波長的紫外線照射后，光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色?！臼褂梅秶繖z測紫外線燈輻照強度值（90微瓦·秒/

c㎡和70微瓦·秒/c㎡）是否達到使用要求。用于紫外線輻照強度值的日常監(jiān)測，以便了解紫外線燈使用情況和及時進行更換。2、紫外線強度指示卡監(jiān)測法（四環(huán)R牌）【使用方法】測定時，打開紫外線燈管5min待其穩(wěn)定后，將指示卡置于距紫外線燈管下方垂直1m中央處，將有圖案一面朝向燈管，照射1min。受到規(guī)定波長的紫外線照射后，卡片紙中央的紫外線光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色。將其與標準色快相比，即可測知紫外線輻照強度值是否達到使用要求。使用中的舊燈管，輻照強度值≥70微瓦·秒/

c㎡時，可繼續(xù)使用，輻照強度值＜70微瓦·秒/c㎡時，應更換成新燈管?！咀⒁馐马棥?、紫外線強度指示卡檢測結果只能在監(jiān)測當時觀察，隨后光敏色塊會逐漸褪色，且褪色后的指示卡不得重復使用。為備查，應將結果及時記錄下來。

2、開啟包裝后，未用完的指示卡應及時用黑紙包裝好。防止指示卡與化學物質(zhì)和塑料膜直接接觸。

3、置室內(nèi)、陰涼、干燥處、避光保存。

【使用方法】測定時，打開紫外線燈管5min待其穩(wěn)定后，將指示

院內(nèi)感染監(jiān)測與操作

院內(nèi)感染監(jiān)測與操作醫(yī)院感染又稱醫(yī)院內(nèi)獲得性感染，指患者在入院時既不存在，又不處于潛伏期，而在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的感染，包括在醫(yī)院獲得而于出院后發(fā)病的感染。一、醫(yī)院感染的定義一、醫(yī)院感染的定義1、外源性感染又稱交叉感染，病原體來自患者體外，即來自其他住院患者、醫(yī)務人員、陪護家屬和醫(yī)院環(huán)境等。2、內(nèi)源性感染又稱自身感染，病原體來自患者自身貯菌庫（皮膚、鼻咽口腔、泌尿生殖道、腸道）的正常菌群或外來的定植菌。在醫(yī)院中當人體免疫功能下降、體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境失衡或發(fā)生細菌易位時即可發(fā)生感染。二、醫(yī)院感染的分類1、外源性感染又稱交叉感染，病原體來自患者體外，即來自其醫(yī)院感染可發(fā)生在與醫(yī)院相關的人群中，如門診和住院患者、醫(yī)務人員、陪護家屬、探視者等均可發(fā)生。三、醫(yī)院感染的對象三、醫(yī)院感染的對象1、手的微生物監(jiān)測采樣時間：在接觸患者或從事醫(yī)療活動前進行。采樣方法：被檢人五指并攏，將浸有無菌生理鹽水的棉拭子一支在雙手曲面從指根到指端來回涂擦各兩遍（一只手涂擦面積約30

c㎡），并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有5ml采樣液的試管內(nèi)送檢。采樣面積按平方厘米(c㎡)計算。四、醫(yī)院感染監(jiān)控中常用的檢測方法1、手的微生物監(jiān)測四、醫(yī)院感染監(jiān)控中常用的檢測方法細菌菌落總數(shù)檢查：200ul采樣液接種普通養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)，放35℃溫箱內(nèi)24~48h計數(shù)菌落。手細菌菌落總數(shù)（cfu/c㎡）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)

30X2=0.42*平板上菌落數(shù)

（cfu：是菌落形成單位，將稀釋后的一定量的菌液通過涂布的方法，讓其內(nèi)的微生物單細胞分散在瓊脂平板上，待培養(yǎng)后，每一活細胞就形成一個菌落。）細菌菌落總數(shù)檢查：200ul采樣液接種普通養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)，放3采樣時間：消毒處理后4h內(nèi)采樣。采樣面積：被采表面<100c㎡

，取全部表面；被采表面≥100c㎡，取100c㎡。采樣方法：用5cm×5cm的標準滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣1～4個規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子裝入5ml采樣液的試管內(nèi)送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體的方法采樣。2、物體表面的微生物學監(jiān)測采樣時間：消毒處理后4h內(nèi)采樣。2、物體表面的微生物學監(jiān)測細菌菌落總數(shù)檢查：

200ul采樣液接種普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)，放35℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24~48h計數(shù)菌落。物體表面細菌菌落總數(shù)（cfu/c㎡

）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)采樣面積（c㎡）細菌菌落總數(shù)檢查：采樣時間：選擇消毒處理后與進行醫(yī)療活動之前期 間采樣。采樣方法：自然沉降法，國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院采用。采樣高度：與地面垂直高度0.8～1.5m。布點方法：室內(nèi)面積≤30㎡

，設一條對角線上取3點，即中心一點、兩端各距墻1m處取一點；室內(nèi)面積>30㎡

，設東、西、南、北、中5點，其中東、西、南、北點均距墻1m。采樣方法：用9cm直徑的普通營養(yǎng)瓊脂平板，在采樣點將平板蓋打開，把蓋子扣在平板的邊緣上，暴露5min/15min/30min后送檢培養(yǎng)，每個被監(jiān)測的房間菌落數(shù)以平均數(shù)計算。3、空氣消毒效果的監(jiān)測3、空氣消毒效果的監(jiān)測1、采樣時間Ⅰ類環(huán)境在潔凈系統(tǒng)自凈后與從事醫(yī)療活動前取樣；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境在消毒或規(guī)定的通風換氣后與從事醫(yī)療活動前取樣。2、檢測方法Ⅰ類環(huán)境可選擇平板暴露法和空氣采樣器法，參照GB50333《醫(yī)院潔凈手術部建筑技術規(guī)范》要求進行檢測?？諝獠蓸悠鞣蛇x擇六級撞擊式空氣采樣器或其他經(jīng)驗證的空氣采樣器。檢測時將采樣器置于室中央0.8m-1.5m高度，按采樣器使用說明書進行操作。每次采樣時間不應超過30min。房間大于10㎡者，每增加10㎡增設一個采樣點。1、采樣時間Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境采用平板暴露法室內(nèi)面積≦30㎡，設內(nèi)、中、外對角線三點，內(nèi)、外點應距墻壁1M處；室內(nèi)面積>30㎡，設4角及中央5點，4角的布點部位應距墻壁1m處。將普通營養(yǎng)瓊脂平皿（Φ90mm）放置各采樣點，采樣高度為距地面0.8m-1.5m；采樣時將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露規(guī)定時間（Ⅱ類環(huán)境暴露15min，Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境暴露5分鐘）后蓋上平皿蓋及時送檢。

將送檢平皿置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)，必要時分離致病性微生物。3、結果計算

平板暴露法按平均每皿的菌落數(shù)報告：cfu/皿·暴露時間。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類環(huán)境采用平板暴露法室內(nèi)面積

各類環(huán)境空氣、物體表面、醫(yī)護人員手細菌菌落總數(shù)1.

Ⅰ類區(qū)域-潔凈手術室(分成4個等級)：Ⅰ特別潔凈手術室—手術區(qū)0.2個/30min?φ90皿，周邊區(qū)0.4個/30min?φ90皿；Ⅱ標準潔凈手術室—手術區(qū)0.75個/30min?φ90皿，周邊區(qū)1.5個/30min?φ90皿；Ⅲ一般潔凈手術室—手術區(qū)2個/30min?φ90皿，周邊區(qū)4個/30min?φ90皿；Ⅳ準潔凈手術室—手術區(qū)5個/30min?φ90皿；

2.Ⅱ類區(qū)域:非潔凈手術部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房重癥監(jiān)護病房、血液病病區(qū)空氣中的細菌菌落總數(shù)≤4cfu／（15min?直徑9cm平皿）。

3.Ⅲ-IV類區(qū)域：兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細菌菌落總數(shù)≤4cfu/(5min?直徑9cm平皿)。1.

Ⅰ類區(qū)域-潔凈手術室(分成4個等級)：Ⅰ特別潔凈手a、層流手術室采樣布點在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上。層流手術室空氣監(jiān)測細菌菌落數(shù)，以沉降法為標準：①Ⅰ級特別潔凈手術室手術區(qū)的菌落數(shù)是0.2個/30min；周邊區(qū)是0.4個/30min；②Ⅱ級標準潔凈手術室手術區(qū)的菌落數(shù)是0.75個/30min；周邊區(qū)是1.5個/30min

③Ⅲ級一般潔凈手術室手術區(qū)的菌落數(shù)是2個/30min；周邊區(qū)是4個/30min

④Ⅳ級準潔凈手術室手術區(qū)的菌落數(shù)是5個/30min；周邊區(qū)是5個/30min。層流手術室空氣監(jiān)測a、層流手術室采樣布點在地面上或不高于地面0.8m的任意b、層流手術室空氣監(jiān)測細菌菌落數(shù)衛(wèi)生標準（表）

手術室分類衛(wèi)生標準（以沉降法為標準）手術區(qū)周邊區(qū)Ⅰ級特別潔凈手術室0.2個/30min0.4個/30minⅡ級標準潔凈手術室0.75個/30min1.5個/30minⅢ一般潔凈手術室2個/30min4個/30minⅣ級標準潔凈手術室5個/30min5個/30minb、層流手術室空氣監(jiān)測細菌菌落數(shù)衛(wèi)生標準（表）

c、百級手術間每間至少需要平板13個，暴露時間為30分鐘。手術區(qū)周邊區(qū)手術區(qū)周邊區(qū)d、千級手術室每間至少需要平板5個，暴露時間為30分鐘。手術區(qū)周邊區(qū)d、千級手術室每間至少需要平板5個，暴露時間為30分鐘。手術e、萬級手術室，每間至少需要3個，暴露時間為30分鐘。手術區(qū)周邊區(qū)e、萬級手術室，每間至少需要3個，暴露時間為30分鐘。手術區(qū)f、層流手術室空氣監(jiān)測沉降法空氣采樣選擇平皿數(shù)（表）被測區(qū)域潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)（9cm，以沉降30min計）100131000510000310000023000002被測區(qū)域潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)（9cm，以沉降30min計采樣時間：采取更換前使用中的消毒劑與無菌器械保存液。請抽取被檢樣品5ml送檢醇類和酚類消毒劑用普通營養(yǎng)肉湯作稀釋液。含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒液需在肉湯內(nèi)加入0.1%硫代硫酸鈉作稀釋液。季銨鹽類消毒液需在肉湯中加入3%Tween80和0.3％卵磷脂作稀液。含有表面活性劑的各種復方消毒劑需在肉湯中加入3％Tween80作稀釋液。4消毒劑和無菌器械保存液的微生物學監(jiān)測采樣時間：采取更換前使用中的消毒劑與無菌器械保存液。4細菌菌落總數(shù)檢查：取1ml采樣液加入到4ml稀釋液中，搖勻后取200ul接種普通營養(yǎng)瓊脂平板，將平板放37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時計數(shù)菌落。

菌落數(shù)計算方法：每毫升含菌量=25*平板菌落數(shù)平板上有菌生長，證明被檢樣液有殘存活菌，若每個平板菌落數(shù)在4個以下，仍可用于消毒使用（但不能用于滅菌）；若每個平板菌落數(shù)超過4個，說明每毫升被檢樣液含菌量已超過100個，不宜再用。細菌菌落