抗生素類藥物的2

藥物分析主講:羅容珍PharmaceuticalAnalysis第十一章抗生素類藥物的分析12/17/2022Contents概述1β-內(nèi)酰胺類2氨基糖苷類3四環(huán)素類4高分子雜質(zhì)檢查512/17/2022第一節(jié)概述1.抗生素（antibiotics）

在低微濃度下即可對某些生物（病原微生物）的生命活動有特異抑制作用的化學(xué)物質(zhì)的總稱2.分類

β–內(nèi)酰胺類(青霉素類、頭孢菌素類)氨基糖苷類(鏈霉素、慶大霉素、依替米星)四環(huán)素類(四環(huán)素、金霉素、土霉素)

大環(huán)內(nèi)酯類(紅霉素、螺旋霉素、麥迪霉素)多烯大環(huán)類(制霉菌素、兩性霉素B)多肽類(多黏菌素、放線菌素)12/17/2022第一節(jié)概述3.來源生物合成（發(fā)酵）化學(xué)合成或半合成4.特點化學(xué)純度較低活性組分易發(fā)生變異穩(wěn)定性差12/17/2022第一節(jié)概述5.抗生素質(zhì)量分析——生物學(xué)法、物理化學(xué)法

鑒別：理化方法、微生物法

檢查：水分、pH值、異常毒性、熱原、細(xì)菌內(nèi)毒素、降壓物質(zhì)等

含量/效價測定：

微生物法：

與臨床療效吻合,靈敏度高，結(jié)果直觀，適用范圍廣；但操作復(fù)雜費時，誤差大

理化方法：準(zhǔn)確度與專屬性較高,且操作簡便；但與臨床療效有偏差12/17/2022第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類青霉素(芐青霉素)(penicillins)氨芐西林阿莫西林12/17/2022第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類頭孢氨芐頭孢拉定頭孢羥氨芐頭孢噻吩鈉12/17/2022第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類6-aminopenicillanicacid,簡稱6-APA青霉素類7-aminocephalosporanicacid,簡稱7-ACA頭孢菌素類氫化噻唑環(huán)氫化噻嗪環(huán)＊＊＊＊12/17/2022第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.酸性（羧基）pKa2.5-2.8，酸性較強。堿金屬鹽水溶性好，有機堿鹽難溶于水。普魯卡因青霉素12/17/2022第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類2.手性C（旋光性）﹡﹡﹡﹡﹡3.UV青霉素類：苯環(huán)取代基頭孢菌素類：母核有共軛結(jié)構(gòu)260nm12/17/20224.β–內(nèi)內(nèi)酰胺胺環(huán)(四元元環(huán)張張力+酰胺胺鍵)第二節(jié)節(jié)ββ–內(nèi)內(nèi)酰胺胺類干燥條條件較較穩(wěn)定定，溶溶液不不穩(wěn)定定某些氧氧化劑劑、金金屬離離子、、溫度度12/12/2022第二節(jié)節(jié)ββ–內(nèi)內(nèi)酰胺胺類二、Identification(一)色譜法HPLC(tR)TLC(Rf)(二)光譜法IRUVNMR12/12/2022第二節(jié)節(jié)ββ–內(nèi)內(nèi)酰胺胺類12/12/2022第二節(jié)節(jié)ββ–內(nèi)內(nèi)酰胺胺類12/12/2022第二二節(jié)節(jié)ββ––內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類頭孢孢利利定定的的NMR鑒別別法法(JP14)取本本品品50mg溶于于0.5ml重水水中中，，測測定定NMR光譜譜時時，，應(yīng)應(yīng)顯顯示示δ3.8附附近近δδ6.9～～7.5δδ7.9～～9.0單峰峰信信號號多多重重峰峰信信號號多多重重峰峰信信號號2：：3：：512/12/2022第二二節(jié)節(jié)ββ––內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類(三三)呈呈色色反反應(yīng)應(yīng)1））羥羥肟肟酸酸鐵鐵反反應(yīng)應(yīng)————β––內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺環(huán)環(huán)β–內(nèi)酰胺類NH2OH·HClNaOH羥肟酸Fe3+H+顯色（紅、棕、褐）2））茚三三酮酮反反應(yīng)應(yīng)————α-氨氨基基茚三酮Δ

藍紫色12/12/2022第二二節(jié)節(jié)ββ––內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類α3））雙縮縮脲脲反反應(yīng)應(yīng)————β––內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類堿性酒石酸銅紫色12/12/2022第二二節(jié)節(jié)ββ––內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類4））變色色酸酸-硫硫酸酸反反應(yīng)應(yīng)H2SO4Δ

HCHO變色酸（縮合）顯色5））重氮氮苯苯磺磺酸酸反反應(yīng)應(yīng)————酚羥羥基基（偶合）6））銅鹽鹽反反應(yīng)應(yīng)————頭孢孢氨氨芐芐的的專專屬屬反反應(yīng)應(yīng)12/12/20227））硫硫酸酸-甲甲醛醛反反應(yīng)應(yīng)(BP)第二二節(jié)節(jié)ββ––內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類青霉霉素素鉀鉀和和青青霉霉素素鈉鈉呈呈紅紅棕棕色色(四四)焰焰色色反反應(yīng)應(yīng)————K+、Na+三、、PurityTest(聚聚合合物物、、有有關(guān)關(guān)物物質(zhì)質(zhì)、、異異構(gòu)構(gòu)體體等等)1.聚合合物物頭孢孢他他啶啶中中聚聚合合物物測測定定12/12/2022第二二節(jié)節(jié)ββ––內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類色譜譜條條件件與與系系統(tǒng)統(tǒng)適適用用性性試試驗驗用葡聚聚糖糖凝凝膠膠G-10（40～～120m））為為填填充充劑劑，，玻璃璃柱柱內(nèi)徑徑1.3～～1.6cm，，床床體體積積50～～60ml；；流動動相相A為為含含3.5%硫硫酸酸銨銨的的0.1mol/L磷磷酸酸鹽鹽緩緩沖沖液液（取取磷磷酸酸氫氫二二鈉鈉2.19g和和磷磷酸酸二二氫氫鈉鈉0.54g，，加加水水100ml使使溶溶解解，，調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)pH至至7.0）），，流動動相相B為為水水；流流速速為為0.8ml/min；；檢檢測測波波長長為為254nm。。以以流動動相相A為為流流動動相相，，用用0.1mg/ml藍藍色色葡葡聚聚糖糖2000溶溶液液進進樣樣200l進進行行測測定定，，理理論論板板數(shù)數(shù)應(yīng)應(yīng)不不低低于于900，，拖拖尾尾因因子子在在0.75～～1.5。。兩種種流流動動相相系系統(tǒng)統(tǒng)中中藍藍色色葡葡聚聚糖糖的的保保留留時時間間比比應(yīng)應(yīng)在在0.93～～1.07之之間間。。對照照品品溶溶液液以以流流動動相相B為為流流動動相相，，重重復(fù)復(fù)進進樣樣200l，，峰峰面面積積值值的的相相對對標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)差差應(yīng)應(yīng)小小于于5.0%。。對照品溶液液的制備取頭孢他啶啶對照品適適量，精密密稱定，加加水制成每每1ml中中含頭孢他他啶100g的溶液，，搖勻12/12/2022第二節(jié)ββ–內(nèi)酰胺胺類測定法取本品適量量，精密稱稱定，加水水制成每1ml中約約含頭孢他他啶20mg的溶液液，立即進進樣200l，以流動相A為流動相相進行測定定，記錄色色譜圖；另取對照品溶溶液200l注入液相相色譜儀，，以流動相相B為流動動相，記錄錄色譜圖，按外標(biāo)法法計算，本本品含頭孢孢他啶聚合合物以頭孢孢他啶計不不得過0.3%主成分自身身對照法面積歸一化化法限量法自身對照外外標(biāo)法12/12/2022萄聚糖凝膠膠立體網(wǎng)狀結(jié)結(jié)構(gòu)圖原理——“分子篩”第二節(jié)ββ–內(nèi)酰胺胺類12/12/2022第二節(jié)ββ–內(nèi)酰胺胺類2.有關(guān)物質(zhì)與與異構(gòu)體頭孢呋辛酯酯中有關(guān)物物質(zhì)和異構(gòu)構(gòu)體的檢查查色譜條件與與系統(tǒng)適用用性試驗：：ODS分析析柱；0.2mol/L磷磷酸二氫銨銨-甲醇（（62:?38）為流動相相，流速1ml/min；檢檢測波長278nm。要求求頭孢呋辛酯酯A，B異異構(gòu)體之間間，頭孢呋呋辛酯A異異構(gòu)體與頭頭孢呋辛酯酯△2-異構(gòu)體之之間的分離度應(yīng)大大于1.5；理論板數(shù)數(shù)按頭孢呋呋辛酯A異異構(gòu)體峰計計算，應(yīng)不不低于1500異構(gòu)體取本品適量量，配制成成每1ml中約含0.25mg的溶液液，取20μl注入入液相色譜譜儀，記錄錄色譜圖。。B異構(gòu)體峰峰的相對保保留時間約約為0.85，A異異構(gòu)體峰的的相對保留留時間為1.0。12/12/2022第二節(jié)ββ–內(nèi)酰胺胺類40020600302010時間(min)峰高(mAU)65432113.95411.9192.401供試品色譜譜圖中A異異構(gòu)體峰的的面積與A、B異構(gòu)構(gòu)體峰的面面積和之比比應(yīng)為0.48～0.55。BA△3-EE12/12/2022第二節(jié)ββ–內(nèi)酰胺胺類有關(guān)物質(zhì)取本品適量量，精密稱稱定，加流流動相制成成約含0.25mg/ml的溶溶液，作為為供試品溶溶液；精密量取取適量，加加流動相制制成2.5g/ml的的溶液，作作為對照溶溶液。取對照溶溶液20l注入液相相色譜儀，，調(diào)節(jié)儀器靈靈敏度，使使主成分峰峰高約為記記錄儀滿量量程的10%，再取供試品品溶液和對對照品溶液液各20l，分別注注入液相色色譜儀，記錄色譜圖圖至主峰保保留時間的的3.5倍倍，供試品溶溶液如顯雜雜質(zhì)峰，量量取各雜質(zhì)質(zhì)峰面積的的和，其中中E異構(gòu)體峰面面積不得大大于對照溶溶液主峰面面積之和(1.0%)，△3-異構(gòu)體峰面面積不得大大于1.5倍(1.5%)，其余單個個雜質(zhì)峰面面積的和不不得大于3倍(3.0%)。(供試品溶溶液中任何何小于對照照品溶液主主峰面積之之和0.05倍的峰峰可忽略不不計)12/12/20223.UV第二節(jié)ββ–內(nèi)酰胺胺類4.有機溶溶劑5.結(jié)晶性性第一法(偏光顯微鏡法)第二法(X射線粉末衍射法)四、Assay碘量法汞量法酸堿滴定法法羥肟酸比色色法HPLC法法12/12/2022第二節(jié)ββ–內(nèi)酰胺胺類阿莫西林克克拉維酸鉀鉀片色譜條件與與系統(tǒng)適用用性試驗用十八烷基基硅烷鍵合合硅膠為填填充劑；以磷酸鹽緩緩沖液(取取磷酸二氫氫鈉7.8g，加水水900ml溶解解，用磷酸酸或10mol/L氫氧化鈉鈉溶液調(diào)節(jié)節(jié)pH值至至4.4±±0.1，，加水稀釋釋至1000ml)-甲醇(95:5)為流動相相；流速為0.7ml/min；檢測波波長為220nm。。阿莫西林峰峰與克拉維維酸峰的分分離度應(yīng)大大于3.5測定法取本品10片片，置1000ml量瓶瓶中，加水適適量，振搖使使溶解，加水水稀釋至刻度度，搖勻，精精密量取10ml，置50ml量瓶瓶中，加水稀稀釋至刻度，，搖勻，濾過過，取續(xù)濾液液10l注入液相色色譜儀，記錄錄色譜圖；另另取阿莫西林林對照品與克克拉維酸對照照品各適量，，加水溶解，，制成每1ml中含阿莫西西林0.5mg和克拉維維酸0.25mg的混合合溶液，同法測定。。按外標(biāo)法以以峰面積分別別計算供試品品中C16H19N3O5S和C8H9NO5的含量。12/12/2022第二節(jié)β––內(nèi)酰胺類12/12/2022第三節(jié)氨基基糖苷類氨基環(huán)醇+氨氨基糖→苷鏈霉素(Streptomycin)12/12/2022第三節(jié)氨基基糖苷類巴龍霉素(paromomycin)D-葡萄糖胺胺脫氧鏈霉霉胺巴龍胺D－核糖巴巴龍霉糖巴龍二糖胺12/12/2022第三節(jié)氨基基糖苷類慶大霉素(gentamycin)絳紅糖胺(紫素胺)2-脫氧鏈霉霉胺加洛糖胺(N-甲基-3-去氧-4-甲基戊戊糖胺)12/12/2022第三節(jié)氨基基糖苷類一、結(jié)構(gòu)與性性質(zhì)1）堿性（氨氨基）：臨床床應(yīng)用其硫酸酸鹽2）溶解度（（氨基、羥基基）：水溶性性3）旋光性（（糖）：多個個手性碳4）穩(wěn)定性（（苷）：強酸酸、堿條件均均可水解12/12/2022二、Identification第三節(jié)氨基基糖苷類坂口反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)N-甲基葡萄萄糖胺反應(yīng)12/12/2022第三節(jié)氨基基糖苷類1.茚三酮反反應(yīng)——羥基胺類,αα-氨基酸△2.Molisch試驗———五碳糖或六碳碳糖結(jié)構(gòu)紅紫色羥甲基糠醛(含六碳糖結(jié)構(gòu)氨基糖苷類酸性水解產(chǎn)物)12/12/2022第三節(jié)氨氨基糖糖苷類藍紫色3.N-甲基基葡萄糖糖胺反應(yīng)應(yīng)（Elson-Morgan反應(yīng)應(yīng)）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對二甲氨基苯甲醛H+紅色12/12/2022第三節(jié)氨氨基糖糖苷類乙酰丙酮酮OH-對二甲氨基苯甲醛H+12/12/2022第三節(jié)氨氨基糖糖苷類4.麥芽酚反反應(yīng)———鏈霉糖特特有反應(yīng)應(yīng)H+5.坂口反應(yīng)應(yīng)——鏈霉胍特特有反應(yīng)應(yīng)鏈霉素OH-水解8-羥基喹啉NaOBr或α-萘酚

鏈霉胍橙紅色6.硫酸酸鹽反應(yīng)12/12/20227.色譜譜法8.光譜譜法第三節(jié)氨氨基糖糖苷類三、PurityTest1.鏈霉素中中鏈霉素素B（甘甘露糖鏈鏈霉素））的檢查查來源：發(fā)發(fā)酵中產(chǎn)產(chǎn)生方法：TLC中中的對照照品法2.硫酸酸奈替米米星中西索米米星的檢檢查(TLC)3.慶大霉素素C組分分的測定定12/12/2022第三節(jié)氨氨基糖糖苷類色譜條件件與系統(tǒng)統(tǒng)適用性性試驗：：用十八烷烷基硅烷烷鍵合硅硅膠為填填充劑；；以水－－冰醋酸酸－甲醇醇(25:5:70)配制制的0.02mol/L庚烷磺酸酸鈉溶液為流流動相（（必要時時調(diào)節(jié)甲甲醇的含含量）；；檢測波波長為330nm。。理論板板數(shù)按C2組分峰計計算應(yīng)不不低于2000。C2a峰和C2峰的分離離度應(yīng)應(yīng)符合要要求。測定法取本品適適量，精精密稱定定，加水水制成每每1ml中含含0.65mg的溶液液，精密密量取4.0ml，，置10ml量量瓶中，，加異丙醇2ml與與鄰苯二醛醛試液1.6ml，用用異丙醇醇稀釋至至刻度，，搖勻，，置60℃水浴浴中加熱熱15分分鐘，冷冷卻，濾濾過，取取續(xù)濾液液10μμl注注入液相相色譜儀儀，記錄錄色譜圖圖；另另取慶大大霉素標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品，，同法測測定。C組分的的保留時時間依次次為：C1、C1a、C2a、C2。量取C1、C1a、C2a、C2的峰面積積。C1應(yīng)為25％～50％，，C1a應(yīng)為15％～40％，，C2a＋C2應(yīng)為20～50％。。12/12/2022第三節(jié)氨氨基糖糖苷類慶大霉素素?zé)o紫外外吸收，，需進行行衍生化化處理后后再進行行HPLC測定定。λmax=330nm12/12/2022討論第三節(jié)氨氨基糖糖苷類1、柱效效：以C2峰計算，，理論板板數(shù)應(yīng)不不低于2000，在此此柱效下下各組分分之間才才能達到到規(guī)定的的分離度度。為此此色譜柱柱做適當(dāng)當(dāng)選擇。。2、流動動相：流動相極極性適當(dāng)當(dāng)控制(適當(dāng)調(diào)調(diào)節(jié)甲醇醇的比例例)。極極性過強強，出峰峰快，分分離不佳佳。C1峰與衍生生試劑等等雜質(zhì)峰峰難分析析;極性性過弱，，出峰太太慢。實實驗表明明，C2峰的保留留時間控控制在20min～30min較為為適宜。。3、衍生生化試劑劑與衍生生物的穩(wěn)穩(wěn)定性：：配制后不不能久置置，時間間久了試試劑峰峰峰高增加加并影響響組分測測定，一一般避光光保存可可使用三三天。生生成的衍衍生物不不穩(wěn)定。。4、離子子對試劑劑濃度影影響：離子對試試劑濃度度對慶大大霉素OPA衍衍生物保保留值有有影響。。12/12/2022第三節(jié)氨氨基糖苷類類BP(2005)———HPLC-ECDCh.P———HPLC-ELSD4.硫酸鹽鹽測定——EDTA滴滴定四、Assay微生物檢定定法HPLC法法12/12/2022第四節(jié)節(jié)四四環(huán)素素類ABCD12345678910111212/12/2022一、結(jié)結(jié)構(gòu)與與性質(zhì)質(zhì)第四節(jié)節(jié)四四環(huán)素素類1）兩兩性：：-OH→酸酸性N(CH3)2→堿性性Ca2+、Mg2+生成不不溶性性鹽；；Fe3+形成紅紅色配配合物物；Al3+形成黃黃色配配合物物；pH3~7.5多價陽陽離子子與酚酚二酮酮→熒熒光與酸、、堿均均可成成鹽；；臨床多多用鹽鹽酸鹽鹽；強酸或或強堿堿中溶溶解度度↑2）旋旋光性性3）UV和和熒光光4）與與金屬屬離子子絡(luò)合合(酚羥基基、烯烯醇基基)12/12/2022弱酸性性（pH2-6）A環(huán)C-4異構(gòu)構(gòu)化差差向向四環(huán)環(huán)素酸性（（pH<2）C環(huán)環(huán)脫水水脫脫水四四環(huán)素素堿性C環(huán)開開環(huán)，，形成成內(nèi)酯酯異異四四環(huán)素素5）不不穩(wěn)定定性第四節(jié)節(jié)四四環(huán)素素類A.差向異異構(gòu)化化藍色熒熒光淡黃→黑12/12/2022第四節(jié)節(jié)四四環(huán)素素類AApH2.0~6.0（氫鍵，土霉霉素、、多西西環(huán)素素不易易差向向異構(gòu)構(gòu)化））12/12/2022第四節(jié)節(jié)四四環(huán)素素類B.酸酸性脫水降解λmax=445nmλmax=435nmDDDCBBCBC12/12/2022C.堿堿性脫水降解第四節(jié)節(jié)四四環(huán)素素類OH-12/12/2022第四節(jié)節(jié)四四環(huán)素素類二、Identification1、HPLC2、TLC(正相相分配配薄層層色譜譜)EDTA→克服服痕量量金屬屬造成成的拖拖尾現(xiàn)現(xiàn)象3、IR4、UV5、顯色法法濃硫酸三氯化鐵12/12/2022200nm300nm400nmTC第四節(jié)四環(huán)環(huán)素類三、PurityTest1.有關(guān)物質(zhì)質(zhì)——HPLC2.雜質(zhì)吸光光度——UV268nm355nm12/12/2022第五節(jié)、高分分子雜質(zhì)的檢檢查生產(chǎn)過程貯存過程使用不當(dāng)高分子雜質(zhì)內(nèi)源性(藥物自身聚合物)外源性(蛋白、多肽、多糖及其與藥物的結(jié)合物)發(fā)酵過程控制重點12/12/2022第五節(jié)、高分分子雜質(zhì)的檢檢查1.基本結(jié)構(gòu)構(gòu)青霉素族多肽（青霉素噻唑多肽）聚合物母核參于反應(yīng)側(cè)鏈參于反應(yīng)頭孢菌素族與母核有關(guān)的N型聚合反應(yīng)側(cè)鏈參與反應(yīng)的L型聚合反應(yīng)12/12/2022第五節(jié)、高分分子雜質(zhì)的檢檢查2.特點（1）發(fā)酵中產(chǎn)生的的任何蛋白及及蛋白碎片均均可帶入產(chǎn)品品中，相同的的蛋白或蛋白白碎片上可以以結(jié)合不同數(shù)數(shù)目的藥物分分子，形成青青霉素噻唑多多肽類雜質(zhì)。。（2）有不同聚合度度和不同機理理聚合反應(yīng)形形成的聚合物物，聚合物發(fā)發(fā)生不同程度度的降解作用用。（3）以異構(gòu)體存在在樣品，同聚聚和異聚反應(yīng)應(yīng)可同時發(fā)生生。（4）高分子雜質(zhì)的的種類、數(shù)量量與生產(chǎn)工藝藝密切相關(guān)（（溶媒結(jié)晶、、噴霧干燥））12/12/2022第五節(jié)、高分分子雜質(zhì)的檢檢查3.雜質(zhì)控制制方法反相高效液相相、離子交換換色譜和凝膠色譜。葡聚糖凝膠SephadexC－10自身對照外標(biāo)標(biāo)法12/12/2022ThankYou!12/12/2022青霉素的降解解反應(yīng)青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑?；u胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl212/12/202212/12/20221.熟熟悉悉抗抗生生素素類類藥藥物物分分析析的的特特點點及及其其常規(guī)規(guī)檢檢驗驗項項目目。。了了解解抗抗生生素素類類藥藥物物的分分析析現(xiàn)現(xiàn)狀狀，，熟熟悉悉生生物物學(xué)學(xué)法法與與物物理理化學(xué)學(xué)法法測測定定效效價價的的原原理理及及優(yōu)優(yōu)缺缺點點。。2.掌掌握握β－內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類抗抗生生素素的的結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)、、性質(zhì)質(zhì)、、鑒鑒別別及及含含量量測測定定。。第十十一一章章復(fù)復(fù)習(xí)習(xí)內(nèi)內(nèi)容容12/12/20223.掌掌握握氨氨基基糖糖苷苷類類抗抗生生素素的的結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)、、性性質(zhì)質(zhì)及及鑒鑒別別，，了了解解其其檢檢查查及及含含量量測測定定4.掌掌握握四四環(huán)環(huán)素素類類抗抗生生素素的的結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)及及性性質(zhì)質(zhì)，，了了解解其其鑒鑒別別、、檢檢查查及及含含量量測測定定5.了了解解抗抗生生素素類類藥藥物物的的質(zhì)質(zhì)量量考考察察方方法法12/12/202299：：89．．下下列列哪哪個個藥藥物物會會發(fā)發(fā)生生羥羥肟肟酸酸鐵反反應(yīng)應(yīng)A.青青霉霉素素B.慶慶大大霉霉素素C.紅紅霉霉素素D.鏈鏈霉霉素素E.維維生生素素C12/12/202299m：：71．．中中國國藥藥典典(2005年年版版)測測定定頭頭孢菌菌素素類類藥藥物物的的含含量量時時，，多多數(shù)采采用用的的方方法法是是A.微微生生物物法法B.碘碘量量法法C.汞汞量量法法D.正正相相高高效效液液相相色色譜譜法法E.反反相相高高效效液液相相色色譜譜法法12/12/202295：：139．．屬屬于于-內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類的的抗抗生生素素藥藥物有有A.青青霉霉素素B.紅紅霉霉素素C.頭頭孢孢菌菌素素D.慶慶大大霉霉素素E.四四環(huán)環(huán)素素12/12/202245．．能能和和茚茚三三酮酮發(fā)發(fā)生生呈呈色色反反應(yīng)應(yīng)的的物物質(zhì)質(zhì)有有A．．鏈鏈霉霉素素B．．慶慶大大霉霉素素C．．土土霉霉素素D．．氨氨基基酸酸E．．苯苯巴巴比比妥妥12/12/202296：：135.青青霉霉素素類類藥藥物物可可用用下下面面哪哪