利用組織培養(yǎng)技術(shù)快速提高桔梗產(chǎn)量課件

利用組織培養(yǎng)技術(shù)快速提高

桔梗產(chǎn)量利用組織培養(yǎng)技術(shù)快速提高

桔梗產(chǎn)量1問題提出桔梗的生長周期長、易染病、生長條件要求較高、生產(chǎn)管理較為繁瑣，農(nóng)民種植該作物經(jīng)濟收益并不很高，而且還會花費很多人力、物力。就此，我們組提出設(shè)想——能否利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)快速大量繁殖具有較強抗逆性的桔梗？問題提出桔梗的生長周期長、易染病、生長條件要求較高、生產(chǎn)管理2目錄桔?；窘榻B傳統(tǒng)種植方式組織培養(yǎng)方式結(jié)果預(yù)測目錄桔梗基本介紹3一、桔梗的基本介紹1、在生物中的位置

桔梗(Platycodongrandiforus)

界：植物界

門：被子植物門

綱：雙子葉植物綱

目：菊目

科：桔?？?/p>

屬：桔梗屬一、桔梗的基本介紹1、在生物中的位置4

2、植物形態(tài)

多年生草本，高40－90厘米。植物體內(nèi)有乳汁，全株光滑無毛。根粗大肉質(zhì)，圓錐形或有分叉，外皮黃褐色。莖直立，有分枝。2、植物形態(tài)5

葉多為互生，少數(shù)對生，近無柄，葉片長卵形，邊緣有鋸齒；花大形，單生于莖頂或數(shù)朵成疏生的總狀花序；花冠鐘形，藍紫色或藍白色，裂片5。葉多為互生，少數(shù)對生，近無柄，葉片長卵形，邊緣有鋸齒6蒴果卵形，熟時頂端開裂，多年生草本植物。根可入藥，有宣肺、祛痰、排膿等功用。蒴果卵形，熟時頂端開裂，多年生草本植物。根可入藥，有宣肺、祛7

3、生長習性

喜溫和涼爽氣候。苗期怕強光直曬，須遮蔭，成株喜陽光怕積水?？垢珊?，耐嚴寒，怕風害。適宜在土層深厚、排水良好、土質(zhì)疏松而含腐殖質(zhì)的砂質(zhì)壤土上栽培。3、生長習性84、應(yīng)用價值①作為藥材：桔梗入藥始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為臨床常用藥，味苦、辛，性平，歸肺經(jīng)。功能開宣肺氣、祛痰止咳、利咽散結(jié)、寬胸排膿。藥理實驗證實，桔梗有抗炎、鎮(zhèn)咳、祛痰、抗?jié)儭⒔笛獕?、擴張血管、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱、降血糖、抗膽堿、促進膽酸分泌、抗過敏等廣泛作用。常用以治療咳嗽痰多、胸悶不暢、咽痛、音啞、肺癰吐膿、瘡瘍膿成不潰等病癥。4、應(yīng)用價值9②作為食物：可作為一道菜肴。②作為食物：可作為一道菜肴。10二、傳統(tǒng)種植方式1、選擇土地

選擇陽光充足、土層深厚、排水良好的砂質(zhì)壤土地塊。選地后，每畝施土雜肥30kg，加過磷酸鈣和餅肥各50kg或磷酸二銨15kg，勻撒于地內(nèi)，深耕土壤35cm，整平耙細，做1m寬平畦，長短以地形而定。二、傳統(tǒng)種植方式1、選擇土地11

2、繁殖（1）種子繁殖：生長期2年。

生產(chǎn)中一般采用直播。

冬播或春播：冬播于11月份～次年1月份，春播于3～4月份。以冬播為好，一般采用撒播。播時將種子用潮細沙土拌勻撒于畦面上，用掃帚輕掃一遍，以不見種子為度，稍作震壓。翌年春，出苗早齊。春播，要使出苗整齊，必須進行種子處理，或播后蓋草保濕，播種方法同冬播，長期保持土壤濕潤，一般15天左右出苗。畝用種量2.5kg。2、繁殖12（2）育苗移栽：生長期1年。①育苗：桔梗育苗移栽一般在4～6月份均可，過早苗小影響苗的質(zhì)量，過晚苗大影響移栽，一般畝用種量10～12kg。具體方法：選擇土地既不能在高坡也不能在低洼田塊，最好選擇排水良好的田塊，土地要精耕細作，施足底肥，最好深翻一尺半以上，整好畦面，以利干旱時噴灌水用，而后將桔梗種子拌好細土均勻的撒播，上面稍作震壓，覆蓋雜草，保持土壤濕潤，一般10～12天即可出苗，待出齊苗后，選擇雨天除去覆蓋物，以利幼苗生長。（2）育苗移栽：生長期1年。具體方法：選擇土地既不能在高坡也13②移栽：生長期1年。于當年秋冬季至翌年春季萌芽前進行，選擇1年生直條桔梗苗，大、小分級，分別栽植。栽植時，在整好的栽植地上，按行距19cm開深25cm的溝，然后將桔梗苗呈75度角斜插溝內(nèi)，按株距6～8cm，覆土壓實，覆土應(yīng)略高于苗頭3cm為度。②移栽：生長期1年。于當年秋冬季至翌年143、田間管理（1）中耕除草、間苗

桔梗出苗后，進行除草，在苗長4片葉時，間去弱苗，6～8片葉時，按株距1～2寸定苗，在干濕適宜時進行淺松土，經(jīng)常保持地內(nèi)疏松，田間無雜草。（2）排水

桔梗種植密度高，怕積水。因此，在高溫多濕的梅雨季節(jié)，應(yīng)及時疏溝排水，防止積水爛根。（3）摘花

桔?；ㄆ陂L達4個月，開花對養(yǎng)分消耗相當大，又易萌發(fā)側(cè)枝。因此，摘花是提高桔梗產(chǎn)量的一項重要措施。3、田間管理154、病蟲害防治（1）根腐病危害根部

受害根部出現(xiàn)黑褐斑點，后期腐爛至全株枯死。防治方法：（1）用多菌靈1000倍液澆灌病區(qū)。（2）雨后注意排水，田間不宜過濕。（2）白粉病危害葉片發(fā)病時，病葉上布滿灰粉末，嚴重至全株枯萎。防治方法：發(fā)病初用波美0.3度石硫合劑或白粉凈500倍液噴施或用20%的粉銹寧粉1800倍液噴灑。4、病蟲害防治（2）白粉病危害葉片16三、組織培養(yǎng)方式外植體選擇愈傷組織誘導(dǎo)生根脫分化再分化移栽幼苗植株三、組織培養(yǎng)方式外植體選擇愈傷組織誘導(dǎo)生根脫分化再分化移栽幼17（一）培養(yǎng)基的成分及配方營養(yǎng)元素氮、磷、鉀、鈣、鎂、硫和氫、氧元素等，還有碳元素，微量元素如硼、錳、鋅、鑰、銅、鈷、氯、鐵等。培養(yǎng)基的配制過程中還應(yīng)使用氫氧化鉀（或氫氧化鈉）及鹽酸以調(diào)整pH值，即調(diào)整酸堿度。培養(yǎng)基用的水，選用重蒸餾水或蒸餾水，或無離子水。（一）培養(yǎng)基的成分及配方18

植物組織還需要一些維生素、氨基酸、肌醇等有機附加成分。為了調(diào)節(jié)控制植物組織的生長與分化、形態(tài)發(fā)生和適當?shù)钠渌磉^程，還經(jīng)常使用植物激素。維生素粉植物組織還需要一些維生素、氨基酸、肌醇等有機19（二）母液的配制與保存

培養(yǎng)基的各種組分通常根據(jù)其性質(zhì)，將它們配成較濃的母液貯存。母液配好后貼上標簽，貯存在冰箱里。（二）母液的配制與保存20

由于組織培養(yǎng)是全部在無菌條件中進行。故培養(yǎng)基及所用的器皿和用具均需滅菌。干熱法用于玻璃器皿和金屬用具，濕熱法用于培養(yǎng)基、玻璃器皿，化學消毒法化學消毒主要用70％酒精、漂白粉、次氯酸鈉、升汞和過氧化氫等。濕熱滅菌箱干熱滅菌箱由于組織培養(yǎng)是全部在無菌條件中進行。故培養(yǎng)基21（三）培養(yǎng)基的配制和滅菌

將大量和微量元素，根據(jù)母液濃度稀釋至配方所需的濃度，再加上附加物質(zhì)和蔗糖，待全部溶解后定容。隨后用KOH或NaOH及HCl調(diào)整到所需要的pH值。再加入瓊脂，加熱全熔后再分裝于培養(yǎng)瓶內(nèi)。（三）培養(yǎng)基的配制和滅菌22（四）外植體的選擇和處理1、葉片培養(yǎng)（1）選擇2年生桔梗植株，在花蕾形成前后分批采摘葉片，用飽和漂白精片水溶液消毒20分鐘，無菌水沖洗2-3次，接種于培養(yǎng)基上。（2）愈傷組織的培養(yǎng)。將花蕾形成后的葉片接種到培養(yǎng)基上，培養(yǎng)幾天后檢查（四）外植體的選擇和處理23（3）誘導(dǎo)苗的形成。將培養(yǎng)所得的芽或小苗，連同基部少許愈傷組織一起轉(zhuǎn)人新配制的培養(yǎng)基（成分同上），如果在基部或葉腹間有新的芽及小苗分化出來，然后將生根的小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。（3）誘導(dǎo)苗的形成。將培養(yǎng)所得的芽或小苗，連同基部少許愈傷組242、莖段的培養(yǎng)

將桔梗莖段用飽和漂白精片水溶液消毒后，接種在培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間。如果有無根的小苗長出來，然后將培養(yǎng)所得無根苗轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間形成根系，移栽。2、莖段的培養(yǎng)253、下胚軸培養(yǎng)

將桔梗種子用漂白精片水溶液消毒后，在R3培養(yǎng)基表面培養(yǎng)一段時間，然后將芽下胚軸切成2-3毫米長的小段，接種到培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織。待愈傷組織塊平均長到0.5-0.6厘米。將新鮮愈傷組織平均切成3毫米的小塊進行分化，然后轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根。3、下胚軸培養(yǎng)26（五）組培苗的移栽

把苗從瓶中取出后，用水將根部培養(yǎng)基清洗干凈。栽到育苗盤中，栽完后放到溫室里，再用薄膜或遮陽網(wǎng)蓋上，培養(yǎng)生長。

處理的第一周很關(guān)鍵，因為此時的苗非常細弱，從培養(yǎng)基到土壤中，環(huán)境條件變化大，光照、溫度和濕度都與此前有不同，植株由異養(yǎng)變成自養(yǎng)，根系不發(fā)達，稍不留心就可能造成死苗，此段時期的管理工作主要是遮陰或保暖，防曝曬，保持膜內(nèi)濕度適當。（五）組培苗的移栽27四、結(jié)果預(yù)測傳統(tǒng)種植需要1年左右的時間才能有收成，而用組織培養(yǎng)技術(shù)能讓桔梗在半年左右就能收獲，大大縮短育種周期。利用組織培養(yǎng)技術(shù)能得到高產(chǎn)量的植株。利用組織培養(yǎng)技術(shù)還可得到的脫毒的植株，具有較好的抗逆性、不易被病毒感染，能減少病蟲害防治所花的費用。組織培養(yǎng)前期工作量可能較大，但是種苗的成活率卻很高。四、結(jié)果預(yù)測傳統(tǒng)種植需要1年左右的時間才能有收成，而用組織培28謝謝觀看thankyou！謝謝觀看29利用組織培養(yǎng)技術(shù)快速提高

桔梗產(chǎn)量利用組織培養(yǎng)技術(shù)快速提高

桔梗產(chǎn)量30問題提出桔梗的生長周期長、易染病、生長條件要求較高、生產(chǎn)管理較為繁瑣，農(nóng)民種植該作物經(jīng)濟收益并不很高，而且還會花費很多人力、物力。就此，我們組提出設(shè)想——能否利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)快速大量繁殖具有較強抗逆性的桔梗？問題提出桔梗的生長周期長、易染病、生長條件要求較高、生產(chǎn)管理31目錄桔?；窘榻B傳統(tǒng)種植方式組織培養(yǎng)方式結(jié)果預(yù)測目錄桔梗基本介紹32一、桔梗的基本介紹1、在生物中的位置

桔梗(Platycodongrandiforus)

界：植物界

門：被子植物門

綱：雙子葉植物綱

目：菊目

科：桔?？?/p>

屬：桔梗屬一、桔梗的基本介紹1、在生物中的位置33

2、植物形態(tài)

多年生草本，高40－90厘米。植物體內(nèi)有乳汁，全株光滑無毛。根粗大肉質(zhì)，圓錐形或有分叉，外皮黃褐色。莖直立，有分枝。2、植物形態(tài)34

葉多為互生，少數(shù)對生，近無柄，葉片長卵形，邊緣有鋸齒；花大形，單生于莖頂或數(shù)朵成疏生的總狀花序；花冠鐘形，藍紫色或藍白色，裂片5。葉多為互生，少數(shù)對生，近無柄，葉片長卵形，邊緣有鋸齒35蒴果卵形，熟時頂端開裂，多年生草本植物。根可入藥，有宣肺、祛痰、排膿等功用。蒴果卵形，熟時頂端開裂，多年生草本植物。根可入藥，有宣肺、祛36

3、生長習性

喜溫和涼爽氣候。苗期怕強光直曬，須遮蔭，成株喜陽光怕積水。抗干旱，耐嚴寒，怕風害。適宜在土層深厚、排水良好、土質(zhì)疏松而含腐殖質(zhì)的砂質(zhì)壤土上栽培。3、生長習性374、應(yīng)用價值①作為藥材：桔梗入藥始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為臨床常用藥，味苦、辛，性平，歸肺經(jīng)。功能開宣肺氣、祛痰止咳、利咽散結(jié)、寬胸排膿。藥理實驗證實，桔梗有抗炎、鎮(zhèn)咳、祛痰、抗?jié)儭⒔笛獕?、擴張血管、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱、降血糖、抗膽堿、促進膽酸分泌、抗過敏等廣泛作用。常用以治療咳嗽痰多、胸悶不暢、咽痛、音啞、肺癰吐膿、瘡瘍膿成不潰等病癥。4、應(yīng)用價值38②作為食物：可作為一道菜肴。②作為食物：可作為一道菜肴。39二、傳統(tǒng)種植方式1、選擇土地

選擇陽光充足、土層深厚、排水良好的砂質(zhì)壤土地塊。選地后，每畝施土雜肥30kg，加過磷酸鈣和餅肥各50kg或磷酸二銨15kg，勻撒于地內(nèi)，深耕土壤35cm，整平耙細，做1m寬平畦，長短以地形而定。二、傳統(tǒng)種植方式1、選擇土地40

2、繁殖（1）種子繁殖：生長期2年。

生產(chǎn)中一般采用直播。

冬播或春播：冬播于11月份～次年1月份，春播于3～4月份。以冬播為好，一般采用撒播。播時將種子用潮細沙土拌勻撒于畦面上，用掃帚輕掃一遍，以不見種子為度，稍作震壓。翌年春，出苗早齊。春播，要使出苗整齊，必須進行種子處理，或播后蓋草保濕，播種方法同冬播，長期保持土壤濕潤，一般15天左右出苗。畝用種量2.5kg。2、繁殖41（2）育苗移栽：生長期1年。①育苗：桔梗育苗移栽一般在4～6月份均可，過早苗小影響苗的質(zhì)量，過晚苗大影響移栽，一般畝用種量10～12kg。具體方法：選擇土地既不能在高坡也不能在低洼田塊，最好選擇排水良好的田塊，土地要精耕細作，施足底肥，最好深翻一尺半以上，整好畦面，以利干旱時噴灌水用，而后將桔梗種子拌好細土均勻的撒播，上面稍作震壓，覆蓋雜草，保持土壤濕潤，一般10～12天即可出苗，待出齊苗后，選擇雨天除去覆蓋物，以利幼苗生長。（2）育苗移栽：生長期1年。具體方法：選擇土地既不能在高坡也42②移栽：生長期1年。于當年秋冬季至翌年春季萌芽前進行，選擇1年生直條桔梗苗，大、小分級，分別栽植。栽植時，在整好的栽植地上，按行距19cm開深25cm的溝，然后將桔梗苗呈75度角斜插溝內(nèi)，按株距6～8cm，覆土壓實，覆土應(yīng)略高于苗頭3cm為度。②移栽：生長期1年。于當年秋冬季至翌年433、田間管理（1）中耕除草、間苗

桔梗出苗后，進行除草，在苗長4片葉時，間去弱苗，6～8片葉時，按株距1～2寸定苗，在干濕適宜時進行淺松土，經(jīng)常保持地內(nèi)疏松，田間無雜草。（2）排水

桔梗種植密度高，怕積水。因此，在高溫多濕的梅雨季節(jié)，應(yīng)及時疏溝排水，防止積水爛根。（3）摘花

桔?；ㄆ陂L達4個月，開花對養(yǎng)分消耗相當大，又易萌發(fā)側(cè)枝。因此，摘花是提高桔梗產(chǎn)量的一項重要措施。3、田間管理444、病蟲害防治（1）根腐病危害根部

受害根部出現(xiàn)黑褐斑點，后期腐爛至全株枯死。防治方法：（1）用多菌靈1000倍液澆灌病區(qū)。（2）雨后注意排水，田間不宜過濕。（2）白粉病危害葉片發(fā)病時，病葉上布滿灰粉末，嚴重至全株枯萎。防治方法：發(fā)病初用波美0.3度石硫合劑或白粉凈500倍液噴施或用20%的粉銹寧粉1800倍液噴灑。4、病蟲害防治（2）白粉病危害葉片45三、組織培養(yǎng)方式外植體選擇愈傷組織誘導(dǎo)生根脫分化再分化移栽幼苗植株三、組織培養(yǎng)方式外植體選擇愈傷組織誘導(dǎo)生根脫分化再分化移栽幼46（一）培養(yǎng)基的成分及配方營養(yǎng)元素氮、磷、鉀、鈣、鎂、硫和氫、氧元素等，還有碳元素，微量元素如硼、錳、鋅、鑰、銅、鈷、氯、鐵等。培養(yǎng)基的配制過程中還應(yīng)使用氫氧化鉀（或氫氧化鈉）及鹽酸以調(diào)整pH值，即調(diào)整酸堿度。培養(yǎng)基用的水，選用重蒸餾水或蒸餾水，或無離子水。（一）培養(yǎng)基的成分及配方47

植物組織還需要一些維生素、氨基酸、肌醇等有機附加成分。為了調(diào)節(jié)控制植物組織的生長與分化、形態(tài)發(fā)生和適當?shù)钠渌磉^程，還經(jīng)常使用植物激素。維生素粉植物組織還需要一些維生素、氨基酸、肌醇等有機48（二）母液的配制與保存

培養(yǎng)基的各種組分通常根據(jù)其性質(zhì)，將它們配成較濃的母液貯存。母液配好后貼上標簽，貯存在冰箱里。（二）母液的配制與保存49

由于組織培養(yǎng)是全部在無菌條件中進行。故培養(yǎng)基及所用的器皿和用具均需滅菌。干熱法用于玻璃器皿和金屬用具，濕熱法用于培養(yǎng)基、玻璃器皿，化學消毒法化學消毒主要用70％酒精、漂白粉、次氯酸鈉、升汞和過氧化氫等。濕熱滅菌箱干熱滅菌箱由于組織培養(yǎng)是全部在無菌條件中進行。故培養(yǎng)基50（三）培養(yǎng)基的配制和滅菌

將大量和微量元素，根據(jù)母液濃度稀釋至配方所需的濃度，再加上附加物質(zhì)和蔗糖，待全部溶解后定容。隨后用KOH或NaOH及HCl調(diào)整到所需要的pH值。再加入瓊脂，加熱全熔后再分裝于培養(yǎng)瓶內(nèi)。（三）培養(yǎng)基的配制和滅菌51（四）外植體的選擇和處理1、葉片培養(yǎng)（1）選擇2年生桔梗植株，在花蕾形成前后分批采摘葉片，用飽和漂白精片水溶液消毒20分鐘，無菌水沖洗2-3次，接種于培養(yǎng)基上。（2）愈傷組織的培養(yǎng)。將花蕾形成后的葉片接種到培養(yǎng)基上，培養(yǎng)幾天后檢查（四）外植體的選擇和處理52（3）誘導(dǎo)苗的形成。將培養(yǎng)所得的芽或小苗，連同基部少許愈傷組織一起轉(zhuǎn)人新配制的培養(yǎng)基（成分同上），如果在基部或葉腹間有新的芽及小苗分化出來，然