發(fā)育毒性與致畸作用

關于發(fā)育毒性與致畸作用第一頁，共九十三頁，2022年，8月28日[主要內(nèi)容]1.發(fā)育毒性和致畸作用的基本概念2.發(fā)育毒性和致畸作用的特點和影響因素3.發(fā)育毒性的劑量-反應模式4.母體毒性與發(fā)育毒性5.發(fā)育毒性和致畸作用常用評價方法:動物發(fā)育毒性試驗、流行病學研究、替代試驗。

第二頁，共九十三頁，2022年，8月28日第一節(jié)概述

一、發(fā)育毒理學（developmentaltoxicology）：是毒理學的重要分支學科，是研究發(fā)育生物體在受精卵、妊娠期、出生后、直到性成熟的發(fā)育過程中，由于出生前暴露于環(huán)境有害因子導致的異常發(fā)育結局及有關的作用機制、發(fā)病原理、影響因素和毒物動力學等。第三頁，共九十三頁，2022年，8月28日畸胎學（古代）現(xiàn)代實驗畸胎學（19世紀）發(fā)育毒理學第四頁，共九十三頁，2022年，8月28日從畸胎學到發(fā)育毒理學

畸胎學(Teratology）作為一個描述性的科學在有文字之前就已經(jīng)存在了。最早可以追溯到6500D.B。雜交理論（Hybridetheory）認為畸形是人和動物雜交的結果并且這種雜交動物廣泛存在于神話傳說中，如人頭馬身怪物、人頭牛身等。第五頁，共九十三頁，2022年，8月28日現(xiàn)代實驗畸胎學：始于19世紀，研究者注意到作用時間在決定畸形類型方面比損傷的性質(zhì)更重要。

從畸胎學到發(fā)育毒理學物理（震動、倒置、針刺）化學因素雞蛋畸形小雞神經(jīng)管缺陷、無腦畸形、脊柱裂、獨眼畸形、心臟缺陷、位置顛倒、聯(lián)體雙胞胎等。第六頁，共九十三頁，2022年，8月28日致畸研究簡史第七頁，共九十三頁，2022年，8月28日

反應停（thalidomide）事件孕婦的理想選擇？1953年，聯(lián)邦德國一家名為ChemieGruenenthal的制藥公司研究人員發(fā)現(xiàn)，鎮(zhèn)靜安眠藥反應停對孕婦懷孕早期的妊娠嘔吐療效極佳。1957年10月1日該公司將反應停正式推向市場。第八頁，共九十三頁，2022年，8月28日

反應停便成了“孕婦的理想選擇”（當時的廣告用語），此藥在歐洲、亞洲、非洲、澳洲和南美洲被醫(yī)生量處方給孕婦以治妊娠嘔吐?？茖W家們在研制反應停時并沒有料到這種藥物會產(chǎn)生如此可怕的副作用。第九頁，共九十三頁，2022年，8月28日令人恐怖的副作用到了1960年，歐洲的醫(yī)生們開始發(fā)現(xiàn)，本地區(qū)畸形嬰兒的出生率明顯上升。這些嬰兒有的是四肢畸形（主要是雙上肢的短肢畸形），還有的是腭裂、盲兒、聾兒或內(nèi)臟畸形。第十頁，共九十三頁，2022年，8月28日西德的Lenz和澳大利亞的McBride兩人同時于1961年分別獨立確認反應停為誘發(fā)短肢畸形的病因。反應停被迫從市場撤回，動物模型復制成功。其致畸劑量為1mg/(kg.d)，只要末次月經(jīng)后6~8周內(nèi)口服200mg反應停便可引起嚴重的短肢畸形；服藥婦女還有流產(chǎn)、早產(chǎn)和死胎等發(fā)生。(孕婦的口服劑量是50-200mg/d)據(jù)推算，當時全世界有7000~10000畸形兒是由反應停所致。第十一頁，共九十三頁，2022年，8月28日服用過量維生素引起的畸形維生素A每日服用5萬單位（相當于濃縮A丸劑2丸、或濃縮魚肝油滴劑30滴），連續(xù)3個月，會使胎兒骨骼畸形、并指、腭裂、眼與腦畸形、腎及中樞神經(jīng)損害。第十二頁，共九十三頁，2022年，8月28日酒精胎兒綜合征第十三頁，共九十三頁，2022年，8月28日上述事件讓人們逐漸認識到生物、物理、化學因素和不良生活嗜好都可引起人類畸形；尤其是反應停事件的發(fā)生，大大推動了外源化學物致畸作用和發(fā)育毒性的研究及新藥發(fā)育毒理學研究和管理法規(guī)的建立。第十四頁，共九十三頁，2022年，8月28日悲劇帶來的福音！1966年美國食品與藥品管理局（FDA）提出三段生殖毒性試驗指南，其中包括對致畸等發(fā)育毒性的評價。1986年美國環(huán)保局（EPA）提出可疑發(fā)育毒物危險度評價指南，第一次明確提出要對化學物進行發(fā)育毒性評價。從20世紀70年代起，我國已開始了對藥品、農(nóng)藥、食品添加劑和環(huán)境污染物的致畸研究，并把致畸試驗、生殖毒性試驗列為新藥、農(nóng)藥、食品及首次進口化學品的安全性毒理學評價的重要組成部分。第十五頁，共九十三頁，2022年，8月28日

第二節(jié)發(fā)育毒性與致畸性一、基本概念

畸形（malformation）：指發(fā)育生物體解剖學上形態(tài)結構的缺陷。對外觀、生理功能和（或）壽命等可產(chǎn)生有害影響，可以存活也可能死亡。

致畸物（teratogen）:

致畸作用（teratogeniceffect）:致畸性（teratogenicity）:第十六頁，共九十三頁，2022年，8月28日第十七頁，共九十三頁，2022年，8月28日第十八頁，共九十三頁，2022年，8月28日第十九頁，共九十三頁，2022年，8月28日第二十頁，共九十三頁，2022年，8月28日第二十一頁，共九十三頁，2022年，8月28日是由遺傳和遺傳外因素控制的外觀變化，或由于分化改變而引起的差異。指在同一種屬的子代與親代之間或子代的個體之間，有時出現(xiàn)不完全相同的現(xiàn)象。例如肋骨或椎骨數(shù)目多于或少于正常，甚至某些內(nèi)臟易位都屬于變異。

2.變異第二十二頁，共九十三頁，2022年，8月28日一般認為變異不影響正常生理功能，更不危及生命。但是在動物致畸試驗中，如果某種變異出現(xiàn)較多，并呈一定劑量——效應關系，應該引起注意。2.變異第二十三頁，共九十三頁，2022年，8月28日廣義上包括孕體結構和功能方面的各種損害，狹義指孕體的死亡和生長發(fā)育遲緩，不包括結構畸形。區(qū)分胚體和胎體兩個階段；每個階段損害的主要特點。3.胚體-胎體毒性(embryo-fetaltoxicity)第二十四頁，共九十三頁，2022年，8月28日指出生前后接觸有害因素，子代個體發(fā)育為成體之前誘發(fā)的有害影響，主要表現(xiàn)為：發(fā)育生物體死亡生長改變結構異常功能缺陷

4.發(fā)育毒性（developmentaltoxicity）第二十五頁，共九十三頁，2022年，8月28日

發(fā)育毒性的主要表現(xiàn)發(fā)育生物體死亡：包括受精卵未發(fā)育即死亡；胚泡未著床即死亡（早早孕丟失）；著床后發(fā)育到某一階段死亡。早期死亡被吸收或自子宮排出（自然流產(chǎn)）；晚期死亡成為死胎。第二十六頁，共九十三頁，2022年，8月28日

發(fā)育毒性的主要表現(xiàn)生長改變（alteredgrowth）:生長遲緩，生長發(fā)育指標低于正常對照的均值2個標準差。結構異常（structuralabnormality）:指胎兒形態(tài)結構異常，即畸形。功能缺陷（functionaldeficiency）:即胎仔的生化、生理、代謝、免疫、神經(jīng)活動及行為的缺陷或異常。第二十七頁，共九十三頁，2022年，8月28日5.出生缺陷（birthdefect):指嬰兒出生前即已形成的發(fā)育障礙，包括畸形和功能缺陷。如先天性心臟病、唇腭裂、神經(jīng)管畸形、尿道下裂、隱睪癥等。6.不良妊娠結局（adversepregnancyoutcomes)：指妊娠后不能產(chǎn)生外觀和功能正常的子代。第二十八頁，共九十三頁，2022年，8月28日二、發(fā)育毒性的作用特點和影響因素與對其他器官系統(tǒng)的毒性作用相比，外源化學物的發(fā)育毒性作用有顯著的特點:致畸作用受到多種因素的影響，包括敏感期、遺傳類型、劑量、母體毒性等。第二十九頁，共九十三頁，2022年，8月28日（一）發(fā)育各階段發(fā)育毒性作用特點和致畸敏感期卵子受精后一直發(fā)育直至出生為止，都稱為孕體。從受精到新生兒的發(fā)育過程經(jīng)歷著:著床前期器官形成期

最容易引起畸形的階段胎兒期圍生期和出生后的發(fā)育期第三十頁，共九十三頁，2022年，8月28日1.著床前期又稱為分化前期，從受精時算起，到完成著床之前。該期限在人類為11-12天；嚙齒動物為前6天。這時受損傷的胚泡容易死亡，稱為著床前丟失。有些化學毒物作用于胚泡，使之死亡而丟失。第三十一頁，共九十三頁，2022年，8月28日著床前期發(fā)育毒性

一般認為，此時很少發(fā)生特異的致畸效應。也有著床前期接觸毒物導致胎兒畸形的例子。如：

甲基亞硝脲

子代神經(jīng)管缺陷小鼠妊娠第2.5天、3.5天和4.5天

腭

裂

第三十二頁，共九十三頁，2022年，8月28日孕體著床后直到硬腭閉合的一段時間。是發(fā)生結構畸形的關鍵期(criticalperiod)，也稱致畸敏感期。在此期間，大多數(shù)器官對致畸作用有特殊敏感期，即所謂的時間“靶窗”（targetwindow）。自受精之日計算：人是3-8周；大、小鼠是6~15天；家兔為6~18天。2.器官形成期第三十三頁，共九十三頁，2022年，8月28日第三十四頁，共九十三頁，2022年，8月28日同一劑量的一種致畸物在敏感期與胚胎接觸，可因胚胎所處發(fā)育階段不同而出現(xiàn)不同的畸形。Case1：大量維生素A在受精后第8天給予大鼠，主要出現(xiàn)骨骼畸形；在第12天給予，則誘發(fā)腭裂。case2：同樣劑量砷酸鈉在小鼠受精第7天和第9天分別給予，前者主要出現(xiàn)臍疝，后者主要為露腦。器官形成期發(fā)育毒性第三十五頁，共九十三頁，2022年，8月28日Rodentdevelopment第三十六頁，共九十三頁，2022年，8月28日在器官形成期，染毒除致畸外，也可能引起胚胎死亡。人和靈長類以流產(chǎn)告終，一胎多仔動物胚胎死亡后被吸收，稱為吸收胎。在這一時期，外源化學物表現(xiàn)出發(fā)育毒性，以結構畸形最突出，也可有胚胎死亡、生長遲緩。器官形成期發(fā)育毒性第三十七頁，共九十三頁，2022年，8月28日

器官形成結束后（人類從第56-58天起）到分娩的一段時間。

以組織分化，生長和生理學的成熟為基本特征，接觸發(fā)育毒物很可能對生長和功能成熟產(chǎn)生效應。

全身生長遲緩特異的功能障礙經(jīng)胎盤致癌死胎3.胎兒期第三十八頁，共九十三頁，2022年，8月28日發(fā)育毒性的主要表現(xiàn)：發(fā)育免疫毒性神經(jīng)行為發(fā)育異常兒童期腫瘤4.圍生期和出生后的發(fā)育期第三十九頁，共九十三頁，2022年，8月28日圍生期和出生后的發(fā)育毒性

發(fā)育免疫毒性二噁英、氯氰菊酯、乙醇等→影響出生后T細胞、B細胞和吞噬細胞的發(fā)育、分化、遷移、歸巢和功能。最終暫時或永久性損害子代的免疫系統(tǒng)。第四十頁，共九十三頁，2022年，8月28日圍生期和出生后的發(fā)育毒性發(fā)育神經(jīng)毒性表現(xiàn)為對感覺、運動、自主和認知的影響。妊娠期飲酒→乙醇綜合征胎兒（FAS）。父母親吸煙（煙堿）可改變胎兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)煙堿受體發(fā)育，增加出生后的學習、行為和注意力障礙。第四十一頁，共九十三頁，2022年，8月28日圍生期和出生后的發(fā)育毒性

兒童期腫瘤圍生期是一生中對致癌物最敏感的時期，許多兒童期高發(fā)腫瘤（如急性淋巴細胞性白血病、神經(jīng)母細胞瘤、骶骨前畸胎瘤等）都可能與出生前因素有關。因為這一時期細胞增殖快，藥物代謝酶的個體發(fā)生不全，免疫監(jiān)視功能低。第四十二頁，共九十三頁，2022年，8月28日

發(fā)育各階段發(fā)育毒性的重要表現(xiàn)

發(fā)育階段

重要表現(xiàn)

著床前期

胚胎死亡

器官形成期

畸形、胚胎死亡

胎兒期

生長遲緩、功能不全、胎兒死亡、經(jīng)胎盤致癌新生兒期生長遲緩、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能不全、兒童期腫瘤第四十三頁，共九十三頁，2022年，8月28日（二）發(fā)育毒性的劑量-反應模式除了在較高劑量幾乎全窩胚胎死亡外，正常胎、生長遲緩和結構畸形同時存在：這一類型較常見。在遠遠低于胚胎致死的劑量下即可出現(xiàn)致畸，甚至全窩致畸：這種模式表示受試物有高度致畸作用，較少見。只有生長遲緩和胚胎致死，但沒有畸形發(fā)生。第四十四頁，共九十三頁，2022年，8月28日發(fā)育毒性的閾值概念需要極大的樣本數(shù)，難以用實驗找出一個發(fā)生率很低的劑量-反應關系；多數(shù)發(fā)育毒性機制還不清楚，或支持或不支持閾值的存在；考慮個體的閾值和群體的閾值之間的區(qū)別。第四十五頁，共九十三頁，2022年，8月28日（三）發(fā)育毒性的物種差異Species

Humans 0.5mg/kg/day

Mouse 30 60X

Rat 50 100X

Dog 100 200X

Hamster 350 700XDose

(LETD)FoldDifferencefromHumansCross-SpeciesDifferencesin

Response

toThalidomide

第四十六頁，共九十三頁，2022年，8月28日三、母體毒性與發(fā)育毒性

母體毒性（maternal

toxicity）：指外源化學物在一定劑量下，對受孕母體產(chǎn)生的損害作用。具體表現(xiàn)包括體重減輕、出現(xiàn)某些臨床癥狀、直至死亡。（一）母體因素對發(fā)育毒性的影響

遺傳學、疾病、營養(yǎng)、應激、對胎盤的毒性

第四十七頁，共九十三頁，2022年，8月28日（二）母體毒性與胚胎毒性的關系1．具有發(fā)育毒性，但無母體毒性；2．同時出現(xiàn)發(fā)育毒性和母體毒性；3．具有母體毒性，但不具有致畸作用；4．在一定劑量下，既無母體毒性，也不表現(xiàn)發(fā)育毒性。第四十八頁，共九十三頁，2022年，8月28日

第四節(jié)

發(fā)育毒性和致畸作用試驗與評價

外源化學物發(fā)育毒性的評價動物發(fā)育毒性試驗人群流行病學調(diào)查發(fā)育毒性替代試驗第四十九頁，共九十三頁，2022年，8月28日動物發(fā)育毒性試驗優(yōu)點：

容易控制接觸條件、接觸動物數(shù)量、年齡、狀態(tài)及選擇檢測效應指標（終點）。甚至一些輕微的效應對研究人體影響很有意義。缺點：試驗結果外推到人存在不肯定性，預測對人的致畸性特異性不夠高；從較高劑量暴露結果外推到人（暴露劑量較低）有一定困難，況且人與人之間的個體差異要比動物的更大。第五十頁，共九十三頁，2022年，8月28日一、動物發(fā)育毒性試驗主要的試驗方案1.三段生殖毒性試驗主要用于評價藥物的生殖發(fā)育毒性。2.一代和多代生殖毒性試驗主要用于評價食品添加劑、農(nóng)藥及其他化學物的生殖發(fā)育毒性。3.改進的大鼠發(fā)育神經(jīng)毒性的試驗程序：1988年EPA發(fā)布。第五十一頁，共九十三頁，2022年，8月28日最佳方案是對成年動物進行染毒并試驗，包

括子代從受精卵到性成熟所有生長發(fā)育階段；觀察期應貫穿一個完整的生命周期。

設計的關鍵在于試驗對生殖和生長發(fā)育各階段的影響無間隔，并可直接或間接評價生殖循環(huán)的全過程。最常選用的方案為三段生殖毒性試驗。動物發(fā)育毒性試驗的基本要求第五十二頁，共九十三頁，2022年，8月28日為了進行生殖發(fā)育毒性實驗設計方便，將連續(xù)、完整的生殖發(fā)育過程細分為以下6個階段：交配性成熟第五十三頁，共九十三頁，2022年，8月28日三段生殖毒性實驗示意圖

I

生育力與早期胚胎發(fā)育毒性試驗;II胚體－胎體毒性試驗；III出生前和出生后發(fā)育毒性試驗。實線表示染毒期。處死懷孕前著床前器官形成期胎期新生兒期

開始懷孕著床分娩斷乳I4周15天處死♂♀IIIII第五十四頁，共九十三頁，2022年，8月28日生育力與早期胚胎發(fā)育毒性試驗流程圖第五十五頁，共九十三頁，2022年，8月28日胚胎-胎仔發(fā)育毒性試驗流程圖第五十六頁，共九十三頁，2022年，8月28日圍產(chǎn)期毒性試驗流程圖第五十七頁，共九十三頁，2022年，8月28日致畸試驗致畸作用是發(fā)育毒性中最重要、最容易觀察到一種表現(xiàn)，故化學物發(fā)育毒性的評定主要通過致畸試驗。在致畸試驗中除可觀察到出生幼仔畸形外，也可同

時發(fā)現(xiàn)生長發(fā)育遲緩和胚胎致死。Ⅱ段試驗是評定化學物是否具有致畸作用的標準方法。第五十八頁，共九十三頁，2022年，8月28日動物選擇:一般要求選用兩種哺乳動物嚙齒類：首先考慮大鼠，也可采用小鼠。非嚙齒類：多選家兔。致畸試驗第五十九頁，共九十三頁，2022年，8月28日劑量分組試驗劑量組最少應設三個劑量組：高、中、低。每組劑量成等比級數(shù)關系。另設對照組。原則上高劑量組可引起母體輕度中毒；中劑量組可允許母體出現(xiàn)某些極輕微中毒癥狀；最低劑量組不應觀察到任何中毒癥狀。致畸試驗第六十頁，共九十三頁，2022年，8月28日動物交配將性成熟雌雄動物按雌雄1：1或2：1比例同籠交配，每日通過陰栓或陰道涂片精子檢查，將已確定受孕雌鼠隨機分入各劑量組和對照組。出現(xiàn)陰栓或精子之日即為受孕第1天。致畸試驗第六十一頁，共九十三頁，2022年，8月28日動物染毒染毒時間：在器官形成期，即從著床期到硬腭閉合大、小鼠孕期的第6~15天兔孕期的6~18天。染毒方式與途徑應與人體實際接觸情況一致一般多經(jīng)口給予。致畸試驗第六十二頁，共九十三頁，2022年，8月28日染毒期間觀察妊娠動物的：體征和死亡（1次/日）;體重和體重改變（2次/日）；攝食量（1次/日）；其他毒性研究中已證實的重要靶效應。致畸試驗第六十三頁，共九十三頁，2022年，8月28日胎體檢查：自然分娩前1~2天將受孕動物處死：一般大鼠在受孕后第19~20天；小鼠第18~19天；家兔在第29天。致畸試驗第六十四頁，共九十三頁，2022年，8月28日剖腹處死時對所有妊娠動物進行尸體解剖和肉眼檢查。保存肉眼發(fā)現(xiàn)有改變的臟器，以便進行組織學評價。取出子宮及活產(chǎn)胎體，并另行記錄死胎和吸收胎?；钐ト〕龊?，先檢查性別，逐只稱重，并按窩計算平均體重，然后由下列幾方面進行畸形檢查：外觀畸形內(nèi)臟及軟組織畸形骨骼畸形?；螜z查只限活產(chǎn)胎體。致畸試驗第六十五頁，共九十三頁，2022年，8月28日以上檢查只能檢出結構與形態(tài)的畸形，不能檢出可能發(fā)生的生化功能或神經(jīng)行為缺陷。故為了全面了解可能存在的先天缺陷和生理功能異常，可將試驗雌鼠保留1/4左右待其自然分娩，飼養(yǎng)觀察出生幼仔以便檢查。致畸試驗第六十六頁，共九十三頁，2022年，8月28日結果評定：對母體毒性的評價指標：體重、體重變化、食物和水消耗量、死亡率、交配率、受孕率、臟器重及母體畸胎出現(xiàn)率等。致畸試驗第六十七頁，共九十三頁，2022年，8月28日結果評定：對孕體影響的評價指標：著床數(shù)、黃體數(shù)、平均胎體體重/窩、活胎數(shù)/窩、吸收胎數(shù)/窩、畸胎數(shù)/窩等。致畸試驗第六十八頁，共九十三頁，2022年，8月28日結果評價發(fā)育毒性的劑量-反應關系比較復雜。隨著劑量增加，先出現(xiàn)發(fā)育遲緩，然后胚胎-胎兒死亡和畸形發(fā)生，劑量很大時可致全部死亡。試驗最后應能得出受試物對母體和胚胎-胎兒各自的NOAEL和LOAEL。為了比較不同化學物的致畸強度，可計算致畸指數(shù)：致畸試驗第六十九頁，共九十三頁，2022年，8月28日致畸指數(shù)=

評定標準：

致畸指數(shù)在10以下不致畸；10-100為致畸；100以上為強致畸。第七十頁，共九十三頁，2022年，8月28日動物實驗結果外推到人的問題動物實驗中所見發(fā)育毒性的類型，不一定與人所產(chǎn)生的一樣；發(fā)育毒性的所有表現(xiàn)（死亡、生長遲緩、結構異常和功能缺陷），與人都是有關系的，不應僅注意結構異常；人在孕期中攝入量不太小的物質(zhì)，只要對實驗動物產(chǎn)生發(fā)育毒性，就表示對人是一種潛在危害。第七十一頁，共九十三頁，2022年，8月28日發(fā)育毒性和致畸作用試驗與評價（二）流行病學研究用流行病學的方法研究環(huán)境中的生殖毒物對人群生殖、發(fā)育影響的情況，包括性質(zhì)，程度以及原因。環(huán)境流行病學研究必須配合以環(huán)境化學毒物的檢測和人體生物標志物的檢測即分子流行病學研究。環(huán)境流行病學研究不是一般的流行病學調(diào)查，須科學設計、嚴格選擇對象和對照，觀察指標客觀量化。第七十二頁，共九十三頁，2022年，8月28日

(1)在某些罕見的病例中，可能不需要正式研究就可以識別異常出生結局的原因。

(2)對老污染物或老產(chǎn)品只能采用回顧性或橫斷面調(diào)查，這類調(diào)查較難獲得明確的結論。

需要足夠大的效應和研究人群。

在出生時異常結局的發(fā)生率不能反映異常的真實比率。3.病例報告和出生缺陷監(jiān)測登記對獲得人類的發(fā)育毒性證據(jù)是有用的。

流行病學研究第七十三頁，共九十三頁，2022年，8月28日確認人類致畸物的標準：一種特殊的缺陷或幾種缺陷并發(fā)（綜合征）的頻率突然增加。缺陷的增加與某種已知的環(huán)境改變（如一種新藥的廣泛使用）相關聯(lián)。在妊娠的特殊階段已知暴露于某種環(huán)境的改變，產(chǎn)生有特征性缺陷的綜合征。缺少妊娠時引起特征性缺陷嬰兒的其他共同的因子。第七十四頁，共九十三頁，2022年，8月28日致畸化學物的分類

國際生命科學研究所（InternationalLifeScienceInstitute,ILSI）：根據(jù)動物試驗中發(fā)育毒性的類型、嚴重程度和發(fā)生率，分為4級ICH人類用藥危險性分類：分為5類，供臨床醫(yī)師參考美國FDA：根據(jù)藥物對人孕體造成危害的證據(jù)，分為5類歐洲致畸物危險度分級分類標準，分5級WHO:全球化學品統(tǒng)一分類和標簽制度（GHS）致畸指數(shù)＝母體LD50/胎體最小致畸劑量。<10一般不致畸,10~100為致畸,>100為強致畸第七十五頁，共九十三頁，2022年，8月28日致畸化學物的分類（ILSI,1989）第七十六頁，共九十三頁，2022年，8月28日妊娠期用藥類型（ICH）

A、B、C2：僅在明顯需要時，妊娠期間可以使用C1：僅在如果證明可能效益與對胎兒的可能危險比較可取時，妊娠期間可以使用D：如果在妊娠期間使用，應通知病人對胎兒可能的危害X：在妊娠期間或可能妊娠的婦女中禁止使用第七十七頁，共九十三頁，2022年，8月28日發(fā)育毒性的初篩和替代試驗體外初篩試驗體內(nèi)初篩試驗第七十八頁，共九十三頁，2022年，8月28日體外初篩試驗隨著細胞、組織和器官培養(yǎng)技術的進步，發(fā)展了一些發(fā)育毒物體外初篩試驗，建立了全胚胎培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和細胞培養(yǎng)的體外試驗法。這些試驗方法的結果與沒有母體毒性的整體動物致畸試驗有較好的相關，且可嚴格控制實驗條件，故可用這些試驗作發(fā)育毒物的初篩，預測對整體動物的致畸性，發(fā)現(xiàn)致畸作用的靶器官，或闡明致畸機制等。第七十九頁，共九十三頁，2022年，8月28日常見的體外初篩試驗有：大鼠全胚胎培養(yǎng)器官培養(yǎng)細胞培養(yǎng)法體外初篩試驗第八十頁，共九十三頁，2022年，8月28日大鼠全胚胎培養(yǎng)自從１９７８年首次在體外進行嚙齒類動物全胚胎培養(yǎng)成功后，這一技術逐漸被應用于毒理學研究。用于著床后全胚胎培養(yǎng)的胚體正處于器官發(fā)生期，是對有毒外源物高度敏感的發(fā)育階段，能較好的反映化學物對胚體的影響。該方法在毒理學、藥理學等領域被廣泛應用，但本法技術難度相對較大，費用高。第八十一頁，共九十三頁，2022年，8月28日大鼠全胚胎培養(yǎng)具體試驗方法；從孕期9～10天大鼠子宮取出胚體，剝?nèi)eichert膜，放入培養(yǎng)液中加入外源化學物，在孵箱中通氣旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。觀察心臟搏動、卵黃囊直徑、胚芽、神經(jīng)管閉合、體節(jié)數(shù)目及體長等發(fā)育情況。根據(jù)Brow評分對器官形態(tài)分化做出評價?？珊Y選受試化學物的發(fā)育毒性、探討其劑量反應關系和作用機制。第八十二頁，共九十三頁，2022年，8月28日器官培養(yǎng)是將胚體或胚體組織、器官或器官的一部分在體外培養(yǎng)，觀察化學物對其發(fā)育過程的影響。常選用胚體肢芽、腭板、晶狀體、腎、肺、肝、牙等組織器官進行培養(yǎng)。其