葉綠素?zé)晒饧胺治黾夹g(shù)

關(guān)于葉綠素?zé)晒饧胺治黾夹g(shù)第一頁，共三十九頁，2022年，8月28日光合作用與葉綠素?zé)晒獾诙?，共三十九頁?022年，8月28日第三頁，共三十九頁，2022年，8月28日第四頁，共三十九頁，2022年，8月28日第五頁，共三十九頁，2022年，8月28日第六頁，共三十九頁，2022年，8月28日第七頁，共三十九頁，2022年，8月28日在光合膜上，有2％到10%的吸收光能以PSII熒光的形式釋放出來。而PSI發(fā)射的熒光量很小并且是恒定的，這里沒有進(jìn)行考慮。

活體狀態(tài)下，葉綠素?zé)晒鈳缀跞縼碓从赑SII的Chla（包括天線Chla），活體葉綠素?zé)晒馓峁┑目焖傩畔H僅反映了PSII對激發(fā)能的利用和耗散情況.光合作用過程的各個步驟密切偶聯(lián)，因此任何一步的變化都會影響到PSII從而引起熒光變化，也就是說通過葉綠素?zé)晒鈳缀蹩梢蕴綔y所有光合作用過程的變化.第八頁，共三十九頁，2022年，8月28日第九頁，共三十九頁，2022年，8月28日J(rèn)UNIORPAM（PulseAmplitudeModulatedFluorescence，PAM）基礎(chǔ)調(diào)制葉綠素?zé)晒鈨x第十頁，共三十九頁，2022年，8月28日第十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日J(rèn)UNIORPAM的主要操作過程暗適應(yīng)葉夾光適應(yīng)葉夾第十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日調(diào)制葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)作為測定植物光合作用最簡便有效的技術(shù)，在國際生物學(xué)界多個領(lǐng)域得到了非常廣泛的應(yīng)用，如研究植物脅迫、衰老、篩選突變體等。PAM技術(shù)與熒光淬滅的飽和脈沖分析結(jié)合是目前測定植物光合作用的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)第十三頁，共三十九頁，2022年，8月28日第十四頁，共三十九頁，2022年，8月28日葉綠素?zé)晒鈨x工作原理

第十五頁，共三十九頁，2022年，8月28日調(diào)制技術(shù)：用于激發(fā)熒光的測量光具有一定的調(diào)制（開/關(guān)）頻率，檢測器只記錄與測量光同頻的熒光，因此調(diào)制熒光儀允許測量所有生理狀態(tài)下的熒光，包括背景光很強(qiáng)時。飽和脈沖技術(shù)，打開一個持續(xù)時間很短（一般小于1s）的強(qiáng)光關(guān)閉所有的電子門（光合作用被暫時抑制），從而使葉綠素?zé)晒膺_(dá)到最大。飽和脈沖（SaturationPulse,SP）可被看作是光化光的一個特例。光化光越強(qiáng)，PSII釋放的電子越多，PQ處累積的電子越多，也就是說關(guān)閉態(tài)的電子門越多，F(xiàn)越高。當(dāng)光化光達(dá)到使所有的電子門都關(guān)閉（不能進(jìn)行光合作用）的強(qiáng)度時，就稱之為飽和脈沖。第十六頁，共三十九頁，2022年，8月28日

SaturationPulseMethodofQuenchingAnalysis

第十七頁，共三十九頁，2022年，8月28日J(rèn)UNIORPAM技術(shù)參數(shù)

測量光源：藍(lán)色LED，，標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度0.1μmolm-2s-1PAR。

光化光源：藍(lán)色LED，光強(qiáng)范圍0～1500μmolm-2s-1PAR（光纖與樣品間的距離為1mm時）。

飽和脈沖光源：藍(lán)色LED，最大飽和閃光強(qiáng)度3000

μmolm-2s-1PAR。

遠(yuǎn)紅光源：LED，730nm。

微光纖：長40cm，直徑1.5mm。

測量參數(shù)：Fo、Fm、Fv/Fm、Ft、Fm’、Fo’、qP、qN、NPQ和rETR等第十八頁，共三十九頁，2022年，8月28日暗適應(yīng)中熒光的增加由暗適應(yīng)和光適應(yīng)下葉片光化學(xué)淬滅由最大到最小引起的（Fm-Fo和Fm’-Fo’）。光適應(yīng)中熒光量的降低由不產(chǎn)生光化學(xué)淬滅和達(dá)到最大光化學(xué)淬滅（Fm-Fm’和Fo-Fo’）的光淬滅引起的。在飽和脈沖光發(fā)射之前，在Fm’和Fo’之間的區(qū)域內(nèi)，誘導(dǎo)曲線上熒光的水平為F’，它表示PSⅡ反應(yīng)中心的關(guān)閉程度。第十九頁，共三十九頁，2022年，8月28日

JUNIORPAM測量參數(shù)

相對熒光產(chǎn)量（RelativeFluorescenceYields）暗適應(yīng)下測定的參數(shù)Fm：關(guān)閉所有PSⅡ反應(yīng)中心的高光強(qiáng)脈沖激發(fā)的最大熒光值。Fm=Fo+Fv。Fo：固定熒光或初始熒光產(chǎn)量，也稱基礎(chǔ)熒光。代表不參與PSⅡ光化學(xué)反應(yīng)的光能輻射部分，是PSⅡ反應(yīng)中心處于完全開放時的熒光產(chǎn)量，它與葉綠素濃度有關(guān)。

Fv：可變熒光產(chǎn)量，代表可參與PSⅡ光化學(xué)反應(yīng)的光能輻射部分，反映了PSⅡ原初電子受體QA的還原情況。Fo維持PSⅡ反應(yīng)中心打開的低光強(qiáng)激發(fā)的最小熒光值。第二十頁，共三十九頁，2022年，8月28日光適應(yīng)下需要測定的參數(shù)Fo’：光處理中的最小熒光值：在<Fo’-Mode>中，F(xiàn)o’熒光在飽和脈沖之后發(fā)出，暗適應(yīng)是PSⅠ受到遠(yuǎn)紅光激發(fā)快速轉(zhuǎn)運光系統(tǒng)間的電子，因此開啟PSⅡ反應(yīng)中心。Fo’=1/(1/Fo-1/Fm+1/Fm’)Fm’：飽和光脈沖誘導(dǎo)期PSⅡ反應(yīng)中心暫時關(guān)閉時的最大熒光值。F’：F’值是光處理期間打飽和脈沖光之前熒光曲線上的點的取值。第二十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日第二十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日第二十三頁，共三十九頁，2022年，8月28日第二十四頁，共三十九頁，2022年，8月28日J(rèn)UNIORPAM測量參數(shù)

continued

熒光淬滅系數(shù)（FluorescenceQuenchingCoefficients）Fv/Fm和Y(Ⅱ)PSⅡ最大光化學(xué)消耗和有效光化學(xué)消耗Y(Ⅱ)衡量激發(fā)能用于光化學(xué)的量。qp和qL非光化學(xué)淬滅的參數(shù)這兩個參數(shù)都是衡量PSⅡ反應(yīng)中心那部分能量的。qp建立在單個的PSⅡ天線分子的概念上，而qL假設(shè)天線分子之間彼此聯(lián)系，更接近于葉片內(nèi)真實情況。這兩個參數(shù)的測定不需要使用暗適應(yīng)樣品進(jìn)行熒光測定，F(xiàn)o按照Oxborough和Baker(1997)方法經(jīng)過計算得到。qN和NPQ非光化學(xué)淬滅的參數(shù)這兩個參數(shù)都與類囊體基質(zhì)中依賴pH和玉米黃素產(chǎn)生過程的激發(fā)能的非光化學(xué)淬滅相關(guān)。與以前的熒光系數(shù)比較，qN和NPQ的計算總要測定樣品暗適應(yīng)和光適應(yīng)條件下的熒光。Y(NO)和Y(NPQ)參與非光化學(xué)淬滅的能量對于集合光合天線分子，Y（NPQ）可以定量激發(fā)能通過光保護(hù)機(jī)制散失的能量：其他非光化學(xué)能量稱為Y(NO)。最后，光化學(xué)和非光化學(xué)耗能之和為1：Y(Ⅱ)+Y(NPQ)+Y(NO)=1第二十五頁，共三十九頁，2022年，8月28日相對電子傳遞速率（RelativeElectronTransportRate,ETR）根據(jù)ETR=PAR?ETR-Factor?PPS2/PPPS?Y(Ⅱ)計算。光合激發(fā)輻射（Photosyntheticactiveradiation，PAR）為計算ETR，WinControl-3使用JUNIORPAM內(nèi)部脈沖激發(fā)輻射裝置得到PAR值。在其他光照條件下，不使用PAR帶入ETR計算。光曲線(LightCurve)測量程序<LightCurve>指暴露在光強(qiáng)持續(xù)增加的活化光下的測定程序。通常，每個光強(qiáng)的時間間隔對于光合反應(yīng)完全達(dá)到平衡太短。因此，將這中光曲線稱為“快速光曲線”（RapidLightCurves，RLC），它說明當(dāng)前光合的狀態(tài)，不能和經(jīng)典光合光相應(yīng)曲線相混。JUNIORPAM測量參數(shù)

continued

第二十六頁，共三十九頁，2022年，8月28日J(rèn)UNIORPAM測量參數(shù)

continued

第二十七頁，共三十九頁，2022年，8月28日第二十八頁，共三十九頁，2022年，8月28日第二十九頁，共三十九頁，2022年，8月28日第三十頁，共三十九頁，2022年，8月28日第三十一頁，共三十九頁，2022年，8月28日第三十二頁，共三十九頁，2022年，8月28日第三十三頁，共