（新高考）高考生物二輪精品專題十四生物技術(shù)與工程(解析版)

2017年高考“2017年高考“最后三十天”專題透析好教育云平臺--教育因你我而變好教育云平臺--教育因你我而變專題十四專題十四××生物技術(shù)與工程命題趨勢命題趨勢1．近五年的考題中，對微生物的分離和培養(yǎng)的考查尤為突出，側(cè)重考查微生物的培養(yǎng)、分離、計數(shù)、無菌技術(shù)等基本知識，對傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的發(fā)酵原理、制作流程等的考查頻度也在不斷提高。對于基因工程的考查頻度較高，側(cè)重考查基因工程的工具，操作程序與應(yīng)用等。植物細胞工程的應(yīng)用以及動物細胞工程技術(shù)中的核移植技術(shù)、單克隆抗體的制備也有所考查。胚胎移植的概念及移植胚胎的來源也會涉及。2．本專題以非選擇題的形式考查。常借助某一特定的微生物的分離和培養(yǎng)考查微生物的營養(yǎng)、接種方法等；對于生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用，常借助發(fā)酵實例考查，填充內(nèi)容多為教材中一些結(jié)論性語句等。植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物有效成分的提取的考查也多以教材基礎(chǔ)知識為主。常借助簡潔的文字材料或流程圖、結(jié)構(gòu)圖等考查有關(guān)基因工程、動物細胞工程的原理、技術(shù)手段等，尤為注重對教材中一些關(guān)鍵詞的填充及對結(jié)論性語句的準(zhǔn)確表述等。3．2021年備考時應(yīng)注意：(1)某種微生物數(shù)量的測定。(2)利用微生物進行發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用。(3)利用比較法歸納總結(jié)并掌握常見傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的原理、流程及影響因素等。(4)限制酶、DNA連接酶和載體的作用及PCR技術(shù)。(5)動物的細胞培養(yǎng)與體細胞克隆。(6)單克隆抗體制備過程。(7)圖解分析法理解胚胎發(fā)育的過程和胚胎移植的程序。考點清單考點清單考點1微生物的培養(yǎng)、分離與計數(shù)1．消毒和滅菌的比較2．平板劃線法每次灼燒的目的3．純化微生物的接種方法項目平板劃線法稀釋涂布平板法原理通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子胞群體，即菌落將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落優(yōu)點可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離可以計數(shù)，可以觀察菌落特征缺點不能計數(shù)吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延4．選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較考點2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1．比較果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作項目內(nèi)容果酒和果醋的制作腐乳的制作制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量作用菌種果酒:酵母菌果醋:醋酸菌毛霉乳酸菌原理(1)酵母菌在無氧條件下將葡萄糖氧化成乙醇(2)醋酸菌在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸毛霉將蛋白質(zhì)、脂肪分解成小分子有機物乳酸菌將糖轉(zhuǎn)化為乳酸原料選擇新鮮葡萄(或蘋果)豆腐大白菜、花椰菜等新鮮干凈的蔬菜發(fā)酵條件果酒:前期需氧，后期不需氧果醋:一直需氧一直需氧無氧發(fā)酵溫度果酒:18~25℃果醋:30~35℃15~18℃常溫實驗流程挑選葡萄↓榨汁↓↘酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵↓↓果酒果醋讓豆腐上長出毛霉↓加鹽腌制↓加鹵湯裝瓶↓密封腌制制泡菜：選材配制鹽水↓加調(diào)味料，裝壇↓發(fā)酵↓成品測亞硝酸鹽含量:配制溶液制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液→制備樣品處理液→比色考點3基因工程1．幾種獲取目的基因方法的比較2．比較DNA復(fù)制和PCR技術(shù)3．與DNA有關(guān)的酶的歸納與比較4．將目的基因?qū)胧荏w細胞的方法比較5．DNA的粗提取與鑒定的方法步驟考點4細胞工程1．植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵點(1)植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵①條件：離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素(生長素、細胞分裂素)等。②培養(yǎng)基狀態(tài)：固體培養(yǎng)基(脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基及生芽培養(yǎng)基)。③體內(nèi)細胞未表現(xiàn)全能性的原因：基因的表達具有選擇性。(2)植物激素的使用生長素/細胞分裂素的比值適中時，促進愈傷組織形成；比值高時，促進根分化、抑制芽形成；比值低時，促進芽分化、抑制根形成。(3)光照的使用脫分化階段不需要給予光照，再分化階段需要給予光照，以利于葉綠素的形成。2．植物體細胞雜交的關(guān)鍵點(1)酶解法——用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁。(2)促融劑——聚乙二醇。(3)雜種細胞的形成標(biāo)志——新細胞壁的形成。(4)培養(yǎng)為雜種植株的技術(shù)——植物組織培養(yǎng)。(5)培養(yǎng)成功的原理——細胞全能性。3．動物細胞培養(yǎng)的特殊條件(1)胰蛋白酶的使用：首先用胰蛋白酶處理動物的器官或組織，以制備單細胞懸液；培養(yǎng)過程中發(fā)生接觸抑制時，同樣要用胰蛋白酶使細胞分散開。(2)避免雜菌污染的措施：培養(yǎng)液及培養(yǎng)用具滅菌處理，加入一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液。(3)特殊的營養(yǎng)條件①液體培養(yǎng)基。②加入動物血清、血漿等。③通入氧氣以滿足代謝的需要。④通入二氧化碳以維持培養(yǎng)液的pH。4．克隆動物的技術(shù)手段動物細胞培養(yǎng)、核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。5．突破體細胞克隆(1)在細胞核移植技術(shù)中，注入去核卵母細胞中的不是供體細胞的細胞核，而是整個細胞，同時伴隨有兩細胞融合現(xiàn)象，這體現(xiàn)了細胞膜的結(jié)構(gòu)特點——具有一定的流動性。(2)該技術(shù)中形成的重組細胞最終發(fā)育成一個新個體，體現(xiàn)了動物細胞核的全能性而非動物細胞的全能性。(3)克隆屬于無性繁殖，產(chǎn)生的新個體的絕大多數(shù)性狀與供核親本相同。(4)利用核移植技術(shù)獲得的動物與供核動物性狀不完全相同：①克隆動物絕大部分DNA來自供體細胞的細胞核，但其細胞質(zhì)中的DNA主要來自去核的卵母細胞。②性狀是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果，供核動物生活的環(huán)境與克隆動物所生活的環(huán)境不完全相同，其性狀可能和供核動物也不完全相同。③克隆動物在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變，產(chǎn)生供核動物沒有的性狀?？键c5胚胎工程及生物技術(shù)的安全性與倫理問題1．胚胎工程的操作流程分析2．生物技術(shù)中的倫理問題(1)克隆人①分類a．生殖性克隆是指以繁殖個體為目的，即用于產(chǎn)生人類個體。b．治療性克隆是指利用核移植技術(shù)獲得克隆人胚胎，然后從胚胎中提取干細胞進行醫(yī)學(xué)研究，是利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織(皮膚、神經(jīng)或肌肉等)用于治療性移植。②中國政府態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆。(2)試管嬰兒與設(shè)計試管嬰兒①試管嬰兒：運用體外受精和胚胎移植技術(shù)繁殖個體，目的是解決不孕夫婦的生育問題。②設(shè)計試管嬰兒：體外受精獲得的胚胎在移植前進行遺傳學(xué)診斷，以便篩選出符合特定要求的胚胎。

精題集訓(xùn)精題集訓(xùn)（70分鐘）經(jīng)典訓(xùn)練題經(jīng)典訓(xùn)練題1．（2020年山東卷·12）我國的釀酒技術(shù)歷史悠久，古人在實際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗。《齊民要術(shù)》記載：將蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲發(fā)，如魚眼湯，凈淘米八斗，炊作飯，舒令極冷”。意思是將酒曲浸到活化，冒出魚眼大小的氣泡，把八斗米淘凈，蒸熟，攤開冷透。下列說法錯誤的是（）A．“浸曲發(fā)”過程中酒曲中的微生物代謝加快B．“魚眼湯”現(xiàn)象是微生物呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放形成的C．“凈淘米”是為消除雜菌對釀酒過程的影響而采取的主要措施D．“舒令極冷”的目的是防止蒸熟的米溫度過高導(dǎo)致酒曲中的微生物死亡【答案】C【解析】“浸曲發(fā)”是將酵母菌活化，可以使微生物代謝加快，A正確；“魚眼湯”是指酵母菌在呼吸過程中產(chǎn)生CO2，使溶液中出現(xiàn)氣泡，B正確；在做酒過程中，為消除雜菌的影響主要靠“炊作飯”，即蒸熟，C錯誤；“舒令極冷”是將米飯攤開冷透，防止溫度過高導(dǎo)致微生物（酵母菌死亡），D正確?！军c評】本題需要考生結(jié)合酵母菌的代謝類型進行分析，理解題干中的相關(guān)術(shù)語是解答本題的關(guān)鍵。2．（多選）（2020年江蘇卷·23）小鼠胚胎干細胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A．為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進雄鼠產(chǎn)生更多的精子B．細胞a和細胞b內(nèi)含有的核基因不同，所以全能性高低不同C．用胰蛋白酶將細胞a的膜白消化后可獲得分散的胚胎干細胞D．胚胎干細胞和誘導(dǎo)出的各種細胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)【答案】ABC【解析】為了獲得更多的囊胚，可以采用激素促進成熟雌性個體超數(shù)排卵，然后將卵細胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；細胞a和細胞b是由同一個受精卵經(jīng)過有絲分裂形成的，故核基因相同，B錯誤；運用細胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞，首先必須用胰蛋白酶處理內(nèi)細胞團，分解細胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個細胞，C錯誤；動物細胞培養(yǎng)時需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液的pH，D正確。故選ABC。3．（2020年全國統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)Ⅰ）·37）某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y。回答下列問題：（1）實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用_______________的方法進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是_______________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于______________培養(yǎng)基。（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2×107個/mL，若要在每個平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋________________倍。（3）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1點即可）。（4）若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟________________。（5）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即________________?！敬鸢浮浚?）高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇（2）104（3）S的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長（4）取淤泥加入無菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計數(shù)（5）水、碳源、氮源和無機鹽【解析】（1）常用高壓蒸汽滅菌法處理盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶，乙為固體培養(yǎng)基，故需要加入Y瓊脂；甲和乙培養(yǎng)基可以用于篩選能降解S的菌株，故均屬于選擇培養(yǎng)基。（2）若要在每個平板上涂布100μL稀釋液后的菌液，且每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則搖瓶M中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2×107÷1000×100÷200=1×104倍。（3）當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度后，可能會抑制菌株的生長，從而造成其對S的降解量下降。（4）要測定淤泥中能降解S的細菌的細胞數(shù)，可以取淤泥加無菌水制成菌懸液，稀釋涂布到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后進行計數(shù)。（5）甲和乙培養(yǎng)基均含有水、無機鹽、碳源、氮源?！军c評】培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，接種工具應(yīng)該進行灼燒滅菌，玻璃器皿等耐高溫的、需要干燥的物品，常采用干熱滅菌。4．（2020年全國統(tǒng)一高考生物試卷（新課標(biāo)Ⅱ）·37）研究人員從海底微生物中分離到一種在低溫下有催化活性的α-淀粉酶A3，并對其進行了研究?；卮鹣铝袉栴}：（1）在以淀粉為底物測定A3酶活性時，既可檢測淀粉的減少，檢測應(yīng)采用的試劑是_________，也可采用斐林試劑檢測________的增加。（2）在A3的分離過程中可采用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測其純度，通常會在凝膠中添加SDS，SDS的作用是___________________和___________________。（3）本實驗中，研究人員在確定A3的最適pH時使用了三種組分不同的緩沖系統(tǒng)，結(jié)果如圖所示。某同學(xué)據(jù)圖判斷，緩沖系統(tǒng)的組分對酶活性有影響，其判斷依據(jù)是______________。（4）在制備A3的固定化酶時，一般不宜采用包埋法，原因是___________________________（答出1點即可）?！敬鸢浮浚?）碘液還原糖（或答：葡萄糖）（2）消除蛋白質(zhì)所帶凈電荷對遷移率的影響使蛋白質(zhì)發(fā)生變性（3）在pH相同時，不同緩沖系統(tǒng)條件下所測得的相對酶活性不同（4）酶分子體積小，容易從包埋材料中漏出【解析】（1）測定酶活性時，可以通過檢測反應(yīng)物的減少或生成物的增加來反映酶活性，所以可以用碘液檢測淀粉的減少，也可用斐林試劑檢測還原糖（或葡萄糖）的增加。（2）鑒定蛋白質(zhì)純度常用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法，凝膠中加入SDS可以消除蛋白質(zhì)所帶凈電荷對遷移率的影響，并使蛋白質(zhì)發(fā)生變性。（3）分析題中曲線可知，在pH相同時，不同緩沖系統(tǒng)條件下所測得的相對酶活性不同，可推測緩沖系統(tǒng)的組分對酶活性有影響。（4）由于酶分子體積小，容易從包埋材料中漏出，所以固定化酶時，一般不采用包埋法。【點評】本題比較基礎(chǔ)，考查蛋白質(zhì)的提取和分離、固定化酶技術(shù)等相關(guān)知識，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗操作步驟等，考生在平時的學(xué)習(xí)過程中應(yīng)注意積累。5．（2020新課標(biāo)I卷．38）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程?；卮鹣铝袉栴}：（1）上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是_________________。（2）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：_________________。（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于_________________，使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的結(jié)果是_________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是_________________。（4）若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有________________（答出2點即可）?！敬鸢浮浚?）誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞（2）取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞，加入培養(yǎng)液制成單細胞懸液（3）選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性（4）將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)【解析】（1）實驗前給小鼠甲注射病毒A，是為了誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞。（2）取小鼠的脾臟，剪碎組織，用胰蛋白酶處理獲得單個細胞，加入培養(yǎng)液可以制成單細胞懸液。（3）圖中篩選1需要用到選擇培養(yǎng)基，只有雜交瘤細胞可以存活。篩選2是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，該過程要用到抗原抗體雜交，故篩選所依據(jù)的原理是抗原-抗體反應(yīng)具有特異性。（4）獲得能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞后，可以在體外培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，或在小鼠的腹腔中進行培養(yǎng)，使雜交瘤細胞大量增殖?！军c評】制備單克隆抗體的過程中，需要用到動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)，需要用到兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。6．（2020新課標(biāo)III卷．38）W是一種具有特定功能的人體蛋白質(zhì)。某研究小組擬仿照制備乳腺生物反應(yīng)器的研究思路，制備一種膀胱生物反應(yīng)器來獲得W，基本過程如圖所示。（1）步驟①中需要使用的工具酶有________________。步驟②和③所代表的操作分別是________________和________________。步驟④稱為________________。（2）與乳腺生物反應(yīng)器相比，用膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)W的優(yōu)勢在于不受轉(zhuǎn)基因動物的______________（答出2點即可）的限制。（3）一般來說，在同一動物個體中，乳腺上皮細胞與膀胱上皮細胞的細胞核中染色體DNA所含的遺傳信息________________（填相同或不同），原因是_________。（4）從上述流程可知，制備生物反應(yīng)器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技術(shù)有_____________（答出2點即可）。【答案】(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶顯微注射體外培養(yǎng)胚胎移植(2)性別、年齡(3)相同兩種上皮細胞都是體細胞，且來源于同一個受精卵(4)體外受精、胚胎移植【解析】（1）由分析可知，步驟①為構(gòu)建基因表達載體，需使用同種限制酶切割目的基因和運載體，再由DNA連接酶連接粘性末端，形成重組表達載體；步驟②為顯微注射；步驟③為體外培養(yǎng)；步驟④為胚胎移植。（2）與乳腺生物反應(yīng)器相比，用膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)W，可從動物一出生就收集產(chǎn)物,不受動物的性別和年齡的限制。（3）在同一動物個體中，乳腺上皮細胞與膀胱上皮細胞是由同一個受精卵有絲分裂產(chǎn)生的體細胞，其細胞核中染色體DNA所含的遺傳信息相同。（4）由分析可知，步驟③為體外培養(yǎng)，步驟④為胚胎移植，均屬于胚胎工程。【點評】本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的基本工具和操作步驟，掌握胚胎工程各項技術(shù)的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。高頻易錯題高頻易錯題1．下列有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作的敘述，正確的是（）A．參與果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵的微生物都含有線粒體B．果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制成果醋C．在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與D．制作腐乳時加鹽和白酒的作用主要是調(diào)節(jié)口感【答案】C【解析】參與果酒、果醋制作的微生物分別是酵母菌、醋酸(桿)菌，其中醋酸桿菌是原核生物，不含線粒體，A錯誤；果酒制成后除需轉(zhuǎn)移到溫度較高的環(huán)境外，還需醋酸桿菌且需在有氧環(huán)境中才可制成果醋，B錯誤；腐乳制作過程中發(fā)揮作用的微生物主要是毛霉，其分泌的蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，C正確；制作腐乳時加鹽和白酒的作用主要是抑制微生物生長，D錯誤。2．下圖裝置可用于生物技術(shù)實踐的相關(guān)實驗，下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．兩種裝置都可用于果酒的制作B．利用乙裝置制作葡萄酒時，葡萄汁裝入發(fā)酵瓶大約2/3的空間C．乙裝置的排氣口通過一個長而彎曲的膠管，可防止雜菌污染D．用甲裝置制作果酒時溫度應(yīng)控制在20℃左右，并不時地移開瓶蓋以排出氣體【答案】D【解析】兩種裝置都可用于果酒的制作，其中乙裝置可以先通入空氣后密封，A正確；利用乙裝置制作果酒時，瓶中的果汁不能裝滿，防止發(fā)酵液溢出，B正確；乙裝置的排氣口通過一個長而彎曲的膠管，排出果酒制備時產(chǎn)生的二氧化碳，而且能防止空氣中微生物的污染，C正確；用甲裝置制作果酒時溫度應(yīng)控制在18~25℃，同時由于發(fā)酵時產(chǎn)生二氧化碳，故需要擰松瓶蓋排氣，不能拿開瓶蓋，否則會造成雜菌污染，D錯誤。3．（多選）下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A．涂布接種時，需將涂布器沾酒精后在酒精燈外焰上引燃，冷卻后再使用B．純化培養(yǎng)時，培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)的搖床上培養(yǎng)C．分離計數(shù)時，可用稀釋涂布平板法對需計數(shù)的微生物進行分離D．觀察菌落時，應(yīng)將培養(yǎng)皿蓋拿掉以利于看清菌落的形態(tài)特征【答案】BD【解析】涂布接種時，將涂布器末端浸在盛有酒精的燒杯中，取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，A正確；純化培養(yǎng)時，不能用搖床培養(yǎng)，B錯誤；可以用稀釋涂布平板法對微生物進行分離計數(shù)，C正確；觀察菌落時，不能拿掉培養(yǎng)皿蓋，D錯誤。4．下列關(guān)于基因工程的基本操作程序的敘述，正確的是（）A．基因工程的第三步是目的基因與運載體的結(jié)合B．只要目的基因進入了受體細胞就能成功表達C．常用的運載體有質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒D．DNA連接酶的作用是連接兩個黏性末端的堿基【答案】C【解析】基因工程的第三步是將目的基因?qū)胧荏w細胞，A錯誤；目的基因進入受體細胞中，由于操作失誤和不可預(yù)測的干擾等，并不是所有受體細胞都能按照預(yù)先設(shè)計的方案進行重組和表達，真正能有效表達的只是一小部分，而且細胞中的基因也是選擇性表達的，B錯誤；常用的運載體有質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒，C正確；DNA連接酶的作用是使兩個DNA分子末端的脫氧核苷酸的脫氧核糖和磷酸基因間形成磷酸二酯鍵，D錯誤。5．土壤農(nóng)桿菌侵染植物細胞時，Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段能轉(zhuǎn)入植物的基因組，因此常利用農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒作為運載體進行轉(zhuǎn)基因操作。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．目的基因應(yīng)插入T-DNA片段外，以防止破壞T-DNAB．T-DNA片段有利于介導(dǎo)外源DNA整合到植物的染色體上C．Ti質(zhì)粒是一種環(huán)狀DNA分子，屬于細菌的擬核DNAD．用Ca2+處理農(nóng)桿菌，以利于其侵染植物細胞【答案】B【解析】在農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中，需要將目的基因插入T-DNA片段內(nèi)，A錯誤；T-DNA片段有利于介導(dǎo)外源DNA整合到植物的染色體上，B正確；Ti質(zhì)粒是一種環(huán)狀DNA分子，是存在于細菌細胞質(zhì)中的DNA，C錯誤；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中不需要用Ca2+處理農(nóng)桿菌，應(yīng)直接利用土壤農(nóng)桿菌感染植物細胞，D錯誤。6．（多選）為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C(圖1)，擬將其與質(zhì)粒(圖2)重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與實驗?zāi)康姆系氖牵ǎ〢．用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ和DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒B．在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細胞C．用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)爰毎鸇．用分子雜交的方法檢測C基因是否整合到菊花染色體上【答案】ACD【解析】據(jù)圖分析可知，在目的基因的兩端、啟動子和終止子之間都有限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ的切割位點，因此可以用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ切割目的基因和運載體，之后再用DNA連接酶連接形成基因表達載體，A正確；由圖2可知，標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因，應(yīng)該在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細胞，B錯誤；將目的基因?qū)氲街参锛毎?，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，可以將目的基因C導(dǎo)入農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA片段上，之后再用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)刖栈毎腥旧w的DNA上，C正確；要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)，D正確。7．胚胎移植是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過程。下圖為牛胚胎移植示意圖，據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（）A．同期發(fā)情處理與過程a使用的是同一種激素B．過程b的生理基礎(chǔ)是供體與受體生理環(huán)境相同C．過程c有手術(shù)法和非手術(shù)法兩種方法D．供體母牛、供體公牛和受體母牛均要求遺傳性能優(yōu)秀【答案】C【解析】使用促性腺激素對供體進行超數(shù)排卵處理，同期發(fā)情用孕激素進行處理，目的是使供體與受體處于相同或相近的生理狀態(tài)，A錯誤；過程b是早期胚胎的培養(yǎng)，其生理基礎(chǔ)是細胞的分裂和分化，B錯誤；過程c是胚胎移植，有手術(shù)法和非手術(shù)法兩種方法，C正確；供體母牛和供體公牛要求遺傳性能優(yōu)秀即可，受體母牛要選擇有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的個體，D錯誤。8．下列哪項不是人工授精和體外受精的區(qū)別?（）A．人工授精能更有效地發(fā)揮公畜的優(yōu)良特性B．體外受精能更有效地發(fā)揮母畜的繁殖潛能C．人工授精和體外受精的本質(zhì)不同D．人工授精的精卵結(jié)合在母畜體內(nèi)，而體外受精的這一過程在母畜體外【答案】C【解析】人工授精是用人工的方法，把公畜的精液注入母畜生殖道內(nèi)，使精卵結(jié)合；體外受精是將人工獲取的精子和卵子在體外完成受精。這兩者的本質(zhì)都是兩性生殖細胞的結(jié)合，只不過前者是在體內(nèi)完成的，后者是在體外完成的，C錯誤。9．（多選）CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的原理是通過設(shè)計向?qū)NA中的識別序列，引導(dǎo)核酸內(nèi)切酶Cas9到一個特定的基因位點進行切割(如圖)。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．向?qū)NA可在RNA聚合酶的催化下，以核糖核苷酸為原料合成B．向?qū)NA中的識別序列可與目標(biāo)DNA單鏈特定區(qū)域進行堿基互補配對C．Cas9蛋白的作用是破壞DNA特定位點脫氧核苷酸之間的氫鍵D．該技術(shù)由于存在脫靶等風(fēng)險，可能會帶來一系列安全性及倫理問題【答案】ABD【解析】向?qū)NA可通過轉(zhuǎn)錄形成，該過程需要RNA聚合酶的催化，A正確；結(jié)合題意，分析圖解可知，向?qū)NA中的識別序列可與目標(biāo)DNA單鏈特定區(qū)域進行堿基互補配對，B正確；Cas9蛋白是一種核酸內(nèi)切酶，作用部位是DNA分子中特定的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，C錯誤；該技術(shù)由于存在脫靶等風(fēng)險，可能會帶來一系列安全性及倫理問題，D正確。精準(zhǔn)預(yù)測題精準(zhǔn)預(yù)測題1．某同學(xué)在線提交了在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋的實驗報告，他的做法錯誤的是（）A．選擇新鮮的葡萄略泇沖洗，除去枝梗后榨汁B．將玻璃瓶用酒精消毒后，裝滿葡萄汁C．酒精發(fā)酵期間，根據(jù)發(fā)酵進程適時擰松瓶蓋放氣D．酒精發(fā)酵后去除瓶蓋，蓋一層紗布，再進行醋酸發(fā)酵【答案】B【解析】選擇新鮮的葡萄洗1到2次，除去枝梗后榨汁，A正確；葡萄汁不能裝滿，需裝至玻璃瓶的2/3空間，B錯誤；酒精發(fā)酵期間會產(chǎn)生二氧化碳，故需適時擰松瓶蓋，防止發(fā)酵瓶爆裂，C正確；醋酸菌是好氧菌，故醋酸發(fā)酵時應(yīng)去除瓶蓋，加一層紗布，D正確。2．植物組織培養(yǎng)過程中，無菌操作步驟至關(guān)重要。下列關(guān)于無菌操作的敘述，錯誤的是（）A．不耐高溫的植物激素需過濾除菌后才能添加到已滅菌的培養(yǎng)基中B．超凈工作臺可用紫外線消毒，鑷子、剪刀可灼燒滅菌C．植物材料用次氯酸鈉消毒后接種到培養(yǎng)基中D．玻璃培養(yǎng)皿常采用干熱滅菌法滅菌【答案】C【解析】對不耐高溫的植物激素除菌時無法用高壓蒸汽滅菌法，可以用濾膜過濾除菌，再添加到已滅菌的培養(yǎng)基中，A正確；接種室和超凈工作臺等表面消毒，可用紫外線進行消毒，鑷子、剪刀等金屬器具可灼燒滅菌，B正確；植物組織培養(yǎng)中的外植體用70%的酒精和氯化汞（或次氯酸鈉）進行消毒，外植體取出后，在無菌水中漂洗了消毒液后才能接種到培養(yǎng)基中，C錯誤；玻璃培養(yǎng)皿常采用干熱滅菌法滅菌，D正確。3．（多選）野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基中生長，突變菌株A和突變菌株B由于不能自己合成某些營養(yǎng)素，而不能在基本培養(yǎng)基上生長。科學(xué)工作者利用菌株A和菌株B進行了如下兩個實驗。實驗一：將菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培養(yǎng)基上，結(jié)果如圖1；實驗二：將菌株A和菌株B分別置于U形管的兩端，中間由過濾器隔開。加壓力或吸力后，培養(yǎng)液可以自由流通，但細菌細胞不能通過。經(jīng)幾小時培養(yǎng)后，將菌液A、B分別涂布于基本培養(yǎng)基上，結(jié)果如圖2。下列推測正確的是（）A．菌株之間可能發(fā)生類似有性雜交的現(xiàn)象B．不同菌株間接觸后才可能交換遺傳物質(zhì)C．菌株A和菌株B含有相同的突變基因D．混合培養(yǎng)的菌株都能在基本培養(yǎng)基上生長【答案】AB【解析】據(jù)題意分析，推測菌株之間可能發(fā)生類似有性雜交的現(xiàn)象，A正確；不同菌株間接觸后才可能交換遺傳物質(zhì)，導(dǎo)致變異，B正確；若菌株A和菌株B含有相同的突變基因，則兩者不可能產(chǎn)生可在基本培養(yǎng)基上生長的菌株，C錯誤；據(jù)圖可知，混合培養(yǎng)液中有可在基本培養(yǎng)基上生長的菌株，但不能說明混合培養(yǎng)的菌株都能在基本培養(yǎng)基上生長，D錯誤。4．中華鱘是地球上最古老的脊椎動物，被稱為“活化石”。研究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。以下說法錯誤的是（）A．該工程可以定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B．改造蛋白質(zhì)是通過改造基因結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)的C．改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘仍是同一物種D．改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)【答案】D【解析】蛋白質(zhì)工程可以定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)，A正確；改造蛋白質(zhì)是通過改造基因結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)的，B正確；改造后的中華鱘具有新的性狀，但其和現(xiàn)有中華鱘仍是同一物種，C正確；蛋白質(zhì)工程改造的是基因，可以遺傳給子代，因此改造后的中華鱘的后代也具有改造的蛋白質(zhì)，D錯誤。5．下圖為植物組織培養(yǎng)的流程圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是（）A．配制好的培養(yǎng)基在滅菌后要及時分裝避免冷卻凝固B．圖中三種培養(yǎng)基的差異主要表現(xiàn)在植物激素的含量方面C．整個培養(yǎng)過程中需要適宜的溫度和不間斷的人工光照D．長出叢芽和生根的過程中細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變【答案】A【解析】配制好的培養(yǎng)基在滅菌后要及時分裝避免冷卻凝固，A正確；圖中三種培養(yǎng)基的差異主要表現(xiàn)在植物激素的種類和含量方面，B錯誤；脫分化過程要避光處理，C錯誤；長出叢芽和生根的過程是細胞分裂和分化的過程，遺傳物質(zhì)不會發(fā)生改變，D錯誤。6．生物技術(shù)發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。如果世界上最后一匹野馬剛死亡，以下提供的“復(fù)生”野馬個體的方法中能夠成功的是（）A．將野馬的體細胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個體B．將野馬的體細胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)技術(shù)培育成新個體C．取出野馬的體細胞核移植到母家馬的去核卵細胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個體D．將野馬基因?qū)爰荫R的受精卵中，培育成新個體【答案】C【解析】動物細胞的全能性受到限制，因此直接用動物細胞培養(yǎng)不能培育出新個體，A錯誤；動物細胞融合技術(shù)還不能形成新的動物個體，而且細胞融合后會導(dǎo)致遺傳物質(zhì)加倍，B錯誤；取出野馬的體細胞核移植到母家馬的去核卵細胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個體，可以克隆形成野馬，C正確；將野馬的基因?qū)爰荫R的受精卵中，屬于基因工程，可培育出具有新性狀的家馬，D錯誤。7．（多選）下圖是利用生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩種途徑，圖中數(shù)字代表過程。則下列相關(guān)說法錯誤的是（）A．過程①可用滅活的病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，誘導(dǎo)細胞融合B．過程②是指X細胞在選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得雜交瘤細胞的過程C．圖中獲得V1基因的方法是從基因組文庫中獲取D．上圖制備抗體過程中運用了動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)【答案】C【解析】過程①為動物細胞融合，可用滅活的病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合，A正確；過程②是指X細胞在選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，獲得雜交瘤細胞Y的過程，B正確；圖中獲得V1基因的方法是反轉(zhuǎn)錄法，C錯誤；圖中制備抗體的過程中，運用了動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，D正確。8．生物技術(shù)的安全性和倫理問題是社會關(guān)注的熱點。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．應(yīng)嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，避免產(chǎn)生對人類有害的物質(zhì)B．當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，但不反對治療性克隆C．反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒D．生物武器用微生物、毒素、干擾素及重組致病菌等來形成殺傷力【答案】D【解析】培育轉(zhuǎn)基因植物時，要根據(jù)目的基因的產(chǎn)物是否對人類有害，來確定該目的基因能否用于轉(zhuǎn)基因植物的培育，A正確；克隆人會給社會帶來倫理上的問題，所以當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，治療性克隆對于一些重大疾病的治療具有積極的意義，所以并不反對治療性克隆，B正確；科學(xué)地設(shè)計試管嬰兒對于治療一些難治之癥具有積極的意義，但有人卻濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒，所以設(shè)計試管嬰兒遭到反對，C正確；干擾素并不能用于制造生物武器，多用于治療一些病毒性疾病，D錯誤。9．下圖是利用二倍體小鼠所做的實驗，下列有關(guān)分析不合理的是（）A．過程①需運用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)B．圖中囊胚細胞的基因型不都相同C．代孕母鼠對植入的胚胎基本無免疫排斥D．嵌合體幼鼠是四倍體【答案】D【解析】過程①為動物細胞培養(yǎng)(早期胚胎培養(yǎng))，A正確；圖中囊胚細胞的基因來自兩種小鼠，故有些細胞基因型不相同，B正確；受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能，C正確；嵌合體幼鼠染色體并未加倍，故是二倍體，D錯誤。10．豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并在32h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}：（1）該實驗的自變量是_____、_____。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是_____。（3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是_____。（4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開____，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開____。（5）泡菜的制作也涉及微生物的發(fā)酵，制作泡菜所用到的菌種是_____，與釀造果酒所需菌種相比，該菌種在細胞結(jié)構(gòu)上的主要特點是_____。【答案】（1）菌種發(fā)酵時間（2）好氧菌（3）延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間（4）氨基酸和肽脂肪酸和甘油（5）乳酸菌沒有以核膜為界限的細胞核【解析】（1）根據(jù)題干信息可知，該實驗的自變量是不同的菌種和發(fā)酵時間。（2）發(fā)酵容器內(nèi)上層為有氧環(huán)境，底層為無氧環(huán)境，若發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，則說明該發(fā)酵菌是好氧（需氧）微生物。（3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，可在原操作的基礎(chǔ)上，繼續(xù)延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳的發(fā)酵時間。（4）從大豆到豆豉的過程中，蛋白質(zhì)被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸，脂肪被脂肪酶分解成甘油和脂肪酸。（5）制作泡菜所用的菌種是乳酸菌，釀酒所需的菌種是酵母菌，乳酸菌為原核生物，酵母菌為真核生物，因此乳酸菌在結(jié)構(gòu)上的主要特點是無以核膜為界限的細胞核?！军c評】本題以傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)為背景，考查考生獲取信息和解決問題的能力。通過對比實驗探究不同菌種的最佳發(fā)酵時間，一般情況下，隨著發(fā)酵時間的延長，發(fā)酵效果會先升高，到達最高點之后隨發(fā)酵時間延長發(fā)酵效果下降。11．產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關(guān)研究。請回答下列問題：（1）常規(guī)微生物實驗中，下列物品及其滅菌方法錯誤的是__________（填編號）。編號①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧（2）稱取1.0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)__________后，獲得細胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌__________個。（3）為了進一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進行__________育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以__________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，按照菌落直徑大小進行初篩，選擇直徑__________的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。（4）在處理含油廢水的同時，可獲得單細胞蛋白，實現(xiàn)污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關(guān)性能，進行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株__________進行后續(xù)相關(guān)研究，理由是__________?！敬鸢浮浚?）④（2）梯度稀釋4.6×105（或460000）（3）誘變脂肪（或油脂）較大（4）B該菌株增殖速度快，單細胞蛋白產(chǎn)量高；降解脂肪能力強，凈化效果好【解析】（1）培養(yǎng)基一般進行高壓蒸汽滅菌，接種環(huán)可用火焰灼燒滅菌，培養(yǎng)皿一般通過干熱滅菌，涂布器應(yīng)該用酒精引燃滅菌；故①②③正確，錯誤的是④。（2）稀釋涂布平板法是將樣品進行一系列梯度稀釋后，獲得細胞密度不同的菌懸液，然后涂布到平板上。根據(jù)題意，1.0g土壤樣品轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)系列梯度稀釋后，分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，則稀釋的倍數(shù)為1000倍，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后長出了46個酵母菌落，則總的稀釋倍數(shù)為10000倍，故每克土壤中含酵母菌數(shù)為46×10000=4.6×105個。（3）根據(jù)題意，欲提高酵母菌產(chǎn)酶能力，可對分離得到的產(chǎn)脂肪酶酵母菌菌株進行射線輻射，該育種方式為誘變育種。為了能篩選出符合要求的產(chǎn)脂肪酶酵母菌突變株，可配制以脂肪為唯一碳源的培養(yǎng)基，將輻射處理的酵母菌涂布在該固體培養(yǎng)基上，形成單菌落；產(chǎn)脂肪酶能力越強的酵母菌，分解利用脂肪的能力越強，菌落生長越好，一段時間后，按照菌落直徑大小進行初篩，選取直徑較大的菌落即可。（4）據(jù)題圖分析可知，相同時間內(nèi)，菌株B的細胞密度高于菌株A，而菌株B的脂肪剩余量低于菌株A的脂肪剩余量，故進行相關(guān)研究可選擇菌株B，原因是菌株B增殖速度快，單細胞蛋白的產(chǎn)量也高，同時降解脂肪的能力強，凈化效果更好?！军c評】本題以微生物為背景，主要考查微生物的分離篩選、滅菌和計數(shù)等知識，意在強化考生對相關(guān)內(nèi)容的識記與理解能力，重在考查基本原理等基礎(chǔ)知識，難度不大。12．大米鐵含量極低，科研人員通過基因工程、植物組織培養(yǎng)等現(xiàn)代生物技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60％的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)。下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖，其中①—⑥為過程，ECORⅠ、HindⅢ、BamHⅠ為限制酶。（1）該轉(zhuǎn)基因水稻培育過程中選取的目的基因是_________________。PCR是獲取大量目的基因的一種方法，PCR反應(yīng)體系的成分中有兩種引物，在復(fù)性時引物會結(jié)合到互補DNA鏈，對兩種引物的設(shè)計要求之一是：兩種引物之間不能堿基互補配對，試分析原因__________________________________；PCR反應(yīng)體系的成分中能夠決定復(fù)制特定DNA片段的是_____________（填“模板”、“引物”或“taq酶”）；從引物設(shè)計的角度考慮，如果目的基因兩側(cè)沒有酶切位點，用PCR技術(shù)_____________（“可以”或“不可以”）為目的基因設(shè)置酶切位點。（2）完成圖中①過程需選用___________________________限制酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA。為了篩檢成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，1號培養(yǎng)基需要加入_______________。誘導(dǎo)組織細胞失去分化的是________________號培養(yǎng)基。（3）圖中④⑤⑥過程，屬于__________________技術(shù)，該技術(shù)依據(jù)的基本原理（理論基礎(chǔ)）是________________________________?！敬鸢浮浚?）鐵合蛋白基因防止引物之間結(jié)合形成雙鏈，降低引物與DNA模板鏈結(jié)合的效率引物可以（2）BamHⅠ和HindⅢ潮霉素2（3）植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性【解析】（1）據(jù)圖分析，目的基因為鐵合蛋白基因。兩種引物之間若能堿基互補配對，會導(dǎo)致引物結(jié)合形成雙鏈，降低引物與DNA模板鏈結(jié)合的效率。PCR過程中，根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列來合成引物，所以決定復(fù)制特定DNA片段的是引物。獲得目的基因后一般需要將目的基因連接到質(zhì)粒載體上，在引物上加酶切位點可以使后續(xù)的連接過程簡單、可控，因此如果目的基因兩側(cè)沒有酶切位點，用PCR技術(shù)可以為目的基因設(shè)置酶切位點。（2）圖中①過程為基因表達載體的構(gòu)建。若選用ECORⅠ，會破壞目的基因；由于目的基因兩側(cè)的酶切位點被HindⅢ、BamHⅠ識別，且質(zhì)粒中也存在同樣的酶切位點，則所