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單選題}20分雙選題名詞解釋5×3分英+漢簡(jiǎn)答題3×5分論述題1(2)×10(+)分細(xì)胞與大分子分泌蛋白的糖基化作用發(fā)生在(C)A線粒體 B過(guò)氧化物酶體 C內(nèi)質(zhì)網(wǎng) D核以下哪一個(gè)是核蛋白(B)A角蛋白 B染色質(zhì) C組蛋白 D蛋白聚糖以下哪一個(gè)不是多糖(D)A幾丁質(zhì) B支鏈淀粉 C黏多糖 D甘油跨膜蛋白(B)A將兩個(gè)脂雙層連接一起 B有胞內(nèi)和胞外結(jié)構(gòu)域C完全包埋在膜內(nèi) D很容易從膜上去除下來(lái)名詞解釋?zhuān)何Ⅲw、核蛋白。微體或cytosome)是一些由單層膜包圍的小體。它的大小、形狀與溶酶體(nuclear簡(jiǎn)答:真核與原核生物核糖體的主要區(qū)別?、5SrRNA31種蛋白質(zhì))30S(16SrRNA21種蛋白質(zhì))兩個(gè)亞基組成;而真核生物的核糖體體積較大,沉降系數(shù)是80S3.9~4.5MDa60S(28S5.8SrRNA5SrRNA33種蛋白質(zhì)rRNA49種蛋白質(zhì)兩個(gè)亞基組成。典型的原核生物大腸桿菌核糖體是由一個(gè)50S30S小亞基組成的。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)以下哪一個(gè)是亞氨基酸(A)A脯氨酸 B羥賴(lài)氨酸 C色氨酸 D組氨酸以下哪一個(gè)不是蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)(C)Aα-螺旋 B三股螺旋 C雙螺旋 Dβ-折疊片在等電聚焦電泳中蛋白質(zhì)按(A)分離ApH梯度 B鹽梯度 C密度梯度 D溫度梯度Edman降解法(D)對(duì)多肽進(jìn)行測(cè)序A用一段cDNA測(cè)序B按照質(zhì)量 C從C端到N端 D從N端到C端名詞解釋?zhuān)嚎乖瓫Q定部位或表位抗原表位(antigenic是決定抗原性的特殊化學(xué)基團(tuán),是由5~8個(gè)氨他方式處理后才暴露出來(lái)。簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)的功能蛋白質(zhì)具有廣泛的功能:酶可催化絕大多數(shù)生化反應(yīng),底物的結(jié)合取決于特異的非共價(jià)相互作用;當(dāng)與配體結(jié)合時(shí),膜受體蛋白將信號(hào)傳入細(xì)胞內(nèi)部;轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存,如血紅蛋白在血液中轉(zhuǎn)運(yùn)氧、鐵蛋白在肝臟內(nèi)儲(chǔ)存鐵;膠原和角蛋白是重要的結(jié)構(gòu)蛋白,肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白構(gòu)成有收縮力的肌肉纖維;酪蛋白和卵清蛋白是為生長(zhǎng)提供氨基酸的營(yíng)養(yǎng)蛋白;免疫系統(tǒng)依賴(lài)抗體蛋白抵御感染;調(diào)節(jié)蛋白(如轉(zhuǎn)錄因子)具有結(jié)合并調(diào)節(jié)其他分子(如的功能。在蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)中,維持空間構(gòu)象穩(wěn)定的力都有哪些?蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)是具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的各條多肽鏈之間,相互作用核酸的性質(zhì)DNARNA中的哪一片段?(A)A5’-AGUCUGACU-3’ B5’-UGTCTGUTC-3’C5’-UCAGUCGUA-3’ D5’-AGUCAGACU-3’A-DNA的正確描述(C)A是右手反向平行雙螺旋,每圈10個(gè)堿基,堿基平面與螺旋軸垂直。B是左手反向平行雙螺旋,每圈12個(gè)堿基,有交替的嘌呤-嘧啶序列形成。C是右手反向平行雙螺旋,每圈11個(gè)堿基,堿基的朝向與螺旋軸有關(guān)。D是球狀結(jié)構(gòu),由單鏈核酸中形成的短的分子內(nèi)螺旋構(gòu)成。DNA變性涉及(B)A斷裂為短的雙鏈片段 B分開(kāi)成為單鏈CDNA骨架分解 D堿基從戊-磷酸骨架上分離下來(lái)260nm波長(zhǎng)下具有最大單位質(zhì)量吸收(B)A雙鏈DNA B單核苷酸 CRNA D蛋白質(zhì)DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶(C)A使連接數(shù)改±2 B需要TAPC將DNA雙螺旋中的一條鏈打斷 D是抗生素類(lèi)藥物的靶向DNA、、Z型雙螺旋結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。B-DNA。B-DNA是DNA在生理狀態(tài)下的構(gòu)DNAB-DNA的構(gòu)DNAA-DNAA-DNADNA的脫水構(gòu)A-DNADNA并不ADNA-RNARNA-RNAA-DNADNADNAG-C,并且在Z-DNADNA的主要形式。A-DNA、B-DNA和Z-DNA的主要結(jié)構(gòu)特點(diǎn)螺旋方向A-DNA右手B-DNA右手Z-DNA左手直徑約2.6nm約2.0nm約1.8nm每一轉(zhuǎn)的堿基對(duì)數(shù)111012(6個(gè)二聚體)每對(duì)堿基旋轉(zhuǎn)角度33°36°°每個(gè)二聚體)每對(duì)堿基沿螺旋軸上升的距離0.26nm0.34nm0.37nm螺距2.8nm3.4nm4.5nm堿基對(duì)相對(duì)中心軸的傾斜角度20°6°7°大溝窄,深寬,深平坦小溝寬,淺窄,深窄,深糖苷鍵antiantianti(嘧啶)syn(嘌呤)RANDNA相比為何極不穩(wěn)定?因?yàn)镽NA是單鏈結(jié)構(gòu),而DNA是雙鏈雙螺旋結(jié)構(gòu),有氫鍵存在,分子內(nèi)作用力較強(qiáng),所以更穩(wěn)定。其次RNA不穩(wěn)定的主要原因是細(xì)胞及外界環(huán)境中有很多RNA酶,RNA極容易被降解掉。原核與真核生物的染色體結(jié)構(gòu)以下哪一個(gè)是大腸桿菌和真核生物染色體的共同之處(D)ADNA是環(huán)狀的 BDNA被包裝成核小體 CDNA位于核中 DDNA是負(fù)超螺旋166bpDNAH1組成的復(fù)合體叫做(D)A核小體核心 B螺線管 C30nm纖維 D核小體分裂間期染色體轉(zhuǎn)錄發(fā)生在什么區(qū)域(C)A端粒 B著絲粒 C常染色質(zhì) D異染色質(zhì)CpG島和甲基化的陳述那個(gè)是錯(cuò)誤的(A)ACpG島對(duì)DNaseⅠ有部分抗性BCpG甲基化是真核生物對(duì)CpG突變?yōu)門(mén)pG的反應(yīng)CCpG島出現(xiàn)在活性基因啟動(dòng)子附近DCpG甲基化伴隨著染色質(zhì)失活DNA(C)AAlu元件 B組蛋白基因庫(kù) CDNA微衛(wèi)星 D散在重復(fù)DNADNA、RNA編輯、持家基因、染色小體、核小體核心顆粒。端粒:是形成真核生物線性DNA分子末端的特化的序列,由數(shù)以百計(jì)的短重復(fù)序列構(gòu)成,這些序列是端粒酶以獨(dú)立于正常DNA復(fù)制的機(jī)制合成的。它能保護(hù)染色體末端免遭降解。衛(wèi)星:是一類(lèi)高度重復(fù)序列DNA離心后,不同層面的DNA形成了不同的條帶。根DNADNA2bp20~30bp的極短序列,以數(shù)千個(gè)拷貝的串聯(lián)方式排列。RNAmRNAmRNA分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置換,基因轉(zhuǎn)錄物的序列不與基因編碼序列互補(bǔ)譯生成的蛋白質(zhì)的氨基酸組成,不同于基因序列中的編碼信息的現(xiàn)象?;?。H1DNA166bpDNAH1分子在進(jìn)口處將1構(gòu)成染色小體。146bpDNAH2AH2BH3H4組蛋白八聚體組成。原核生物與真核生物基因表達(dá)主要區(qū)別?原核生物真核生物RNA聚合酶RNA聚合酶IRNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子有有終止子有無(wú)前mRNA無(wú)有編碼蛋白質(zhì)單/多順?lè)醋訂雾樂(lè)醋觤RNA兩端5’端磷酸3’端羥基5’甲基帽3’polyA尾RBS有無(wú)轉(zhuǎn)錄、翻譯同時(shí)進(jìn)行在核內(nèi)轉(zhuǎn)錄,胞質(zhì)內(nèi)翻譯EDNA復(fù)制一個(gè)典型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中復(fù)制子的數(shù)目是(D)A40~200 B400 C1000~2000 D50000~100000原核生物中,后隨鏈的引物是被(C)清除的。A3’-5’外切核酸酶BDNA連接酶CDNA聚合Ⅰ DDNA聚合?在大腸桿菌復(fù)制起始點(diǎn)處的基本起始蛋白是(A)ADnaA BDnaB CDnaC DDnaE如果細(xì)胞在R點(diǎn)前缺乏有絲分裂劑,它將進(jìn)入(D)期AG1 BS CG2 DG0以下哪一個(gè)陳述是正確的(A)A一旦細(xì)胞與越過(guò)R點(diǎn),細(xì)胞分裂就不可避免BG1細(xì)胞周期蛋白-CDK復(fù)合體對(duì)Rb的磷酸化是進(jìn)入S期的關(guān)鍵CG1細(xì)胞周期蛋白-CDK復(fù)合體對(duì)E2F的磷酸化是進(jìn)入S期的關(guān)鍵D細(xì)胞周期蛋白D1和INK4p16是腫瘤抑制蛋白在真核生物中,常染色體優(yōu)先在(A)復(fù)制AS期早期 BS期中期 CS期晚期 DG2期原核生物的質(zhì)粒如果含有酵母的(C)就可以在酵母細(xì)胞中復(fù)制AORC BCDR CARS DRNADNA復(fù)制過(guò)程。起 始 復(fù)制是通過(guò)起始的速率來(lái)調(diào)控的E.coli的起始位點(diǎn)位于遺傳基因座oriC,并與細(xì)胞膜相連oriC包含4個(gè)9bp的起始因子DnaA蛋白的結(jié)合位點(diǎn)當(dāng)DnaB蛋白達(dá)到足夠量,即形成由30~40個(gè)分子構(gòu)成的復(fù)合體,每一個(gè)分子結(jié)合1分子在其周?chē)膐riCDNA呈纏繞形。該過(guò)程需要DNA形成負(fù)超螺旋。負(fù)超螺旋有助于3個(gè)13bp長(zhǎng)的富含AT的重復(fù)序列的解鏈,結(jié)果有利于DnaB蛋白的結(jié)合DnaB是DNA解旋酶,利用ATP水解的能量結(jié)合并解開(kāi)雙鏈(或產(chǎn)生的單鏈泡被單鏈結(jié)合蛋()所覆蓋,以防止發(fā)生斷裂及重新復(fù)性DNA引發(fā)酶結(jié)合到DNA上并合成一段短的RNA引物從而引發(fā)第一個(gè)復(fù)制叉的先導(dǎo)鏈的復(fù)制接下來(lái)是雙向復(fù)制。解旋DNADNAⅡDNA旋轉(zhuǎn)酶作用引入負(fù)超螺旋而得到不斷釋放。延 伸 隨著新形成的復(fù)制叉替代親本鏈的后隨鏈個(gè)包含DnaB解旋酶和DNA引物酶的引發(fā)體在后隨鏈上合成多個(gè)RNA引物聚合Ⅲ全酶的二聚體延伸前導(dǎo)鏈及后隨鏈亞基聚合DNA,ε亞基校正新生DNA分子β亞基將聚合酶結(jié)合于。在每一個(gè)單體中的其余亞基各不相同,以保證全酶分別在先導(dǎo)鏈上和后隨鏈上合成長(zhǎng)的或短的DNA片段。一旦后隨鏈的引物被DNA聚合延伸,會(huì)由DNA聚合酶I的5’-3’外切核酸酶活性切去,同時(shí)用DNA填補(bǔ)缺口,然后DNA連接酶將后隨鏈上的片段連成一體。終止和分離 E.coli的兩個(gè)復(fù)制叉在與復(fù)制起始點(diǎn)成180°的復(fù)制終點(diǎn)相遇,相互連鎖的子鏈在A拓?fù)洚悩?gòu)(一型A拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用下相分離。名詞解釋?zhuān)禾卦S因子。膜解體時(shí)才能進(jìn)入核內(nèi),防止了復(fù)制完成前的再次起始。FDNA損傷、修復(fù)與重組1異常重組又被稱(chēng)為(B)A位點(diǎn)特異性重組B轉(zhuǎn)座C同源重組DDNA合成2在患有(C)的個(gè)體中缺乏對(duì)紫外線誘導(dǎo)DNA損傷的切除修復(fù)患遺傳型結(jié)腸癌Crohn氏癥DNA修復(fù)酶缺乏病DDNA修復(fù)酶缺乏病的變型3名詞解釋?zhuān)寒惓V亟M。異常重組(轉(zhuǎn)座作用:完全不依賴(lài)于序列間的同源性,而使一段較短的A序列(轉(zhuǎn)座子或轉(zhuǎn)座元件DNA復(fù)制而完成重組的過(guò)程。G基因操作細(xì)菌培養(yǎng)物中某種質(zhì)粒的存在通常用(B)來(lái)確定A藍(lán)白顏色篩選 B在抗生素存在下生長(zhǎng)C一種限制酶降解 D瓊脂凝膠電泳堿性磷酸酶(D)A將雙聯(lián)DNA片段連接起來(lái) B在DNA的5’端加上一個(gè)磷酸基團(tuán)C切斷雙聯(lián)DNA D從DNA的5’端脫去一個(gè)磷酸基轉(zhuǎn)化是(A)A細(xì)菌吸收一個(gè)質(zhì)粒 B細(xì)菌表達(dá)一個(gè)基團(tuán)C細(xì)菌吸收一個(gè)噬菌體 D從細(xì)菌中分離一個(gè)質(zhì)粒T4DNA連接酶(A)A需要ATP B將具有相鄰3’-磷酸和5’-羥基的雙鏈DNA片段連接C需要NADH D將單鏈DNA連接起來(lái)在瓊脂糖凝膠電泳中(D)ADNA向負(fù)極移動(dòng) B超螺旋質(zhì)粒泳動(dòng)的比其帶切口的異構(gòu)體慢C大分子比小分子泳動(dòng)快 D溴化乙錠被用來(lái)顯色DNAcDNA文庫(kù)黏末端:含有單鏈末端的限制性內(nèi)切核酸酶酶解產(chǎn)物被稱(chēng)為黏末端,具有突出末端,其特性在于它們可通過(guò)單鏈末端的堿基配對(duì),與其他任何具有相同突出序列的末端結(jié)合。亞克?。簩⒁芽寺〉腄NA片段從一載體向另一載體的轉(zhuǎn)移的過(guò)程?;匚男蛄校弘p鏈DNA中的一段倒置重復(fù)序列,當(dāng)該序列的雙鏈被打開(kāi)后,可形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),這段序列被稱(chēng)為回文序列。單克隆:帶有重組DNA的宿主細(xì)胞的增殖構(gòu)成了一群具有遺傳一致性的個(gè)體,稱(chēng)為單克隆。cDNA文庫(kù):以mRNA為模板,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化,在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA,與適當(dāng)?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體mRNAcDNAcDNA文庫(kù)。作為載體所具有的三大特點(diǎn)?定地保存;具有多種單一的限制酶切位點(diǎn);具有合適的選擇性標(biāo)記,分子量小,以提高其裝載能力。H克隆載體藍(lán)白篩選被用于(D)A檢測(cè)細(xì)菌中某一質(zhì)粒的存在 B提示一個(gè)克隆化DNA片段的性質(zhì)C表示一個(gè)克隆化基因 D檢測(cè)質(zhì)粒中某一插入片段的存在多克隆位點(diǎn)(B)含有許多拷貝的克隆化基因是對(duì)克隆所用的限制酶的選擇具有靈活性CD含有許多拷貝的同一種限制酶切位點(diǎn)λ噬菌體對(duì)大腸桿菌的感染一般用(C)檢測(cè)A細(xì)菌對(duì)某種抗生素的抗性 B單菌落在瓊脂平板上的生長(zhǎng)C瓊脂平板上產(chǎn)生裂解細(xì)菌區(qū)域 D細(xì)菌DNA的限制性消化150kbDNA片段的克?。–)A質(zhì)粒 Bλ噬菌體 CBAC DYAC要在植物中表達(dá)一個(gè)外源基因,應(yīng)該選用哪個(gè)載體(D)A桿狀病毒載體 B反轉(zhuǎn)錄病毒載體 CYep載體 DT-DNA載體位點(diǎn)cos位點(diǎn):當(dāng)λ噬菌體DNA進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞后,便迅速通過(guò)黏性末端配對(duì)形成雙鏈環(huán)狀的DNA分子,這種黏性末端結(jié)合形成雙鏈的區(qū)域稱(chēng)為cos位點(diǎn)。λYACDNA片段??jī)?yōu)缺點(diǎn)各是什么?載體載體插入的片段大小上限(kb)質(zhì)粒10優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn)具有合適的選擇性標(biāo)記,可能在DNA的純化過(guò)程分子量小,并穩(wěn)定地保存中發(fā)生鏈的斷裂λ噬菌體23無(wú)需體外包裝,轉(zhuǎn)染的效包裝過(guò)程復(fù)雜,效率不穩(wěn)率比質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率高,定,用途沒(méi)有質(zhì)粒廣泛可通過(guò)溶原反應(yīng)整合到宿主基因組包含質(zhì)粒的復(fù)制起點(diǎn)、選擇性標(biāo)記以及λ噬菌體cos位點(diǎn),在氨芐青霉素的選擇壓力下擴(kuò)增λ噬菌體顆粒包裝過(guò)程復(fù)雜,效率不穩(wěn)定黏粒45穩(wěn)定、容易轉(zhuǎn)化、在大腸拷貝數(shù)小,制備難度大BAC載體350桿菌宿主中生長(zhǎng)迅速、應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒小量制備技術(shù)YAC載體1000對(duì)巨大基因組的大規(guī)模結(jié)克隆的片段在增殖中會(huì)構(gòu)進(jìn)行作圖時(shí)很有效 丟失部分DNA基因文庫(kù)與篩選以下關(guān)于基因組文庫(kù)陳述哪兩個(gè)是錯(cuò)誤的(AE)cDNA制備的包括某種生物所有基因的基因組文庫(kù),必定是代表性文庫(kù)若要含有某種生物的所有基因,基因子文庫(kù)就必須含有最少的重組子DDNAEDNA的基因組文庫(kù)通常用質(zhì)粒載體cDNA克隆步驟的描述哪一個(gè)是正確的(A)AmRNA的反轉(zhuǎn)錄,第二鏈合成,cDNA末端修飾,連接到載體上BmRNAcDNACRNAmRNA,mRNA的反轉(zhuǎn)錄,第二鏈合成,連接到質(zhì)粒上D雙鏈cDNA合成,限制酶消化,加接頭,連接到載體上以下哪一種方法對(duì)于篩選文庫(kù)是無(wú)效的(D)用核酸探針對(duì)菌落和(或)噬菌體溶出的DNA進(jìn)行雜交用目標(biāo)蛋白的抗體篩選表達(dá)文庫(kù)從其生物活性的表達(dá)文庫(kù)中篩選克隆D用抗體作探針對(duì)菌落和(或)噬菌體溶出的DNA進(jìn)行雜交什么是基因組文庫(kù)?DNADNA分子中,所有這些插入了基因組DNA因組,也就是構(gòu)成了這個(gè)生物體的基因組文庫(kù)。簡(jiǎn)述菌落及噬菌斑雜交原理。把基因組中含有特定堿基序列的噬菌體,通過(guò)與RNADNA雜交,再?gòu)亩鄶?shù)噬菌體的DNA變性,然后使之固定于硝酸纖維素濾紙上,再與RNADNA片段進(jìn)行雜交,通過(guò)放射自顯影法來(lái)識(shí)別含有所需DNA養(yǎng)基對(duì)應(yīng)位置處中選出與其對(duì)應(yīng)的噬菌斑。包括轉(zhuǎn)移,結(jié)合,雜交,檢測(cè),鑒別。DNA的分析與應(yīng)用1DNA100%3EcoRIEcoRI部分消化并得到所有可能產(chǎn)生的片段,將會(huì)有多少片段被標(biāo)記,多少片段未被標(biāo)記?(A)A4,6 B4,4 C3,5 D3,3酶切片段:被標(biāo)記AB ABC ABCD;未被標(biāo)記BC BCD C CD 2以下關(guān)于PCR的陳述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的?(D)APCR循環(huán)包括模板變性,引物退火和核苷酸聚合BPCR要用熱穩(wěn)定的DNA聚合物C理想的PCR引物要長(zhǎng)度和G+C含量都相似DPCR條件的優(yōu)化通常包括鎂離子濃度的變化和聚合溫度的變化E如果PCR的效率達(dá)到100%,那么在n個(gè)循環(huán)之后目標(biāo)分子將被擴(kuò)增2n倍以下關(guān)于基因作圖技術(shù)的陳述哪兩個(gè)是正確的(CD)AS1核酸酶作圖法確定的是基因中的非轉(zhuǎn)錄區(qū)B引物延伸法確定的是基因中的非轉(zhuǎn)錄區(qū)C凝膠阻滯法可以顯示蛋白能否與某一DNA片段結(jié)合并阻滯該片段通過(guò)瓊脂糖凝膠的遷移DDNaseIDNA片段中的哪一個(gè)區(qū)域E基因啟動(dòng)子中DNA序列的功能可以通過(guò)將其連接到報(bào)道基因下游并分析其表達(dá)來(lái)確定關(guān)于誘變技術(shù)的陳述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的(A)AⅢDNA5’5’-3’方向切除BⅢDNA3’3’-5’方向切除CPCR中可以用誘變引物來(lái)引入堿基變化D可以用誘變引物、單鏈模板和DNAE可用限制酶產(chǎn)生缺失突變關(guān)于基因克隆的陳述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的(B)可以用克隆來(lái)大量表達(dá)重組蛋白DNADNA結(jié)合的蛋白被克隆的基因可被用于檢測(cè)致病基因的攜帶者D基因治療是通過(guò)將正確的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)以糾正原有的錯(cuò)誤E遺傳修飾生物已被用來(lái)生產(chǎn)臨床上有重要用途的蛋白PCR原理、特點(diǎn)PCR的基本原理是以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板,以一對(duì)分別與模板序列的兩端相互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物,在DNADNA合成,不斷重復(fù)這一過(guò)程,即可使目的DNA片段得到擴(kuò)增。DNAPCRDNA的合成量呈指數(shù)增長(zhǎng)。包括變要求低。PCR派生技術(shù)①?gòu)?fù)合PCR:PCR可用于擴(kuò)增同一反應(yīng)中多個(gè)DNA片段,用多套引物。②反向PCR:先用限制性內(nèi)切酶消化DNA,然后用連接酶連接環(huán)化,一對(duì)背對(duì)背的引物可用于從已知序列區(qū)域擴(kuò)增該圓環(huán)以獲得5’到3’側(cè)翼區(qū)直到連接的限制位點(diǎn)。③cDNA末端快速擴(kuò)增:RACE(rapid-amplificationofcDNAends)是基于PCR技術(shù)基礎(chǔ)上由已知的一段cDNA片段,通過(guò)往兩端延伸擴(kuò)增從而獲得完整的3’端和5’端。④PCR誘變:將特異突變引入到一特定DNA片段中。PCR:在擴(kuò)增前的樣品中加入已知數(shù)量的相似DNADNA段,兩種產(chǎn)物的比例取決于加入的缺失片段數(shù)量,并可算出目標(biāo)分子的數(shù)量。⑥不對(duì)稱(chēng)PCR:只有一條鏈被擴(kuò)增。原核生物的轉(zhuǎn)錄以下關(guān)于轉(zhuǎn)錄的陳述哪兩個(gè)是正確的(BD)ARNA合成按3’-5’方向進(jìn)行的BRNA5’-3’DNA有義鏈移動(dòng)CRNA5’-3’DNA模板鏈移動(dòng)DRNA與模板鏈互補(bǔ)ERNA聚合酶將核苷酸添加到正在生成的RNA鏈的5’端FRNA聚合酶將脫氧核苷酸添加到正在生成的RNA鏈的5’端RNA聚合酶的陳述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的(B)A全酶包括σ因子 B核心酶包括σ因子C需要Mg2+才有活性 D需要Zn2+才有活性以下哪個(gè)陳述是不正確的(C)A大腸桿菌RNA聚合酶有兩個(gè)α亞基B大腸桿菌RNA聚合酶有一個(gè)β亞基C大腸桿菌有一個(gè)σ因子D大腸桿菌RNA聚合酶β亞基被利福平抑制E利迪鏈菌素可抑制轉(zhuǎn)錄延伸F發(fā)夾結(jié)構(gòu)是聚陰離子,它可與β’亞基結(jié)合以下關(guān)于大腸桿菌轉(zhuǎn)錄的陳述哪一個(gè)是正確的?(E)A-10序列通常正好位于轉(zhuǎn)錄其實(shí)點(diǎn)上游10bp處B起始核苷酸通常是GC-35和-10序列間的間隔序列是保守的D轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)后的序列對(duì)于轉(zhuǎn)錄效率不重要E-35和-10序列的距離對(duì)于轉(zhuǎn)錄效率非常重要以下關(guān)于大腸桿菌轉(zhuǎn)錄的陳述哪一個(gè)是正確的?(B)ARNADNABσ因子大大提高了聚合酶對(duì)正確啟動(dòng)子位點(diǎn)的親和力CRNA起始位點(diǎn)都由一個(gè)嘌呤殘基組成,而且A比G出現(xiàn)的頻率高D所有啟動(dòng)子都被負(fù)超螺旋所抑制E終止子通常是A-U發(fā)夾結(jié)構(gòu)名詞解釋?zhuān)河辛x鏈、反義鏈、閉合復(fù)合物、開(kāi)放復(fù)合物有義鏈(編碼鏈:兩條AA雙鏈在轉(zhuǎn)mRNA序列相同對(duì)應(yīng)U)的那條單鏈叫做有義鏈。(模板鏈:基因的AA合成模板的那條單鏈叫做模板鏈或反義鏈。閉合復(fù)合物:聚合酶與處于堿基配對(duì)狀態(tài)的啟動(dòng)子DNADNA與聚合酶形成開(kāi)放復(fù)合物。舉例說(shuō)明原核生物的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。轉(zhuǎn)錄是指以雙鏈DNA為模板合成單鏈RNA。RNA的合成沿5’-3’方向進(jìn)行,其序列與DNA有義鏈(編碼鏈)相一致。起始轉(zhuǎn)錄的起始涉及RNA聚合酶與雙鏈DNA的結(jié)合。RNA聚合酶的核心酶為α2ββ’ω,負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄延伸。σ因子對(duì)于轉(zhuǎn)錄的正確起始是必需的。核心酶加上σ因子組成了全酶。它們結(jié)合到待轉(zhuǎn)錄序列上游的啟動(dòng)子部位。聚合酶通過(guò)沿著DNA鏈滑動(dòng),并與啟動(dòng)子形成閉合復(fù)合物來(lái)識(shí)別啟動(dòng)子的-35和-10序列。RNA聚合酶結(jié)合的啟動(dòng)子部位開(kāi)始,然后從一特定的起始位點(diǎn)的核苷酸處起始RNARNARNAGTPATP開(kāi)始,接著繼續(xù)鏈其余部分的合成。延伸起始成功后,聚合酶釋放出σ因子。RNA聚合酶沿5’-3’方向延伸正在伸長(zhǎng)的RNA鏈,同時(shí)沿著反義DNA鏈(模板鏈)的3’-5’方向移動(dòng),酶移動(dòng)時(shí)局部解旋DNA,使兩條DNA鏈分開(kāi)暴露出模板鏈,這段始終保持的解RNARNA-DNA雙螺旋轉(zhuǎn)一次。終止 基因3’端自身互補(bǔ)的序列會(huì)在RNA中形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)作為終止子。發(fā)夾莖部通含量較高使其穩(wěn)定性增強(qiáng)從而使聚合酶在此停頓有些基因的終止序列需要一個(gè)輔助的蛋白質(zhì)因子ρ才能有效地終止轉(zhuǎn)錄ρ是一個(gè)六聚體蛋白質(zhì)在有單鏈DNA存在時(shí)可水解沿新生RNA鏈向轉(zhuǎn)錄復(fù)合物移動(dòng),能使RNA聚合酶在ρ依懶性終止子處終止轉(zhuǎn)錄。原核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控以下陳述哪兩個(gè)是正確的?(AE)ADNA序列是一個(gè)回文結(jié)構(gòu)BDNA序列是一個(gè)回文結(jié)構(gòu)CLaclac啟動(dòng)子的結(jié)合Dlac操縱子直接被乳糖誘導(dǎo)ELac阻抑蛋白與異乳糖的結(jié)合降低了它與lac啟動(dòng)子的親和力FIPTG是lac啟動(dòng)子對(duì)的天然誘導(dǎo)劑以下關(guān)于色氨酸操縱子的陳述哪一個(gè)是正確的(F)A色氨酸操縱子的RNA產(chǎn)物很穩(wěn)定BTrp阻抑蛋白是色氨酸操縱子的產(chǎn)物CTrp阻抑蛋白和Lac阻抑蛋白一樣,是相同亞基的四聚體D色氨酸激活色氨酸操縱子的表達(dá)E色氨酸操縱子只被色氨酸阻抑蛋白所調(diào)控FTrp阻抑蛋白與色氨酸結(jié)合以下對(duì)于色氨酸操縱子的弱化作用的陳述哪兩個(gè)是正確的(BF)rho依賴(lài)性的弱化序列的缺失會(huì)導(dǎo)致色氨酸啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄的基本和激活水平的上升弱化子位于色氨酸操縱序列的上游D弱化作用不需要轉(zhuǎn)錄和翻譯的密切結(jié)合E當(dāng)色氨酸缺乏時(shí),核糖體在前導(dǎo)肽上兩個(gè)色氨酸密碼子之間的暫停導(dǎo)致弱化作用FtrpE轉(zhuǎn)錄通讀以下關(guān)于σ因子的陳述哪兩個(gè)是錯(cuò)誤的(DF)缺乏σRNA聚合酶核心酶不能從啟動(dòng)子處起始轉(zhuǎn)錄不同的σ因子識(shí)別不同系列的啟動(dòng)子σ-10和-35啟動(dòng)子元件D大腸桿菌熱休克啟動(dòng)子有不同的-35和-10序列且與17種不同的熱休克σ因子結(jié)合EB.subtilis的孢子形成受多種σ因子調(diào)節(jié)FT7噬菌體表達(dá)它自己的σ因子,而不是編碼它自己的RNA聚合酶名詞解釋?zhuān)喝趸雍蛅rpE該位點(diǎn)稱(chēng)為弱化子。色氨酸操縱子弱化作用的機(jī)理?RNA4個(gè)序列互補(bǔ)區(qū),能形成不同的堿基配對(duì)的RNA結(jié)123434(3:4結(jié)構(gòu)。mRNA轉(zhuǎn)錄的同時(shí)(色氨酸操縱子編碼的酶的最終合成產(chǎn)物細(xì)胞對(duì)它的含量很敏感,它決定了在mRNA中終止子發(fā)夾結(jié)構(gòu):4)是否形成。聚合酶在序列2的末端停滯直到核糖體開(kāi)始(UGG)處插入色氨酸,這樣翻譯可直達(dá)前導(dǎo)肽末端。當(dāng)RNA23:4發(fā)夾得以形成,轉(zhuǎn)錄可能終止。真核生物的轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶IⅡⅢ的陳述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的?(F)ARNA聚合酶Ⅱ?qū)Ζ?鵝膏蕈堿非常敏感BRNA聚合酶Ⅱ存在于核質(zhì)中CRNA聚合酶Ⅲ轉(zhuǎn)錄tRNA基因D真核細(xì)胞含有除RNA聚合酶I、Ⅱ和Ⅲ之外的其他RNA聚合酶E每一種RNA聚合酶除含有與大腸桿菌RNA聚合酶同源的亞基歪,還有一種聚合酶所特有的其他亞基FRNA的羧基末端含有一段稱(chēng)為羧基末端區(qū)7個(gè)氨基酸的短序列,它可能被磷酸化RNA聚合酶I基因的陳述哪兩個(gè)是正確的?(AF)ARNA聚合酶IRNA基因B人細(xì)胞含有40簇5個(gè)拷貝的tRNA基因C18S5.8S28SrRNA是分開(kāi)轉(zhuǎn)錄的DRNA聚合酶I的轉(zhuǎn)錄發(fā)生在核質(zhì)中ERNA聚合酶I的轉(zhuǎn)錄發(fā)生在胞質(zhì)中FrRNA基因簇被稱(chēng)為核仁組織區(qū)域RNA聚合酶I轉(zhuǎn)錄的陳述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的?(A)ARNA聚合酶I啟動(dòng)子中,核心元件是上游調(diào)控元件1000個(gè)堿基B上游結(jié)合因子(UBF)與UCE和RNA聚合酶I啟動(dòng)子狠心元件的上游部分結(jié)合CSL1UBF-DNA復(fù)合體穩(wěn)定DSL1TATATBPRNA基因的陳述哪兩個(gè)是正確的?(BE)AtRNA基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游BtRNACTBPTFⅢC的亞基之一DTFⅢB自身就是一個(gè)序列特異性轉(zhuǎn)錄因子E人類(lèi)基因組內(nèi)有2000個(gè)拷貝的單基因簇的5SrRNA基因以下哪個(gè)陳述是正確的?(C)ARNA聚合酶Ⅱ只轉(zhuǎn)錄編碼蛋白的基因BTATA框?qū)D(zhuǎn)錄效率有影響,但對(duì)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的定位沒(méi)有影響CTBP與TATA框結(jié)合D增強(qiáng)子通常位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的上游100-200堿基處以下對(duì)于一般轉(zhuǎn)錄因子的陳述哪一個(gè)是錯(cuò)誤的(D)ATFⅡD結(jié)合TATA框BTFⅡD是由TBP和TAFⅡ組成的多蛋白復(fù)合體CTBP是RNA聚合酶I、Ⅱ和Ⅲ轉(zhuǎn)錄中的共同因子DTFⅡB使TFⅡD-DNA復(fù)合體穩(wěn)定ERNA聚合酶結(jié)合后,TFⅡE、TFⅡH和TFⅡJ與轉(zhuǎn)錄復(fù)合體結(jié)合FTFⅡH導(dǎo)致CTD磷酸化TATA框(轉(zhuǎn)錄)度。啟動(dòng)子本身并不控制基因活動(dòng),而是通過(guò)與轉(zhuǎn)
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