專題25發(fā)酵工程（解析版）-2020年和2021年新高考地區(qū)高考題分類匯編

專題25發(fā)酵工程（2021江蘇）14.某同學(xué)選用新鮮成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相關(guān)敘述正確的是（ ）A.果酒發(fā)酵時(shí)，每日放氣需迅速，避免空氣回流入發(fā)酵容器B.果酒發(fā)酵時(shí)，用斐林試劑檢測(cè)葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日增多C.果醋發(fā)酵時(shí)，發(fā)酹液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時(shí)D.果醋發(fā)酵時(shí)，用重鋁酸鉀測(cè)定醋酸含量變化時(shí)，溶液灰綠色逐日加深【答案】A【解析】【分析】參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。【詳解】A、酒精發(fā)酵是利用酵母菌的無(wú)氧呼吸，果酒發(fā)酵時(shí).每II放氣需迅速，避免空氣回流入發(fā)酵容器，影響酒精發(fā)酵，A正確：B、果酒發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液中的葡葡糖不斷被消耗，因此用斐林試劑檢測(cè)葡葡汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日減少，B錯(cuò)誤；C、若以酒精為底物進(jìn)行醋酸發(fā)酵，酒精與氧氣發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生醋酸和水，幾乎沒有氣泡產(chǎn)生，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時(shí)，若以葡萄糖為底物進(jìn)行醋酸發(fā)酵，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量與果酒發(fā)酵時(shí)相當(dāng)，C錯(cuò)誤：I）、重銘酸鉀用于檢測(cè)酒精，不能用于測(cè)定醋酸含量，I）錯(cuò)誤。故選A.（2021江蘇）（不定項(xiàng)）18.為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是（ ）A.將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率B.涂布用的菌濃度應(yīng)控制在30?300個(gè)/ml.C.需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)考察輻射時(shí)間對(duì)存活率的影響，以確定最佳誘變時(shí)間D.挑取培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的較大單菌落，給純化后進(jìn)行降解效率分析【答案】AB【解析】【分析】培養(yǎng)基的配制：計(jì)算一稱量一溶化一火菌-倒平板。微生物的接種方法有稀祥涂布平板法和平板劃線法。預(yù)實(shí)驗(yàn)可以為正式實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步的摸索條件，可以檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的科學(xué)性和可行性，避免人力、物力和財(cái)力的浪費(fèi)?！驹斀狻緼、培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌再分裝于培養(yǎng)皿中，A錯(cuò)誤；B、涂布用的菌濃度應(yīng)控制在10''倍，以避免菌種重疊而不能得到單菌落，B錯(cuò)誤：C、需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)考察輻射時(shí)間對(duì)存活率的影響，再進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)，以確定最佳誘變時(shí)間，C錯(cuò)誤；I）、石油降解菌能分解石油獲得碳源，形成菌落，挑取培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的較大單菌落，給純化后進(jìn)行降解效

率分析，以獲得能高效降解石油的菌種，D正確。故選AB,,（2021月浙江選考）用白蘿卜制作泡菜的過程中，采用適當(dāng)方法可縮短腌制時(shí)間。下列方法中錯(cuò)誤的是（ ）A.將白蘿卜切成小塊B.向容器中通入無(wú)菌空氣C.添加已經(jīng)腌制過的泡菜汁D.用沸水短時(shí)處理白蘿卜塊【答案】B【分析】1、泡菜腌制過程中起作用的主要是假絲酵母和乳酸菌，在無(wú)氧條件下乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸。2、泡菜的制作流程是：選擇和處理原料、洗凈泡菜壇、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵。【詳解】A、將白蘿卜切成小塊可以擴(kuò)大白蘿卜與腌料的接觸面積，縮短腌制時(shí)間，A正確；B、泡菜制作所需菌種為乳酸菌，制作過程中應(yīng)保持無(wú)氧環(huán)境，向容器中通入無(wú)菌空氣不利于腌制，B錯(cuò)誤;C、泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過程中，加入一些已經(jīng)腌制過泡菜汁可縮短腌制時(shí)間，C正確；D、用沸水短時(shí)處理，可抑制某些微牛物的繁殖，提高泡菜品質(zhì)，也uj■縮短腌制時(shí)間，D正確。（2021山東高考12）葡萄酒的制作離不開酵母菌。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）A.無(wú)氧條件下酵母菌能存活但不能大量繁殖B.自然發(fā)酵制作葡萄酒時(shí)起主要作用的菌是野生型酵母菌C.葡萄酒顏色是葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的D.制作過程中隨著發(fā)酵的進(jìn)行發(fā)酵液中糖含量增加【答案】D【解析】酵母菌進(jìn)行有氧呼吸獲得能量大量繁殖，無(wú)氧條件下，發(fā)酵產(chǎn)生酒精，故無(wú)某條件下酵母菌能進(jìn)行無(wú)氧呼吸存活但不能大量繁殖，A正確；自然發(fā)酵制作葡萄酒時(shí)起主要作用的菌是葡萄皮上的野生型酵母菌，BiE確；葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液使葡萄酒呈現(xiàn)顏色，C正確；制作過程中隨著發(fā)酵的進(jìn)行發(fā)酵液中糖含量減少，D錯(cuò)誤。（2021湖北）3.中國(guó)的許多傳統(tǒng)美食制作過程蘊(yùn)含了生物發(fā)酵技術(shù)。下列敘述正確的是（ ）A.泡菜制作過程中，酵母菌將葡萄糖分解成乳酸B.饅頭制作過程中，酵母菌進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生C0?C.米酒制作過程中，將容器密封可以促進(jìn)酵母菌生長(zhǎng)D.酸奶制作過程中，后期低溫處理可產(chǎn)生大量乳酸桿菌【答案】B【解析】

【分析】1、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型.腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。2、參與泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在無(wú)氧條件下，將糖分解為乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會(huì)引起亞硝酸鹽的含量的變化。3,醋酸菌好氧性細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸：醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃?35℃?！驹斀狻緼、泡菜制作過程中，主要是乳酸菌將葡的糖分解形成乳酸，A錯(cuò)誤；B、做饅頭或面包時(shí)，經(jīng)常要用到酵母菌，酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)生二氧化碳和酒精，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小孔，使得饅頭或面包暄軟多孔，B正確；C、酵母菌在有氧條件下可以大量繁殖，在密封也就是無(wú)氧條件下產(chǎn)生酒精，C錯(cuò)誤：D、酸奶制作過程中，后期低溫處理時(shí)大部分乳酸桿菌已死亡，不會(huì)大量繁殖，D錯(cuò)誤。故選B.（2021海南）17.關(guān)于果酒、果醋和泡菜這三種傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)物的制作，下列敘述正確的是（ ）A.發(fā)酵所利用的微生物都屬于原核生物 B.發(fā)酵過程都在無(wú)氧條件下進(jìn)行C.發(fā)酵過程都在同一溫度下進(jìn)行 D.發(fā)酵后形成的溶液都呈酸性【答案】D【分析】參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型：參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型；泡菜的制作離不開乳酸菌。【詳解】A、參與果酒制作的微生物是酵母菌，屬于真核生物，A錯(cuò)誤；B、參與果醋制作的醋酸菌是好較菌，因此果醋發(fā)酵需要有氧條件，B錯(cuò)誤；C、不同的發(fā)酵產(chǎn)物需要的溫度不同，C錯(cuò)誤；D、果酒、果醋和泡菜發(fā)酵后形成的溶液都呈酸性，D正確。故選D（2021遼寧）8.利用菠蘿蜜制作果醋的大致流程為：先在滅菌的果肉勻漿中接種酵母菌，發(fā)酵6天后,再接入活化的醋酸桿菌，發(fā)酵5天。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）A.乙醇既是醋酸發(fā)酵的底物，又可以抑制雜菌繁殖B.酵母菌和醋酸桿菌均以有絲分裂的方式進(jìn)行增殖C.酵母菌和醋酸桿菌發(fā)酵過程中控制通氣的情況不同D.接入醋酸桿菌后，應(yīng)適當(dāng)升高發(fā)酵溫度【答案】B【解析】【分析】1、果酒制作的菌種是酵母菌，來(lái)源丁葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無(wú)氧、

適宜溫度是18?25℃,pH值呈酸性。2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。最適溫度為30?35℃?！驹斀狻緼、當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，同時(shí)乙醇還可以抑制雜菌繁殖，A正確；B、酵母菌一般以出芽的方式繁殖，醋酸桿菌以二分裂的方式進(jìn)行增殖，B錯(cuò)誤：C、酵母菌發(fā)酵過程中先通氣使其大量繁殖，再密閉發(fā)酵產(chǎn)乙醇；醋酸桿菌為好氧菌，需持續(xù)通入無(wú)菌氧氣，C正確；D、酵母菌適宜溫度是18?25C,醋酸桿菌最適溫度為30?35C,D正確。故選Bo（2021天津）1.下列操作能達(dá)到滅菌目的的是（ ）A用免洗酒精凝膠擦手 B.制作泡菜前用開水燙洗容器C.在火焰上灼燒接種環(huán) D.防疫期間用石炭酸噴灑教室【答案】C【解析】【分析】滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽泡和他了的過程，常用的方法有灼燒火菌、干熱火菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。【詳解】A、用免洗酒精凝膠擦手屬于消毒，A錯(cuò)誤：B、制作泡菜前用開水燙洗容器屬下消毒過程，B錯(cuò)誤；C、在火焰上灼燒接種環(huán)能達(dá)到滅菌目的，C正確：1）、防疫期間川石炭酸噴灑教室，屬于消毒，D錯(cuò)誤。故選Co（2021?6浙江月選考）下列關(guān)于原生質(zhì)體和細(xì)胞計(jì)數(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.測(cè)定植物原生質(zhì)體的密度時(shí)，可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板B.紅墨水不能進(jìn)入活細(xì)胞，可用于檢測(cè)細(xì)胞的存活狀態(tài)并計(jì)數(shù)C.涂布分離法和劃線分離法均能得到單菌落，都可用于細(xì)胞計(jì)數(shù)D.酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后，可用比濁計(jì)測(cè)定其密度【答案】C【解析】【分析】微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。其中稀釋涂布平板法可以用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，而平板劃線法不能。

【詳解】A、可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行計(jì)數(shù)，一般計(jì)數(shù)總數(shù)不少于300個(gè)細(xì)胞，A正確；B、活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，紅墨水中的色素分子不能透過細(xì)胞膜，當(dāng)細(xì)胞死亡后，細(xì)胞膜失去選擇透過性，紅墨水中的色素分子能進(jìn)入細(xì)胞，所以可用紅墨水檢測(cè)細(xì)胞的存活狀態(tài)并計(jì)數(shù)，B正確：C、劃線分離法不能用于細(xì)胞計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、酵母細(xì)胞的密度與渾濁度指標(biāo)存在一定的數(shù)量關(guān)系，所以酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后，可用比濁計(jì)測(cè)定其密度，D正確。故選C.（2021山東高考14）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯(cuò)誤的是（ ）A.甲菌屬于解脂菌B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比D.該平板可用來(lái)比較解脂菌分泌脂肪酶的能力【答案】B【解析】根據(jù)題干信息“甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色”，說明甲可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色，因此中菌屬于解脂菌，A正確：乙菌落周闈沒有出現(xiàn)深藍(lán)色，說明乙菌落不能產(chǎn)生脂肪酸，不能利用脂肪為其供能，但乙菌落也可以在培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B錯(cuò)誤；可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比，更加直觀，C正確：可以利用該平板可用來(lái)比較解脂菌分泌脂肪酶的能力，觀察指標(biāo)可以以菌落周圍深藍(lán)色圈的大小，D正確。11.（2021北京）12.人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學(xué)擬從中分離出葡萄球菌。下述操作不正確的是（ ）A.對(duì)配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.使用無(wú)菌棉拭子從皮膚表面取樣C.用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布D.觀察菌落的形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步判斷【答案】C【解析】【分析】實(shí)驗(yàn)室常用的消毒和滅菌方法的比較：I、消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高溫的液體，如牛奶）、化學(xué)藥劑消毒法（如用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源等）、紫外線消毒法（接種室、操作臺(tái)）；2、滅菌：灼燒滅菌（接種工具）、干熱滅菌（玻璃器皿、金屬用具）、高壓蒸汽滅菌（培養(yǎng)基及容器）?！驹斀狻緼、為避免雜菌污染干擾，需對(duì)配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確；B、葡萄球菌需從人體皮膚的微生物中分離，為避免雜菌污染，故需要使用無(wú)菌棉拭子從皮膚表面取樣，B正確；

C、棉拭子上的微生物需要用平板劃線法在培養(yǎng)基上進(jìn)行接種，C錯(cuò)誤；I）,根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別，I）正確。故選Co.（2021山東高考20）（不定項(xiàng)）含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵鐵結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運(yùn)動(dòng)能力,用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵鏤的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯(cuò)誤的是（）甲 乙A.乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng)B.為不影響菌的運(yùn)動(dòng)需選用液體培養(yǎng)基C.該實(shí)驗(yàn)不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染【答案】B【解析】從圖中可以看出甲菌在試管中分布范圍小于乙菌，說明了乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng)，A正確：為不影響菌的運(yùn)動(dòng)需選用半固體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤：該實(shí)驗(yàn)可以根據(jù)黑色沉淀的多少初步比較細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫的能力，但不能測(cè)定產(chǎn)生硫化氣的量，C正確；微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染，D正確。.【2020年浙江7月高考卷，19】下列關(guān)于微生物培養(yǎng)及利用的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B.配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pHC.酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒D.適宜濃度的酒精可使醋化醋桿菌活化答案：A解析：利用尿素固體培養(yǎng)基篩選尿素分解曲時(shí)，尿素固體培養(yǎng)基并不直接殺死其他微生物，而是其他微生物不能以尿素為氮源，無(wú)法在尿素固體培養(yǎng)基中存活，A錯(cuò)誤；不同的微生物生長(zhǎng)所需的最適pH不同，如細(xì)菌適宜生活在中性偏堿環(huán)境，霉菌適宜生活在中性偏酸環(huán)境，因此配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pH,B正確：利用糯米釀酒需要先進(jìn)行糖化，酵母菌不能直接利用淀粉進(jìn)行發(fā)酵，C正確；醋化醋桿菌的發(fā)酵底物為一定濃度的酒一水混合物，適宜濃度的酒精可使醋化醋桿菌活化，D正確。.【2020年山東卷，12】我國(guó)的釀酒技術(shù)歷史悠久，古人在實(shí)際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗(yàn)?！洱R民要術(shù)》記載：將蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲發(fā)，如魚眼湯，凈淘米八斗，炊作飯，舒令極冷”。意思是將酒曲浸到活化，冒出魚眼大小的氣泡，把八斗米淘凈，蒸熟，攤開冷透。下列說法錯(cuò)誤的是（）“浸曲發(fā)”過程中酒曲中的微生物代謝加快

“魚眼湯”現(xiàn)象是微生物呼吸作用產(chǎn)生的CO?釋放形成的“凈淘米”是為消除雜菌對(duì)釀酒過程的影響而采取的主要措施“舒令極冷”的目的是防止蒸熟的米溫度過高導(dǎo)致酒曲中的微生物死亡答案：C解析：由題意可知，“浸曲發(fā)”是將酒曲浸泡活化，在活化的過程中微生物代謝加快，A正確；“魚眼湯”是指冒出魚眼大小的氣泡，氣泡是微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CCb釋放形成的，B正確：釀酒過程中酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的酒精會(huì)抑制其他微生物的生長(zhǎng)，而“凈淘米”是防止一些雜質(zhì)影響酒的品質(zhì)，C錯(cuò)誤；由題意可知，“舒令極冷”是將蒸熟的米攤開冷透，其目的是防止蒸熟的米溫度過高使酒曲中的微生物死亡，D錯(cuò)誤。15.【2020年山東卷，20］（不定項(xiàng)）野生型大腸桿菌可以在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，發(fā)生基因突變產(chǎn)生的氨基酸依賴型菌株需要在基本培養(yǎng)基上補(bǔ)充相應(yīng)氨基酸才能生長(zhǎng)。將甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨(dú)接種在基本培養(yǎng)基上時(shí)，均不會(huì)產(chǎn)生菌落。某同學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，將M、N菌株混合培養(yǎng)一段時(shí)間，充分稀釋后再涂布到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后出現(xiàn)許多由單個(gè)細(xì)菌形成的菌落，將這些菌落分別接種到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后均有菌落出現(xiàn)。該同學(xué)對(duì)這些菌落出現(xiàn)原因的分析，不合理的是（）A.操作過程中出現(xiàn)雜菌污染B.MN菌株互為對(duì)方提供所缺失的氨基酸C.混合培養(yǎng)過程中，菌株獲得了對(duì)方的遺傳物質(zhì)D.混合培養(yǎng)過程中，菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變答案：B解析：若操作過程中出現(xiàn)雜菌污染，則基本培養(yǎng)基上會(huì)有雜菌生長(zhǎng)，從而出現(xiàn)菌落，A正確；若M、N菌株互為對(duì)方提供所缺失的氨基酸，則M、N菌株混合培養(yǎng)一段時(shí)間，充分稀釋后再涂布到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后會(huì)HI現(xiàn)許多由單個(gè)細(xì)菌形成的菌落，但由于\1、N菌株的遺傳物質(zhì)沒有改變，將這些菌落分別接種到基本培養(yǎng)基上時(shí)，培養(yǎng)后不會(huì)再有菌落出現(xiàn)，B錯(cuò)誤；若混合培養(yǎng)過程中，菌株獲得了對(duì)方的遺傳物質(zhì)或菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變，都會(huì)造成遺傳物質(zhì)改變，則混合培養(yǎng)?段時(shí)間，充分稀釋涂布到基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)后會(huì)有菌落出現(xiàn)，將這些菌落再分別接種到基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，也會(huì)有菌落由現(xiàn)，C、I）正確。16.【2020年天津卷，9］閱讀下列材料，回答1、2題。甜瓣子是豆瓣醬的重要成分，風(fēng)味受蠶豆蛋白分解產(chǎn)生的氨基酸影響，也受發(fā)酵過程中不同微生物的多種代謝產(chǎn)物影響。其生產(chǎn)工藝如下圖所示。某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)加鹽水后的發(fā)酵階段的傳統(tǒng)工藝（鹽度15%,溫度37C,發(fā)酵30天）進(jìn)行了改良，改良后甜瓣子風(fēng)味得以提升。新工藝參數(shù)如下表所示。時(shí)段（天） 鹽度（%） 溫度（°C）前期0、1212

前期0、1212中期 1216 6 37后期 16?30 15 37兩種工藝的結(jié)果比較見下圖。O.59.5Q.5zZ665.6121824O.59.5Q.5zZ665.6121824發(fā)酵時(shí)間(d)于本研究的實(shí)驗(yàn)方法與原理的描述，錯(cuò)誤的是（）A.發(fā)酵開始階段的微生物主要來(lái)源于制曲過程的積累B.蠶豆瓣可提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需的碳源和氮源C.溫度與鹽度都影響微生物的生長(zhǎng)繁殖D.定期取樣，使用平板劃線法統(tǒng)計(jì)活細(xì)菌總數(shù)2.下列對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析，錯(cuò)誤的是（）A.新工藝中期活霉菌總數(shù)下降由溫度升高導(dǎo)致B.新工藝后期活細(xì)菌總數(shù)下降由溫度、鹽度均升高導(dǎo)致C.新工藝中期氨基酸產(chǎn)生速率較前期末加快，是因?yàn)闇囟壬咛岣吡说鞍酌富钚訢.新工藝中甜瓣子風(fēng)味提升，與前、中期活微生物總數(shù)高和氨基酸終產(chǎn)量高均有關(guān)答案：1.D；2.B解析：1.根據(jù)工之流程可知，蠶豆瓣制曲形成豆瓣曲，說明發(fā)酵開始階段的微生物主要來(lái)源于制曲過程的積累，A正確：蠶豆瓣含有豐富的糖類和蛋白質(zhì)，因此蠶豆瓣可為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供碳源和氮源，B正確；根據(jù)圖中發(fā)酵前期、中期和后期的活霉菌、活細(xì)菌總數(shù)變化以及表格數(shù)據(jù)可知，溫度與鹽度都影響微生物的生長(zhǎng)繁殖，C正確；定期取樣，使用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活細(xì)菌總數(shù)，D錯(cuò)誤。2.與前期相比，中期的鹽度不變，溫度上升，因此新工藝中期活霉菌總數(shù)下降與溫度升高有關(guān)，A正確；與中期相比，新工藝后期溫度不變，鹽度升高，因此新工藝后期活細(xì)菌總數(shù)下降是由鹽度升高導(dǎo)致的，B錯(cuò)誤；與前期末相比，新工藝中期氨基酸產(chǎn)牛.速率加快，是因?yàn)闇囟扔?2C升高到37℃,溫度升高提高了蛋白酶活性，C正確；綜合分析三圖中兩條曲線的變化，新工之中甜瓣子風(fēng)味提升，與前、中期活微生物總數(shù)高和氨基酸終產(chǎn)量高均存在密切關(guān)系，I）正確。17.【2020年江蘇卷，18】某同學(xué)在線提交了在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，他的做法錯(cuò)誤的是（）A.選擇新鮮的葡萄略加沖洗，除去枝梗后榨汁B.將玻璃瓶用酒精消毒后，裝滿葡萄汁C.酒精發(fā)酵期間，根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放氣D.酒精發(fā)酵后去除瓶蓋，蓋一層紗布，再進(jìn)行醋酸發(fā)酵答案：B解析：制作葡萄酒時(shí)，選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄略加沖洗，并除去枝梗，A正確：發(fā)酵瓶要清洗干凈，用體枳分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，或用洗潔精洗滌，葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約1/3的空間，不能裝滿，這樣既可以為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，又可以防止發(fā)酵旺盛時(shí)發(fā)酵液溢HI，B錯(cuò)誤；酒精發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生二氧化碳，為了釋放出二氧化碳，要根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放氣，C正確；由于醋酸發(fā)酵使用的菌種為醋酸菌，醋酸菌為好氧細(xì)菌，為了給醋酸發(fā)酵提供充足的氧氣，并防止空氣中的雜菌污染，酒精發(fā)酵后去除瓶蓋，蓋一層紗布，再進(jìn)行醋酸發(fā)酵，D正確。18.【2020年江蘇卷，19】為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的是()A.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整B.圖中I、H區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從III區(qū)挑取單菌落C.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色答案：B解析：倒平板后無(wú)需間歇晃動(dòng)，A錯(cuò)誤：圖中I區(qū)、II區(qū)的細(xì)菌數(shù)量太多，III區(qū)的細(xì)菌數(shù)量較少，可從HI區(qū)挑取單菌落，B正確；HI區(qū)中存在單菌落，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果能達(dá)到菌種純化的目的，C錯(cuò)誤；剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，但不能和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖形成紅色復(fù)合物，因此菌落周圍的纖維素被降解后，不能被剛果紅染成紅色，D錯(cuò)誤。(2021?湖南高考真題)大熊貓是我國(guó)特有的珍稀野生動(dòng)物，每只成年大熊貓每日進(jìn)食竹子量可達(dá)12?38kg。大熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖維素分解菌?；卮鹣铝袉栴}：(1)纖維素酎是一種復(fù)合前，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即.為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于培養(yǎng)基。(2)配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理，目的是 。檢測(cè)固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是(3)簡(jiǎn)要寫出測(cè)定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)的實(shí)驗(yàn)思路（4）為高效降解農(nóng)業(yè)桔稈廢棄物，研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌，在37c條件下進(jìn)行玉米秸稈降解實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株,理由是菌株秸稈總重（g）秸稈殘重（g）秸稈失重（％）纖維素降解率（％）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32【答案】（1）G酣、C酶和葡萄糖甘酶 纖維素選擇（2）為了殺死培養(yǎng)基中的所有微生物（微生物和芽抱、泡子） 不接種培養(yǎng)（或空白培養(yǎng)）（3）將大熊貓新鮮糞便樣液稀釋適當(dāng)倍數(shù)后，取0.1mL涂布到若干個(gè)平板（每個(gè)稀釋度至少涂布三個(gè)平板），對(duì)菌落數(shù)在30?300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，則可根據(jù)公式推測(cè)大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)（4）C 接種C菌株后秸稈失重最多，纖維素降解率最大【分析】1、分解纖維素的微生物分離的實(shí)驗(yàn)原理：（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯-碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)：（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。2、消毒和滅菌：消毒滅菌概念使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽抱和抱子）使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽抱和抱子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌適用對(duì)象操作空間、某叫液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等【詳解】（1）纖維素酶是一種復(fù)合的，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即G能、Cx酶和葡萄糖背的，前兩種能使纖維素分解成纖維：糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維

素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)：培養(yǎng)基從功能上分類可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，故該培養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。（2）配制培養(yǎng)基的常用高壓蒸汽滅菌，即將培養(yǎng)基置于壓力100kPa,溫度121C條件下維持15?30分鐘，目的是為了殺死培養(yǎng)基中的所有微生物（微生物和芽抱、胞子）。為檢測(cè)滅菌效果可對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行空白培養(yǎng)，即將未接種的培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，若在適宜條件下培養(yǎng)無(wú)菌落出現(xiàn)，說明培養(yǎng)基滅菌徹底，否則說明培養(yǎng)基滅菌不徹底。（3）為測(cè)定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)，常采用稀釋涂布平板法，在適宜的條件卜對(duì)大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)時(shí)，對(duì)照組應(yīng)該涂布等量的無(wú)菌水。將大熊貓新鮮糞便樣液稀釋適當(dāng)倍數(shù)后，取0.1ml.涂布到若干個(gè)平板（每個(gè)稀釋度至少涂布三個(gè)平板），對(duì)菌落數(shù)在30?300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，則可根據(jù)公式推測(cè)大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)。（4）測(cè)定肺活力時(shí)可以用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量來(lái)表示。由表格可知，在適宜的條件下，C菌株在相同的溫度和時(shí)間下，秸稈失重最多，纖維素降解率最大，說明該菌株的纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素能活力最大?！军c(diǎn)睛】本題考杳微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，要求考生識(shí)記計(jì)數(shù)微生物的方法：識(shí)記培養(yǎng)基的種類及功能：掌握纖維素分解分離和鑒別的原理，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。（2021月浙江高考真題）回答下列（一）小題:（一）某環(huán)保公司從淤泥中分離到一種高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備了固定化菌株。（1）從淤泥中分離細(xì)菌時(shí)常用劃線分離法或法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成o對(duì)分離的菌株進(jìn)行誘變、和鑒定，從而獲得能高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的菌株。該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖。（2）固定化菌株的制備流程如下：①將菌株與該公司研制的特定介質(zhì)結(jié)合；②用蒸儲(chǔ)水去除;③檢驗(yàn)固定化菌株的 。菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和共價(jià)偶聯(lián)法，可以采用的2種方法是。（3）對(duì)外，只提供固定化菌株有利于保護(hù)該公司的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，推測(cè)其原因是【答案】（一）（1）涂布分離 單菌落篩選（2）未固定的細(xì)菌 降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的能力 包埋法和吸附法（3）特定介質(zhì)能為菌株繁殖提供X【分析】1、分離純化細(xì)菌最常用的方法是劃線分離法（平板劃線法）和涂布分離法（稀釋涂布平板法）。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體一菌落。劃線分離法，方法簡(jiǎn)單；涂布分離法，單菌落更易分開，但操作復(fù)雜咚。2、固定化酶（insolubleenzyme）就是將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。固定化的方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等?！驹斀狻?/p>

（一）分析題意可知，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菑挠倌嘀蟹蛛x到一種高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備固定化菌株。（1）分離純化細(xì)菌最常用的方法是劃線分離法或涂布分離法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成單菌落。為了獲得能高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的菌株，還需對(duì)分離的菌株進(jìn)行誘變處理，再經(jīng)篩選和鑒定。（2）固定化的方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。由于菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和共價(jià)偶聯(lián)法，故可以采用的2種方法是包埋法和吸附法。（3）由于該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖，可推測(cè)特定介質(zhì)能為菌株繁殖提供X,故該公對(duì)外只提供固定化菌株，有利于保護(hù)該公司的知識(shí)產(chǎn)權(quán)。【點(diǎn)睛】本題考杳了特定微生物的分離、固定化技術(shù)及基因工程，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問題的能力。（2021?廣東高考真題）中國(guó)科學(xué)家運(yùn)用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H,以糖蜜（甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖）為原料，在實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價(jià)值。工藝流程如圖。攪拌器純化制備pH調(diào)節(jié)|開放式發(fā)酎系統(tǒng)攪拌器純化制備pH調(diào)節(jié)|開放式發(fā)酎系統(tǒng)回答下列問題:（1）為提高菌株H對(duì)蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液體培養(yǎng)基中將蔗糖作為,并不斷提高其濃度，經(jīng)多次傳代培養(yǎng)（指培養(yǎng)一段時(shí)間后，將部分培養(yǎng)物轉(zhuǎn)入新配的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)）以獲得目標(biāo)菌株。培養(yǎng)過程中定期取樣并用的方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，評(píng)估菌株增殖狀況。此外，選育優(yōu)良菌株的方法還有等。（答出兩種方法即可）（2）基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng)等特性，研究人員設(shè)計(jì)了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng)，其培養(yǎng)基鹽濃度設(shè)為60g/L,pH為10,菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上。該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是?（答出兩點(diǎn)即可）（3）研究人員在工廠進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，在適宜的營(yíng)養(yǎng)物濃度、溫度、pH條件下發(fā)酵，結(jié)果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液中菌株H細(xì)胞增殖和PHA產(chǎn)量均未達(dá)到預(yù)期，并產(chǎn)生了少量乙醇等物質(zhì)，說明發(fā)酵條件中可能是高密度培養(yǎng)的限制因素。（4）菌株H還能通過分解餐廚垃圾（主要含蛋白質(zhì)、淀粉、油脂等）來(lái)生產(chǎn)PHA,說明其能分泌o

【答案】(1)唯一碳源 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù) 誘變育種、基因工程育種(2)鹽濃度為60g/L的條件下，其他雜菌因失水過多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長(zhǎng)繁殖受抑制(3)氧氣(0,或溶解氧)(4)蛋白酶,淀粉酶、脂肪酶等【分析】微生物的篩選和計(jì)數(shù)方法：(1)實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選原理實(shí)驗(yàn)室篩選：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。(2)微生物常見的接種方法：稀釋涂布平板法、平板劃線法。(3)測(cè)定微生物數(shù)量的方法：①直接計(jì)數(shù)法：常用顯微鏡直接技術(shù)法，一般適用于純培養(yǎng)懸浮液中各種單細(xì)胞菌體的計(jì)數(shù)。②間接計(jì)數(shù)法：常用稀釋平板計(jì)數(shù)法，平板培養(yǎng)基上長(zhǎng)出一個(gè)菌落就代表原待測(cè)樣品中個(gè)微生物個(gè)體?！驹斀狻?1)根據(jù)題意分析，該實(shí)驗(yàn)的目的是提高菌株H對(duì)蔗糖的耐受能力和利用效率，結(jié)合微生物的代謝需求，其液體培養(yǎng)基應(yīng)該以蔗糖作為唯一碳源。并不斷提高其濃度，經(jīng)多次傳代培養(yǎng)(指培養(yǎng)一段時(shí)間后，將部分培養(yǎng)物轉(zhuǎn)入新配的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng))以獲得目標(biāo)菌株。培養(yǎng)過程中定期取樣并用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，評(píng)估菌株增殖狀況。此外，選育優(yōu)良菌株的方法還有誘變育種、基因工程育種等。(2)已知，菌株「具有嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng)等特性，因此當(dāng)培養(yǎng)基鹽濃度為60g/L,pll為10時(shí)，菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上，而鹽濃度為60g/L的條件下，其他雜菌因失水過多而死亡；pH為J0的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長(zhǎng)繁殖受抑制，故該系統(tǒng)不需要滅菌.(3)分析題意，擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物濃度、溫度、pH等條件下適宜，而發(fā)酵液中菌株H細(xì)胞增殖和PHA產(chǎn)量均未達(dá)到預(yù)期，并產(chǎn)生了少量乙醇等物質(zhì)，說明發(fā)酵條件中氧氣不足，使菌種進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乙醇,即氧氣或溶解氧)是限制高密度培養(yǎng)的重要因素。(4)根據(jù)醐的專一性可知，菌株H之所以能通過分解主要含蛋白質(zhì)、淀粉、油脂等的餐廚垃圾來(lái)生產(chǎn)PHA,說明其能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等?！军c(diǎn)睛】本題考查微生物的分離和計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問題的能力，難度適中。(2022年1月浙江)29.回答下列(一)、(二)小題：(一)紅曲霉合成的紅曲色素是可食用的天然色素，具有防腐、降脂等功能。研究者進(jìn)行了紅曲色素的提取及紅色素的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)，流程如下：(1)取紅曲霉菌種斜面，加適量洗下菌苔，制成菌懸液并培養(yǎng)，解除休眠獲得一菌種。經(jīng)液體發(fā)酵，收集紅曲霉菌絲體，紅曲霉菌絲體與70因乙醇溶液混合，經(jīng)浸提、 ，獲

得的上清液即為紅曲色素提取液。為進(jìn)一步提高紅曲色素得率，可將紅曲霉細(xì)胞進(jìn)行處理。（2）紅曲色素包括紅色素、黃色素和橙黃色素等，紅色素在390nm、420nm和505nm液長(zhǎng)處均有較大吸收峰。用光電比色法測(cè)定紅曲色素取液甲的紅色素含量時(shí)，通常選用505nm波長(zhǎng)測(cè)定的原因是 」測(cè)定時(shí)需用作空白對(duì)照。（3）生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘?jiān)?，?jīng)處理后作為飼料添加劑或有機(jī)肥，這屬于廢棄物的無(wú)害化和處理?！敬鸢浮浚?） ①.無(wú)菌水 ②.活化③.離心④.破碎①.其它色素對(duì)該波長(zhǎng)光的吸收相對(duì)較少，干擾相對(duì)較小②.70%乙醇溶液①.滅菌②.資源化【解析】【分析】1、無(wú)菌操作包括滅菌和消毒兩種方式。消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法：滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌。2、微生物接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法。3、平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面?！拘?詳解】防止污染，洗菌苔可加適量的無(wú)菌水，制成菌懸液并培養(yǎng)，解除休眠獲得活化菌種。紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合，經(jīng)浸提、離心，獲得的上清液即為紅曲色素提取液。為進(jìn)一步提高紅曲色素得率，可將紅曲霉細(xì)胞進(jìn)行破碎處理，使細(xì)胞內(nèi)的紅曲色素釋放出來(lái)。【小問2詳解】用光電比色法測(cè)定紅曲色素取液甲的紅色素含量時(shí)，通常選用505nm波長(zhǎng)測(cè)定的原因是其它色素對(duì)該波長(zhǎng)光的吸收相對(duì)較少，干擾相對(duì)較小.由于提取紅曲色素是用的70%乙醇溶液，故測(cè)定時(shí)需用70%乙醇溶液作空白時(shí)照.【小問3詳解】生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘?jiān)?jīng)滅菌處理殘?jiān)?，作為飼料添加劑或有機(jī)肥，這屬于廢棄物的無(wú)害化和資源化處理。（2021?河北高考真題）葡萄酒生產(chǎn)過程中會(huì)產(chǎn)生大量的釀酒殘?jiān)ㄆぴＤ壳斑@些皮渣主要用作飼料或肥料，同時(shí)研究者也采取多種措施拓展其利用價(jià)值?；卮鹣铝袉栴}：（1）皮渣中含有較多的天然食用色素花色甘，可用萃取法提取。萃取前將原料干燥、粉碎的目的分別是萃取效率主要取決于萃取劑的?萃取過程需要在適宜溫度下進(jìn)行，溫度過高會(huì)導(dǎo)致花色昔o研究發(fā)現(xiàn)，萃取時(shí)輔以纖維素酶、果膠酶處理可提高花色昔的提取率，原因是（2）為了解皮渣中微生物的數(shù)量，取10g皮渣加入90mL無(wú)菌水，混勻、靜置后取上清液，用稀釋涂布平板法將0.1mL稀釋液接種于培養(yǎng)基上。10,倍稀釋對(duì)應(yīng)的三個(gè)平板中菌落數(shù)量分別為78、91和95,則每克皮渣中微生物數(shù)量為個(gè)。

（3）皮渣堆積會(huì)積累醋酸菌，可從中篩選優(yōu)良菌株。制備醋酸菌初篩平板時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至—性，滅菌后須在未凝固的培養(yǎng)基中加入無(wú)菌碳酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入碳酸鈣的目的是o培養(yǎng)篩選得到的醋酸菌時(shí)，在缺少糖源的液體培養(yǎng)基中可加入乙醇作為。（4）皮渣堆積過程中也會(huì)積累某些兼性厭氧型乳酸菌。初篩醋酸菌時(shí)，乳酸菌有可能混入其中，且兩者菌落形態(tài)相似。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)，區(qū)分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌 o（簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)步驟和預(yù)期結(jié)果）【答案】（1）利于萃取劑溶解花色背、使原料與萃取劑充分接觸 性質(zhì)和使用量分解纖維素酶、果膠酶可破壞細(xì)胞壁，有利于提高花色背的提取率（2）8.8X10，（3）中性或偏堿 使培養(yǎng)基不透明，從而使醋酸菌菌落周圍出現(xiàn)透明圈 碳源（4）實(shí)驗(yàn)步驟；將平板置F無(wú)氧環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)和透明圈大小預(yù)期結(jié)果：若菌落繼續(xù)生長(zhǎng)，且透明圈增大，則為兼性厭氧型的乳酸菌菌落，若菌落不能繼續(xù)生長(zhǎng)，透明圈不再擴(kuò)大，則為醋酸菌菌落【分析】（1）萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量，同時(shí)還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、草取的溫度和時(shí)間等條件的影響。一般來(lái)說，原料顆粒小，萃取溫度高，時(shí)間長(zhǎng)，需要提取的物質(zhì)就能夠充分溶解，萃取效果就好。（2）區(qū)分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌，可根據(jù)二者代謝類型的不同，在無(wú)氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)，觀察菌落生長(zhǎng)情況?！驹斀狻浚?）天然食用色素花色昔可用萃取法提取，萃取劑與水應(yīng)不混溶，萃取前將原料干燥，有利于萃取劑溶解花色苜，提高溶解率；粉碎的目的是使原料與萃取劑充分接觸；萃取效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量。萃取過程需要在適宜溫度下進(jìn)行，溫度過高會(huì)導(dǎo)致花色昔分解。萃取時(shí)輔以纖維素酶、果膠酶處理，可破壞細(xì)胞壁，有利于提高花色件的提取率。（2）為「解皮渣中微生物的數(shù)量，取10g皮渣加入90mL無(wú)菌水，混勻、靜置后取上清液，用稀釋涂布平板法將0.1mL稀釋液接種于培養(yǎng)基上。10,倍稀釋對(duì)應(yīng)的三個(gè)平板中菌落數(shù)量分別為78、91和95,則三個(gè)平板中平均菌落數(shù)為（78+91+95）+3=88,每克皮渣中微生物數(shù)量為88+0.1X10三8.8義10"個(gè)。（3）醋酸菌屬于細(xì)菌，制備醋酸菌初篩平板時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，滅菌后在未凝固的培養(yǎng)基中加入無(wú)菌碳酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入碳酸鈣可使培養(yǎng)基不透明，醋酸菌產(chǎn)生的醋酸可分解碳酸鈣，產(chǎn)生透明圈，根據(jù)這一特點(diǎn)可篩選出醋酸菌，在缺少糖源的液體培養(yǎng)基中醋酸菌以乙醇為碳源，先把乙醇氧化為乙醛，再把乙醛氧化為乙酸。（4）醋酸菌為好氧菌，與兼性厭氧型的乳酸菌菌落形態(tài)相似，且二者產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物均可使碳酸鈣分解,區(qū)分篩選平板匕的醋酸菌和乳酸菌，可將平板置于無(wú)氧環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)和透明圈大小。若菌落繼續(xù)生長(zhǎng)，且透明圈增大，則為兼性厭氧型的乳酸菌菌落，若菌落不能繼續(xù)生長(zhǎng)，透明圈不再擴(kuò)大，則為醋酸菌菌落。【點(diǎn)睛】本題考杳植物成分的提取和微生物的分離，考杏考生對(duì)植物成分提取方法和原理、微生物培養(yǎng)、分離、計(jì)數(shù)方法的理解和識(shí)記。解答本題，需充分利用題干信息，如醋酸菌、乳酸菌代謝類型的區(qū)別等，才能準(zhǔn)確作答。（2021?6浙江月選考）（15分）回答下列（一）、（-）小題：（一）回答與甘蔗醋制作有關(guān)的問題：（1）為了獲得釀造甘蔗醋的高產(chǎn)菌株，以自然發(fā)酵的甘蔗渣為材料進(jìn)行篩選。首先配制醋酸菌選擇培養(yǎng)基：將適量的葡萄糖、KHJO*、MgSO」溶解并定容，調(diào)節(jié)pH,再高壓蒸汽滅菌，經(jīng)后加入3%體積的無(wú)水乙醇。然后將10g自然發(fā)酵的甘蔗渣加入選擇培養(yǎng)基，震蕩培養(yǎng)24ho用將少量上述培養(yǎng)液涂布到含CaCQ,的分離培養(yǎng)基上，在30℃培養(yǎng)48h。再挑取分離培養(yǎng)基上具有的單菌落若干,分別接種到與分離培養(yǎng)基成分相同的培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后，置于4℃冰箱中保存。（2）優(yōu)良產(chǎn)酸菌種篩選。將冰箱保存的菌種分別接入選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)一段時(shí)間后，取合適接種量的菌液在30℃、150r/min條件下震蕩培養(yǎng)。持續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)液中醋酸濃度不再上升，或者培養(yǎng)液中含量達(dá)到最低時(shí)，發(fā)酵結(jié)束。篩選得到的優(yōu)良菌種除了產(chǎn)酸量高外，還應(yīng)有 （答出2點(diǎn)即可）等特點(diǎn)。（3）制醋過程中，可將甘蔗渣制作成固定化介質(zhì)，經(jīng) 后用于發(fā)酵。其固定化分法為o【答案】①.冷卻②.玻璃刮刀③.較大透明圈④.斜面⑤.乙醇⑥.耐酒精度高、耐酸高⑦.滅菌⑧.吸附法【解析】【分析】1、涂布法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀稀后，均勻涂布在固體培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落，是篩選高表達(dá)量菌株的常用方法：【詳解】（-）（I）高壓蒸汽滅菌剛結(jié)束時(shí)，培養(yǎng)基溫度較高，要等培養(yǎng)基冷卻后再加入3%體積的無(wú)水乙醇。涂布分離法可用于單菌落分離，使用玻璃刮刀將待分離的菌液涂布到分離培養(yǎng)基的整個(gè)平面上。醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的醋酸會(huì)使培養(yǎng)基中的CaCO：,分解，形成透明圈。菌落小，透明圈大，代表著高產(chǎn)醋酸菌。菌種的貯存方法：在無(wú)菌操作下將單菌落用接種環(huán)取出，再用劃線法接種在斜面培養(yǎng)基匕培養(yǎng)24h后，置于4c冰箱中保存。（2）醋酸發(fā)酵結(jié)束的標(biāo)志性：產(chǎn)物不再增加（醋酸濃度不再上升）或原料消耗到最低值（乙醇含量達(dá)到最低）。優(yōu)質(zhì)菌種不光要產(chǎn)酸高，還要耐高酸，同時(shí)還要耐酒精（原料）等特點(diǎn)。（3）我們?cè)诶梦⑸飼r(shí)，常常要求所利用的微生物不被其他微生物污染。因此，在培養(yǎng)微生物時(shí)必須進(jìn)行無(wú)菌操作，所以作為固定化介質(zhì)的甘蔗渣需要經(jīng)過火菌處理。甘蔗渣類似果醋發(fā)酵裝置中的鋸末，可使醋桿菌吸附在甘蔗渣上進(jìn)行發(fā)酵。【2020年浙江1月高考卷，29］回答下列（一）、（二）小題：（一）回答與泡菜制作有關(guān)的問題：（1）用蘿卜等根菜類蔬菜制作泡菜，用熱水短時(shí)處理，可抑制某些微生物產(chǎn)生 ,從而使成品泡菜口感較脆。同時(shí)，該處理也會(huì)使泡菜發(fā)酵時(shí)間縮短，其原因是.（2）泡菜發(fā)酵初期，由于泡菜罐加蓋并水封，會(huì)使菌被逐漸抑制.發(fā)酵中期，乳酸菌大量繁殖，會(huì)使 菌受到抑制。發(fā)酵后期，乳酸生產(chǎn)過多，會(huì)使乳酸菌受到抑制。（3）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌，首先對(duì)經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進(jìn)行過濾，然后取濾液進(jìn)行再用的方法在某種含牛乳的專用的培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選。該培養(yǎng)基必須含有,以便于觀察是否產(chǎn)酸。（4）自然界中醋桿菌常與乳酸菌共同生長(zhǎng)。若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養(yǎng)基中應(yīng)添加.答案：（一）（1）果膠防：細(xì)