維生素分析與檢驗講義課件

維生素分析與檢驗維生素分析與檢驗1維生素又名維他命，是維持人體生命活動必需的一類有機物質(zhì)，也是保持人體健康的重要活性物質(zhì)維生素2⊙特點：①維生素均以維生素原的形式存在于食物中②參與機體代謝的調(diào)節(jié)③大多數(shù)的維生素必須經(jīng)常通過食物中獲得④人體對維生素的需要量很小

⊙重要性：當(dāng)體內(nèi)維生素供給不足時，能引起身體新陳代謝的障礙，造成皮膚功能的障礙?！烟攸c：3

分類：水溶性維生素：維生素B族、維生素C、維生素PP、葉酸等脂溶性維生素：

如維生素A、維生素D、維生素E、維生素K等

分類：4水溶性維生素的測試分析方法

分光光度法分子熒光法毛細(xì)管電泳法高效液相色譜法微生物法水溶性維生素的測試分析方法

分光光度法5

高效液相色譜法色譜柱:symmetryC18(319mm×150mm,5μm)流動相:甲醇水(含己烷磺酸鈉5mmol/L、冰醋酸1%、三乙胺013%)=25∶75流速:1mL/min檢測波長:275nm進(jìn)樣量:10μL.優(yōu)點：制備樣品簡單不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制高效性、高選擇性、分析速度快缺點：儀器復(fù)雜價格昂貴

高效液相色譜法6脂溶性維生素的分析和檢測

維生素C的檢測方法2，6-二氯靛酚滴定法2，4-二硝基苯肼法高效液相色譜法鉬藍(lán)比色法維生素B2的檢測方法分光光度法催化動力學(xué)法熒光法色譜法脂溶性維生素的分析和檢測

維生素C的檢測方法7滴定法測VC含量--2，6-二氯靛酚滴定法

試劑：1%草酸，2%草酸，0.001mol/L2，6—二氯酚靛酚步驟：1.稱4.0g新鮮樣品——加5ml2%草酸研磨——過濾到50ml容量瓶中——殘渣用2%草酸提取——用1%草酸定容。2.吸取10ml濾液于三角瓶中用2，6—二氯酚靛酚滴定，記錄所用滴定液體積。3.對照：于另一容量瓶內(nèi)加35ml2%草酸用1%草酸定容，取10ml進(jìn)行滴定，記錄體積。滴定法測VC含量--2，6-二氯靛酚滴定法

8VC含量（ug/100gFW）=100*（V1-V2）KV/WV3式中，W：樣品重V1：滴定樣品用滴定液ml數(shù)

V2：滴定對照用滴定液ml數(shù)V3：濾液ml數(shù)

V：提取液總體積K：1ml滴定液氧化VC毫克數(shù)VC含量（ug/100gFW）9熒光法測VB2含量雙水相的高效萃取作用簡便快速，檢出限和選擇性得到優(yōu)化。丙酮形成的雙水相萃取熒光測定VB2的方法要優(yōu)于由乙醇形成的雙水相熒光法測VB2含量雙水相的高效萃取作用10實驗方法方法1：

準(zhǔn)確移取一定量的VB標(biāo)準(zhǔn)溶液于10ml比色管中，加入適量硫酸銨，3．Oml丙酮或乙醇。用水稀釋至刻度后振蕩1.0min靜置分層，移取上層清液于λex／λem=444／52lnm處測量熒光強度，同時做空白實驗。方法2：

準(zhǔn)確移取適量VB2標(biāo)準(zhǔn)溶液(含VB2為m4)于帶刻度的比色管中，加入一定量的鹽及丙酮或乙醇，用水稀釋至10ml后振蕩1.0min。靜置分層．讀取上層有機相體積，在λex／λem=444／52lnm處側(cè)量其熒光強度，確定VB含量m2，用式E=m1／m2計算有機相對VB的萃取率E。實驗方法11植物維生素提取以蒲菜為例維生素C的提取稱取蒲菜15～20g加4%偏磷酸25mL進(jìn)行勻漿,勻漿后用2%偏磷酸定容至100mL,過濾,濾液進(jìn)行維生素C含量的測定.鹽酸硫胺、核黃素（維生素B2）

、鹽酸吡哆辛、煙酸、煙酰胺的提取稱取蒲菜15～20g,加入75mL011mol/LHCl于121℃加壓水解提取30min,冷卻后定容至100mL,過濾,濾液進(jìn)行除維生素C以外的其它水溶性維生素含量的測定.植物維生素提取以蒲菜為例12

可見／近紅外漫反射光譜無損檢測南方蜜橘維生素C的研究原理：利用光在生物組織內(nèi)部具有反射、折射、衍射和吸收等特性來確定固體樣品內(nèi)部品質(zhì)的一種快速分析法，在水果內(nèi)外部品質(zhì)無損檢測中已得到廣泛應(yīng)用。對粉末及水果VC的檢測也有相關(guān)報道。缺點：需要化學(xué)處理，分析速度慢?？梢姡t外漫反射光譜無損檢測13實驗儀器及參數(shù)設(shè)置選用美國ASD公司的QualitySpec光譜儀，其波長范圍為350-1800nm，光譜采樣間隔1nm，掃描時間每次100ms，掃描10次，光源為12V/45W鎢鹵燈。50個小果系蜜橘樣品。經(jīng)代表性樣品選擇，確定40個建模樣品進(jìn)行定標(biāo)與驗證，10個未知樣品進(jìn)行外部驗證。標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)值測定參照食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分總則(GB/T5009.1-2003),常規(guī)化學(xué)分析采用國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)中的2.6-二氯靛酚滴定法（GB/T6195--86)。實驗采用漫反射方式，每個樣品在赤道部位燈間隔采集3次光譜，取平均值。光譜采集時盡量避免擦傷或傷疤燈缺陷部位光譜數(shù)據(jù)由美國ASD公司的indicoV4.0軟件進(jìn)行采集和轉(zhuǎn)換，采用平滑，多元散射校正和標(biāo)準(zhǔn)3化對光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，以減少噪聲，樣品粒度和光程變化對光譜產(chǎn)生影響。數(shù)據(jù)分析由挪威CAMO公司的UnscramblerV9.5軟件中的PLS完成實驗儀器及參數(shù)設(shè)置14維生素分析與檢驗維生素分析與檢驗15維生素又名維他命，是維持人體生命活動必需的一類有機物質(zhì)，也是保持人體健康的重要活性物質(zhì)維生素16⊙特點：①維生素均以維生素原的形式存在于食物中②參與機體代謝的調(diào)節(jié)③大多數(shù)的維生素必須經(jīng)常通過食物中獲得④人體對維生素的需要量很小

⊙重要性：當(dāng)體內(nèi)維生素供給不足時，能引起身體新陳代謝的障礙，造成皮膚功能的障礙?！烟攸c：17

分類：水溶性維生素：維生素B族、維生素C、維生素PP、葉酸等脂溶性維生素：

如維生素A、維生素D、維生素E、維生素K等

分類：18水溶性維生素的測試分析方法

分光光度法分子熒光法毛細(xì)管電泳法高效液相色譜法微生物法水溶性維生素的測試分析方法

分光光度法19

高效液相色譜法色譜柱:symmetryC18(319mm×150mm,5μm)流動相:甲醇水(含己烷磺酸鈉5mmol/L、冰醋酸1%、三乙胺013%)=25∶75流速:1mL/min檢測波長:275nm進(jìn)樣量:10μL.優(yōu)點：制備樣品簡單不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制高效性、高選擇性、分析速度快缺點：儀器復(fù)雜價格昂貴

高效液相色譜法20脂溶性維生素的分析和檢測

維生素C的檢測方法2，6-二氯靛酚滴定法2，4-二硝基苯肼法高效液相色譜法鉬藍(lán)比色法維生素B2的檢測方法分光光度法催化動力學(xué)法熒光法色譜法脂溶性維生素的分析和檢測

維生素C的檢測方法21滴定法測VC含量--2，6-二氯靛酚滴定法

試劑：1%草酸，2%草酸，0.001mol/L2，6—二氯酚靛酚步驟：1.稱4.0g新鮮樣品——加5ml2%草酸研磨——過濾到50ml容量瓶中——殘渣用2%草酸提取——用1%草酸定容。2.吸取10ml濾液于三角瓶中用2，6—二氯酚靛酚滴定，記錄所用滴定液體積。3.對照：于另一容量瓶內(nèi)加35ml2%草酸用1%草酸定容，取10ml進(jìn)行滴定，記錄體積。滴定法測VC含量--2，6-二氯靛酚滴定法

22VC含量（ug/100gFW）=100*（V1-V2）KV/WV3式中，W：樣品重V1：滴定樣品用滴定液ml數(shù)

V2：滴定對照用滴定液ml數(shù)V3：濾液ml數(shù)

V：提取液總體積K：1ml滴定液氧化VC毫克數(shù)VC含量（ug/100gFW）23熒光法測VB2含量雙水相的高效萃取作用簡便快速，檢出限和選擇性得到優(yōu)化。丙酮形成的雙水相萃取熒光測定VB2的方法要優(yōu)于由乙醇形成的雙水相熒光法測VB2含量雙水相的高效萃取作用24實驗方法方法1：

準(zhǔn)確移取一定量的VB標(biāo)準(zhǔn)溶液于10ml比色管中，加入適量硫酸銨，3．Oml丙酮或乙醇。用水稀釋至刻度后振蕩1.0min靜置分層，移取上層清液于λex／λem=444／52lnm處測量熒光強度，同時做空白實驗。方法2：

準(zhǔn)確移取適量VB2標(biāo)準(zhǔn)溶液(含VB2為m4)于帶刻度的比色管中，加入一定量的鹽及丙酮或乙醇，用水稀釋至10ml后振蕩1.0min。靜置分層．讀取上層有機相體積，在λex／λem=444／52lnm處側(cè)量其熒光強度，確定VB含量m2，用式E=m1／m2計算有機相對VB的萃取率E。實驗方法25植物維生素提取以蒲菜為例維生素C的提取稱取蒲菜15～20g加4%偏磷酸25mL進(jìn)行勻漿,勻漿后用2%偏磷酸定容至100mL,過濾,濾液進(jìn)行維生素C含量的測定.鹽酸硫胺、核黃素（維生素B2）

、鹽酸吡哆辛、煙酸、煙酰胺的提取稱取蒲菜15～20g,加入75mL011mol/LHCl于121℃加壓水解提取30min,冷卻后定容至100mL,過濾,濾液進(jìn)行除維生素C以外的其它水溶性維生素含量的測定.植物維生素提取以蒲菜為例26

可見／近紅外漫反射光譜無損檢測南方蜜橘維生素C的研究原理：利用光在生物組織內(nèi)部具有反射、折射、衍射和吸收等特性來確定固體樣品內(nèi)部品質(zhì)的一種快速分析法，在水果內(nèi)外部品質(zhì)無損檢測中已得到廣泛應(yīng)用。對粉末及水果VC的檢測也有相關(guān)報道。缺點：需要化學(xué)處理，分析速度慢?？梢姡t外漫反射光譜無損檢測27實驗儀器及參數(shù)設(shè)置選用美國ASD公司的QualitySpec光譜儀，其波長范圍為350-1800nm，光譜采樣間隔1nm，掃描時間每次100ms，掃描10次，光源為12V/45W鎢鹵燈。50個小果系蜜橘樣品。經(jīng)代表性樣品選擇，確定40個建模樣品進(jìn)行定標(biāo)與驗證，10個未知樣品進(jìn)行外部驗證。標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)值測定參照食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分總則(GB/T5009.1-