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文檔簡介
生物選修3知識點(diǎn)專題1
基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過,賦予生物以,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?;蚬こ淌窃谏线M(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,又叫做。(一)基因工程的原理及技術(shù)基因工程的原理:基因工程的基本工具:1.“分子手術(shù)刀”——全稱:簡稱:(1)來源:主要是從中分離純化出來的。(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種,并且使每一條鏈中部位的兩個(gè)核苷酸之間的斷開,因此具有專一性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種末端,即和。2.“分子縫合針”——是指(1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較:①相同點(diǎn):縫合部位都是鍵。②區(qū)別:E·coliDNA連接酶來源于,只能縫合雙鏈DNA片段互補(bǔ)的之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接的末端,形成磷酸二酯鍵。3.“分子運(yùn)輸車”——運(yùn)載體(1)載體需要具備的條件:①。②。③。④。(2)最常用的載體是,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌之外,并具有能力的DNA分子。(3)其它載體:(二)基因工程的基本操作程序第一步:1.目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2.原核基因采取獲得,真核基因常用。人工合成目的基因的常用方法有_和_。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:(2)過程:第一步:加熱至90~95℃使;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定的從引物起始互補(bǔ)鏈的合成,逐步延伸。第二步(核心):1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中,并且可以,使目的基因能夠。2.結(jié)構(gòu)組成:+++(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的,位于基因的,是識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因,最終獲得所需的。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的,位于基因的。作用是(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中,從而將的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是。第三步:_1.轉(zhuǎn)化的概念:是的過程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是,其次還有和等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是。此方法的受體細(xì)胞多是。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是,最常用的原核細(xì)胞是,其轉(zhuǎn)化方法是:先用處理細(xì)胞,使其成為,再將溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。3.的第四步:1.首先要檢測,方法是采用。2.其次還要檢測,方法是采用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交,這種方法叫。3.最后檢測,方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取,用相應(yīng)的進(jìn)行雜交。4.有時(shí)還需進(jìn)行的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀等。(三)基因工程的應(yīng)用1.植物基因工程:抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。2.動(dòng)物基因工程:3.基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。(四)蛋白質(zhì)工程的概念蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行,或制造一種,以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)的蛋白質(zhì))專題2細(xì)胞工程(一)植物細(xì)胞工程1.理論基礎(chǔ)(原理):全能性表達(dá)的難易程度:>生殖細(xì)胞>干細(xì)胞>;>動(dòng)物細(xì)胞2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)過程:離體的―→經(jīng)過脫分化,得到―→再經(jīng)過,得到試管苗―→植物體(2)用途:微型繁殖、、制造人工種子、、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等。單倍體育種:a過程:植株(AaBb)通過減數(shù)分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四種類型);對花粉進(jìn)行;得到單倍體植株;對其幼苗時(shí)期用進(jìn)行處理;得到了正常的純合二倍體植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類型)。b優(yōu)點(diǎn):(3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的。3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)過程:①②③④⑤(2)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括等。化學(xué)法一般是用作為誘導(dǎo)劑。(3)意義:。(二)動(dòng)物細(xì)胞工程1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1)概念:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的,將它分散成,然后放在適宜的中,讓這些細(xì)胞。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用處理分散成→制成→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用或處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就,稱為。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面時(shí),細(xì)胞就會(huì),這種現(xiàn)象稱為。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件①:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止。②:合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、、無機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入等天然成分。③:適宜溫度:哺乳動(dòng)物多是;pH:。④:2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)哺乳動(dòng)物核移植可分為核移植(比較容易)和核移植(比較難)。(2)選去核的原因:卵(母)細(xì)胞;卵(母)細(xì)胞。(3)體細(xì)胞核移植的大致過程是:(4)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:①加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育;②;③生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白;④作為異種移植的供體;⑤用于組織器官的移植等。(5)體細(xì)胞核移植存在的問題:克隆動(dòng)物存在著健康問題、表現(xiàn)出缺陷等。3.動(dòng)物細(xì)胞融合(1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)方法有物理法包括等。化學(xué)法一般是用作為誘導(dǎo)劑。另外,比誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合多的一個(gè)生物方法是用進(jìn)行誘導(dǎo)。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了,成為研究細(xì)胞遺傳、、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用法植物體細(xì)胞雜交去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動(dòng),聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外,再加滅活的病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之一4.單克隆抗體(1)抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種。從血清中分離出的抗體,因此可用生物手段生產(chǎn)單克隆抗體。(2)單克隆抗體的制備過程:注入小鼠注入小鼠細(xì)胞融合分離抗原注入小鼠體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)選擇培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基從腹水提取從培養(yǎng)液提取單克隆抗體注:誘導(dǎo)融合的細(xì)胞需要進(jìn)行兩次篩選,第一次是為了獲得,第二次是為了獲得。(3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量,又能產(chǎn)生。(4)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):。(5)單克隆抗體的作用:①:準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。②:主要用于癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”,也有少量用于治療其它疾病。專題3胚胎工程(一)動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程1、胚胎工程是指對動(dòng)物所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),如、、、等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎,還需移植到生產(chǎn)后代,以滿足人類的各種需求。2、動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程(1)精子的發(fā)生:a.場所:。b.時(shí)期:開始,直到。c.過程:精原細(xì)胞先進(jìn)行有絲分裂后進(jìn)行減數(shù)分裂;變形過程中,細(xì)胞核變形為,發(fā)育為頂體,中心體演變?yōu)?,線粒體在尾基部形成,其他物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至脫落。(2)卵子的發(fā)生:a.場所:。b.時(shí)期:和。c.過程:在時(shí)期,卵原細(xì)胞在進(jìn)行有絲分裂并演變成初級卵母細(xì)胞[被卵泡細(xì)胞包圍],減數(shù)第一次分裂在完成,形成次級卵母細(xì)胞和第一極體進(jìn)入準(zhǔn)備受精;減數(shù)第二次分裂是在過程中完成的。(3)受精:準(zhǔn)備階段:精子獲能:在雌性動(dòng)物內(nèi)獲能;卵子的準(zhǔn)備(排出的卵子接下來要在中進(jìn)一步成熟到期才具備受精能力)。受精階段:[卵子周圍的結(jié)構(gòu)由外到內(nèi):放射冠、、],a.穿越放射冠——發(fā)生:精子釋放頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì),穿越放射冠。b.穿越透明帶——反應(yīng):在精子觸及卵黃膜的瞬間會(huì)發(fā)生阻止后來精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)它是防止多精子入卵受精的;c.進(jìn)入卵黃膜——反應(yīng):精子外膜和卵黃膜融合,精子入卵后,卵黃膜會(huì)拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi),它是防止多精子入卵受精的;d.形成原核:精子尾部脫落,原有核膜破裂,合成新膜形成雄原核,同時(shí)卵子完成,形成雌原核[注意:受精標(biāo)志是的形成;受精完成標(biāo)志是融合成合子]。e.形成受精卵。(4)胚胎發(fā)育:a卵裂期:受精卵在中進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量增加,但是胚胎總體積;b桑椹胚:32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎[之前所有細(xì)胞都是能發(fā)育成完整胚胎的];c囊胚:細(xì)胞開始出現(xiàn),其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫將來發(fā)育成胎兒的;而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成;胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔[注:囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂,胚胎伸展出來,這一過程叫];d原腸胚:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層,下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層,由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫。[細(xì)胞分化在達(dá)到最大限度](二)胚胎干細(xì)胞1、哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞,來源于分離出來。2、具有胚胎細(xì)胞的特性,在形態(tài)上表現(xiàn)為小,大,明顯;在功能上,具有,可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以而不發(fā)生,可進(jìn)行保存,也可進(jìn)行。3、胚胎干細(xì)胞的主要用途是:①可用于研究哺乳動(dòng)物;②是在體外條件下研究的理想材料,在培養(yǎng)液中加入,如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí),就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化,這為揭示的機(jī)理提供了有效的手段;③可以用于治療,如帕金森綜合癥、少年糖尿病等;④利用可以被誘導(dǎo)分化形成的特性,移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能;⑤隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展,通過ES細(xì)胞體外,定向培育出,用于器官移植,解決和器官移植后的問題。(三)胚胎工程的應(yīng)用1.體外受精和胚胎的早期培養(yǎng)(1)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng):超數(shù)排卵:用處理,使其排出更多的卵子,然后,從中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第二種方法:從剛屠宰母畜的中采集卵母細(xì)胞;第三種方法是借助超聲波探測儀、腹腔鏡等直接從中吸取卵母細(xì)胞。采集的卵母細(xì)胞,都要在體外經(jīng)后,才能與的精子受精。(2)精子的采集和獲能:在體外受精前,要對精子進(jìn)行處理。(3)受精:(4)胚胎的早期培養(yǎng):精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽外,還需添加等營養(yǎng)成分,以及等物質(zhì)。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí),可將其取出向。不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同。(牛、羊一般要培育到階段才能進(jìn)行移植,小鼠、家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可在更早的階段移植,人的體外受精胚胎可在階段移植。)2.胚胎移植(1)胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎,或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎,移植到其它雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體稱為,接受胚胎的個(gè)體稱為。(供體為優(yōu)良品種,作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為的品種。)地位:如轉(zhuǎn)基因、核移植,或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎,都必須經(jīng)過才能獲得后代,是胚胎工程的。(2)胚胎移植的意義:大大縮短了,充分發(fā)揮。(3)生理學(xué)基礎(chǔ):①動(dòng)物發(fā)情排卵后,同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生。這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的聯(lián)系,但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。(4)基本程序主要包括:①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體,有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體,供體和受體是。并用進(jìn)行處理,用對供體母牛做處理。②配種或人工授精。③。配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查,此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到階段。直接向受體移植或放入-196℃④對胚胎進(jìn)行。⑤。對受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。3.胚胎分割(1)概念:是指采用機(jī)械方法將切割2等份、4等份等,經(jīng)移植獲得的技術(shù)。(2)意義:來自同一胚胎的后代具有的遺傳物質(zhì),屬于繁殖。(3)材料:發(fā)育良好,形態(tài)正常的。(桑椹胚至囊胚的發(fā)育過程中,細(xì)胞開始分化,但其全能性仍很高,也可用于胚胎分割。)(4)操作過程:對囊胚階段的胚胎分
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