基因工程概念

DNA重組技術(shù)的基本工具1、原理：2、操作水平：3、又稱：4、優(yōu)點(diǎn)：基因重組DNA分子水平DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)⑴定向改造生物性狀⑵克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙⑶育種周期短基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平人類需要的基因產(chǎn)物剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)基因重組一、基因工程的概念二、基因工程的基本工具看書，思考以下問題：1、基因工程中三種基本工具的作用分別是什么？2、工具酶的作用部位分別在哪？3、具備什么條件才能充當(dāng)“分子運(yùn)輸車”？解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟需要哪些工具？關(guān)鍵步驟一的工具：關(guān)鍵步驟二的工具：關(guān)鍵步驟三的工具：基因的剪刀——限制酶基因的針線——DNA連接酶基因的運(yùn)載工具——運(yùn)載體（一）“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶1、來源：主要來自原核生物2、特點(diǎn)：具有專一性（特異性）表現(xiàn)在兩方面：(1)識(shí)別雙鏈DNA中特定核苷酸序列(2)從特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切開3、作用：特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開4、結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端SmaⅠ平末端平末端

EcoRⅠ黏性末端黏性末端黏性末端和平末端限制酶所識(shí)識(shí)別的序列列有什么特特點(diǎn)限制酶所識(shí)識(shí)別的序列列，無論是是6個(gè)堿基基還是4個(gè)個(gè)堿基，都都可以找到到一條中心心軸線，中中軸線兩側(cè)側(cè)的雙鏈DNA上的的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)復(fù)排列的。（二）“分子子縫合針”———DNA連連接酶1、種類：⑴E·coliDNA連接酶⑵T4DNA連接接酶2、作用：可把黏性末端端之間的縫隙“縫合””起來，E·coliDNA連連接酶或或T4DNA連接酶酶即恢復(fù)被限制酶酶切開的兩個(gè)個(gè)核苷酸之間間的磷酸二酯鍵DNA連接酶酶與DNA聚聚合酶是一回回事嗎？T4DNA連接酶酶還可把平末端端之間的縫隙隙“縫合”起起來，但效率率較低DNA連接酶DNA聚合酶連接DNA鏈雙鏈單鏈連接部位在兩DNA片段之間形成磷酸二酯鍵將單個(gè)核苷酸加到已存在的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵常用的運(yùn)載體體：質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)、、植物病毒等（三）“分子子運(yùn)輸車”———運(yùn)載體載體必須具備備的條件如果載體對(duì)受受體細(xì)胞有害害將怎樣？目的的基基因因是是否否進(jìn)進(jìn)入入受受體體細(xì)細(xì)胞胞，，沒沒有有標(biāo)標(biāo)記記基基因因我我們們能能否否鑒鑒定定？？假如目目的基基因?qū)?dǎo)入受受體細(xì)細(xì)胞后后不能能復(fù)制制將怎怎樣？？作為載載體沒沒有切切割位位點(diǎn)將將怎樣樣？作為載載體的的必要要條件件1、能能夠在在宿主主細(xì)胞胞中復(fù)復(fù)制并并穩(wěn)定定地保保存；；2、具具有多多個(gè)限限制酶酶切點(diǎn)點(diǎn)，以以便與與外源源基因因連接接；3、具具有某某些標(biāo)標(biāo)記基基因，，便于于進(jìn)行行篩選選。（（如抗抗菌素素的抗抗性基基因、、產(chǎn)物物具有有顏色色反應(yīng)應(yīng)的基基因等等））4、對(duì)對(duì)受體體細(xì)胞胞無害害（三））“分分子運(yùn)運(yùn)輸車車”———運(yùn)運(yùn)載體體2、種種類：：1、需需要具具備的的條件件：（1））在受受體細(xì)細(xì)胞中中穩(wěn)定定存在在，能能自我我復(fù)制制（2）有一一個(gè)或多個(gè)個(gè)切割位點(diǎn)點(diǎn)（3）有標(biāo)標(biāo)記基因（4）對(duì)受受體細(xì)胞無無害質(zhì)粒、噬菌菌體、動(dòng)植植物病毒等等以下是兩種種限制酶切切割后形成成的DNA片段，試試分析：①GC…②②AATTC…③③…GC④④……CTTAACG…G………CG……G(1)其其中①和和是由一種種限制酶酶切割形形成的末端，（2）和是由另一一種限制制酶切割割形成的的末端，反饋練習(xí)習(xí)：在基因工工程中，，切割運(yùn)運(yùn)載體和和含有目目的基因因的DNA片段段，需使使用（））同種限制制酶B.兩種種限制酶酶同種連接接酶D.兩兩種連連接酶基因工程程常用的的受體細(xì)細(xì)胞有（（））(1)大大腸桿菌菌（（2）枯枯草桿菌菌（3）支支原體（（4）動(dòng)植植物細(xì)胞胞A.（（3）（（4）B.（1）（2）（4）C.（（2）（（3）（（4）D.（1）（2）（3）不屬于質(zhì)質(zhì)粒被選選為基因因運(yùn)載體體的理由由是A、能復(fù)復(fù)制(））B、有多多個(gè)限制制酶切點(diǎn)點(diǎn)C、具有有標(biāo)記基基因D、它是是環(huán)狀DNAD1、下列不適合用于基因工程的運(yùn)載體是（）A、質(zhì)粒B、噬菌體C、細(xì)菌D、病毒選我C2、下列列說法正正確的是是：（））A、限制制酶的切切口一定定是GAATTC堿基基序列B、質(zhì)粒粒是基因因工程中中唯一的的運(yùn)載體體C、重組組技術(shù)所所用的工工具酶是是限制酶酶、連接酶、、運(yùn)載體體D、利用用運(yùn)載體體在宿主主細(xì)胞內(nèi)內(nèi)對(duì)目的的基因進(jìn)行大量量復(fù)制的的過程可可稱為““克隆””選我D審題3、下列列黏性末末端屬于于同種內(nèi)內(nèi)切酶切切割而成成的是（））A、①②②B、、①③C、①④④D、②②③TCGAGCTTAAAGGTTCCAAGCTTCAGAATTCG③①②④4、下列列哪一種種酶是基基因工程程的工具具酶（））A、DNA連接接酶B、DNA酶C、RNA酶D、、運(yùn)載體體選我A選我A記住了基因工程程是在DNA分分子水平平上進(jìn)行行設(shè)計(jì)施施工的。。在基因因操作的的基本步步驟中，，不進(jìn)行行堿基互互補(bǔ)配對(duì)對(duì)的步驟驟是（（））A、人工工合成目目的基因因B、目的的基因與與運(yùn)載體體結(jié)合C、將目目的基因因?qū)胧苁荏w細(xì)胞胞D、目的的基因的的檢測和和表達(dá)C9、靜夜夜四無無鄰，，荒居居舊業(yè)業(yè)貧。。。12月月-2212月月-22Friday,December23,202210、雨中中黃葉葉樹，，燈下下白頭頭人。。。05:57:2805:57:2805:5712/23/20225:57:28AM11、以以我我獨(dú)獨(dú)沈沈久久，，愧愧君君相相見見頻頻。。。。12月月-2205:57:2805:57Dec-2223-Dec-2212、故故人人江江海海別別，，幾幾度度隔隔山山川川。。。。05:57:2805:57:2805:57Friday,December23,202213、乍乍見見翻翻疑疑夢夢，，相相悲悲各各問問年年。。。。12月月-2212月月-2205:57:2805:57:28December23,202214、他鄉(xiāng)鄉(xiāng)生白白發(fā)，，舊國國見青青山。。。23十十二二月20225:57:28上上午05:57:2812月月-2215、比不不了得得就不不比，，得不不到的的就不不要。。。。十二月月225:57上上午午12月月-2205:57December23,202216、行動(dòng)出成成果，工作作出財(cái)富。。。2022/12/235:57:2805:57:2823December202217、做前，，能夠環(huán)環(huán)視四周周；做時(shí)時(shí)，你只只能或者者最好沿沿著以腳腳為起點(diǎn)點(diǎn)的射線線向前。。。5:57:28上午午5:57上午午05:57:2812月-229、沒有失失敗，只只有暫時(shí)時(shí)停止成成功！。。12月-2212月-22Friday,December23,202210、很多事事情努力力了未必必有結(jié)果果，但是是不努力力卻什么么改變也也沒有。。。05:57:2805:57:2805:5712/23/20225:57:28AM11、成功就是日日復(fù)一日那一一點(diǎn)點(diǎn)小小努努力的積累。。。12月-2205:57:2805:57Dec-2223-Dec-2212、世間成事，，不求其絕對(duì)對(duì)圓滿，留一一份不足，可可得無限完美美。。05:57:2805:57:2805:57Friday,December23,202213、不不知知香香積積寺寺，，數(shù)數(shù)里里入入云云峰峰。。。。12月月-2212月月-2205:57:2905:57:29December23,202214、意意志志堅(jiān)堅(jiān)強(qiáng)強(qiáng)的的人人能能把把世世界界放放在在手手中中像像泥泥塊塊一一樣樣任任意意揉揉捏捏。。23十十二二月月20225:57:29上上午午05:57:2912月月-2215、楚塞三三湘接，，荊門九九派通。。。。十二月225:57上午午12月-2205:57December23,202216、少年十十五二十十時(shí)，步步行奪得得胡馬騎騎。。2022/12/235:57:2905:57:2923December202217、空山山新雨雨后，，天氣氣晚來來秋。。。5:57:29上上午5:57上上午午05:57:2912月月-229、楊柳柳散和和風(fēng)，，青山山澹吾吾慮。。。12月月-2212月月-22Friday,December23,202210、閱讀讀一切切好書書如同同和過過去最最杰出出的人人談話話。05:57:2905:57:2905:5712/23/20225:57:29AM11、越是是沒有有本領(lǐng)領(lǐng)的就就越加加自命命不凡凡。12月月-2205:57:2905:57Dec-2223-Dec-2212、越越是是無無能能的的人人，，越越喜喜歡歡挑挑剔剔別別人人的的錯(cuò)錯(cuò)兒兒。。05:57:2905:57:2905:57Friday,December23,202213、知人者者智，自自知者明明。勝人人者有力力，自勝勝者強(qiáng)。。12月-2212月-2205:57:2905:57:29December23,202214、意意志志堅(jiān)堅(jiān)強(qiáng)強(qiáng)的的人人能能把把世世界界放放在在手手中中像像泥泥塊塊一一樣樣任任意意揉揉捏捏。。23十十二二月月20225:57:29上上午午05:57:2912月月-2215、最具挑戰(zhàn)性性的挑戰(zhàn)莫過過于提升自我我。。十二月225:57上上午12月-2205:57December23,202216、業(yè)余生活要要有意義，不不要越軌。2022/12/235:57:2905