微生物實驗室基本能力和要求

微生物實驗室基本能力和要求第一頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物基礎(chǔ)知識微生物的概念微生物一詞并非生物分類學上的專門名詞，而是對所有形體微小、單細胞的或個體結(jié)構(gòu)較為簡單的多細胞的、甚或沒有細胞結(jié)構(gòu)的低等生物的通稱。微生物類群十分龐雜，其中包括：不具細胞結(jié)構(gòu)的病毒；屬于原核生物的立克次氏體和細菌等；屬于真核生物的霉菌、酵母菌、藻類和原生動物等；以及屬于古菌的產(chǎn)甲烷菌等。第二頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物是一個通稱：形體微小，結(jié)構(gòu)簡單的低等生物。病毒、細菌、放線菌、真菌…種類多、分布廣繁殖快適應性強易變異

認識微生物第三頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物的特點：●分布廣、種類多(目前已知的約10萬種)●生長旺、繁殖快(大腸桿菌在適宜溫度下每20-30分鐘繁殖一代)●適應性強●易變異(如對藥物的耐受)第四頁，共九十八頁，2022年，8月28日球菌(coccus)腦膜炎奈瑟菌雙球菌(diplococcus)肺炎鏈球菌第五頁，共九十八頁，2022年，8月28日鏈球菌(streptococcus)球菌(coccus)第六頁，共九十八頁，2022年，8月28日球菌(coccus)葡萄球菌(streptococcus)第七頁，共九十八頁，2022年，8月28日球菌(coccus)四聯(lián)球菌(tetrad)第八頁，共九十八頁，2022年，8月28日球菌(coccus)八疊球菌(sarcina)第九頁，共九十八頁，2022年，8月28日桿菌(bacillus)不同桿菌的大小、長短、粗細很不一致。炭疽芽胞桿菌3-10μm大中大腸埃希菌2-3μm小布魯菌0.6-1.5μm第十頁，共九十八頁，2022年，8月28日桿菌的形態(tài)多樣桿菌(bacillus)兩端齊平炭疽芽胞桿菌兩端尖細白喉棒狀桿菌第十一頁，共九十八頁，2022年，8月28日桿菌(bacillus)桿菌的形態(tài)多樣分枝桿菌雙歧桿菌第十二頁，共九十八頁，2022年，8月28日螺形菌(spiralbacterium)弧菌螺菌螺桿菌第十三頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物在自然界中的分布土壤空氣水人、動植物體第十四頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物與食品的關(guān)系1作為食品的微生物(食用菌)2生產(chǎn)食品的微生物(發(fā)酵食品)3引起食品腐敗的微生物4引發(fā)食物中毒的微生物第十五頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品中微生物的污染食品微生物污染，是指微生物及其產(chǎn)生的毒素通過直接或間接的各種途徑進入到食品中，使食品受到污染。第十六頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品中微生物污染的危害美國，每年約有7200萬人發(fā)生食源性疾病，造成3500億美元的損失2001年，江蘇、安徽等地，腸出血性大腸桿菌O157:H7，造成177人死亡，中毒人數(shù)超過2萬人1999年，寧夏，沙門氏菌污染肉品，食物中毒暴發(fā)，發(fā)病人數(shù)上千人80年代，上海，毛蚶，甲型肝炎爆發(fā)，累及30萬人第十七頁，共九十八頁，2022年，8月28日第十八頁，共九十八頁，2022年，8月28日沙門氏菌（禽、畜肉）副溶血性弧菌（水產(chǎn)品）蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌（剩飯）肉毒梭菌（發(fā)酵制品、肉制品）單核細胞增生李斯特菌（乳制品、冷藏食品）大腸桿菌O157:H7（肉制品）等。微生物性食物中毒常見的致病菌和食物：第十九頁，共九十八頁，2022年，8月28日全國食品中三種致病菌連續(xù)監(jiān)測陽性率變化

13.820.417.424.602003年9.765.503.61總陽性率0.520.820.61O157:H75.761.290.96單核細胞增生李斯特氏菌3.593.42.23沙門氏菌2002年2001年2000年

第二十頁，共九十八頁，2022年，8月28日全國食品中三種致病菌連續(xù)監(jiān)測陽性率變化

第二十一頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品中微生物的污染源土壤中微生物對食品的污染：與土壤接觸過的動、植物性產(chǎn)品等水中微生物對食品的污染：加工、清洗用水的衛(wèi)生質(zhì)量與食品污染有直接關(guān)系空氣中的微生物對食品的污染：生產(chǎn)環(huán)境的空氣質(zhì)量、塵埃密度與食品污染有關(guān)人及動物體的微生物對食品的污染：第二十二頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物污染食品的途徑通過動物體自身攜帶的病原菌污染：內(nèi)源性污染通過水污染通過空氣污染通過生產(chǎn)加工過程污染通過運輸過程污染通過貯存過程污染通過昆蟲和媒介動物污染第二十三頁，共九十八頁，2022年，8月28日WHO保障安全食物的五個關(guān)鍵

其內(nèi)容包括:保持清潔：生食與熟食分開；徹底烹調(diào)食物;在安全溫度下保存食物；使用安全的水和安全的原料。第二十四頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品衛(wèi)生微生物檢驗的范圍生產(chǎn)環(huán)境的檢驗：車間用水、空氣、地面、墻壁等。原輔料檢驗：包括動物、谷物、添加劑等一切原輔材料。食品加工、儲藏、銷售諸環(huán)節(jié)的檢驗：包括食品從業(yè)人員的衛(wèi)生狀況檢驗、加工工具、運輸車輛、包裝材料的檢驗等。食品的檢驗：重要的是對出廠食品、可疑食品及食物中毒食品的檢驗。第二十五頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品微生物檢驗的指標食品微生物檢驗的指標就是根據(jù)食品衛(wèi)生的要求，從微生物學的角度，對不同食品所提出的與食品有關(guān)的具體指標要求。我國衛(wèi)生部頒布的食品微生物指標有菌落總數(shù)、大腸菌群和致病菌三項。第二十六頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品微生物指標的意義菌落總數(shù)：菌落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后所得1g或1mL檢樣中所含細菌菌落的總數(shù)。它可以反應食品的新鮮度、被細菌污染的程度、生產(chǎn)過程中食品是否變質(zhì)和食品生產(chǎn)的一般衛(wèi)生狀況等。因此它是判斷食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要依據(jù)之一第二十七頁，共九十八頁，2022年，8月28日菌落(colony)：生長在固體培養(yǎng)基上，來源于一個細胞，肉眼可見的細胞群體。第二十八頁，共九十八頁，2022年，8月28日霉菌和酵母評價食品衛(wèi)生質(zhì)量的指示菌造成腐敗變質(zhì)pH低、濕度低、含鹽和含糖高的食品第二十九頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品微生物指標的意義大腸菌群：包括大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌的一些中間類型的細菌。這些細菌是寄居于人及動物腸道內(nèi)的常居菌，它隨著糞便排出體外。食品中如果大腸菌群數(shù)越多，說明食品受糞便污染的程度越大。故以大腸菌群作為糞便污染食品的衛(wèi)生指標來評價食品的質(zhì)量，具有廣泛的意義。第三十頁，共九十八頁，2022年，8月28日北美國家一般使用“糞大腸菌群”概念，如AOAC、FDA。SN中的“糞大腸菌群”概念為等同采用AOAC方法，故而使用糞大腸菌群概念；而歐洲使用“耐熱大腸菌群”概念，較少使用“糞大腸菌群”。項目依據(jù)耐熱大腸菌群NMKL、ISO糞大腸菌群NMKL

AOAC

定義在44.5℃培養(yǎng)，24h內(nèi)能產(chǎn)酸產(chǎn)氣的細菌在胰蛋白胨肉湯中于44.5℃，24h內(nèi)產(chǎn)生吲哚的耐熱大腸菌群于LST中36℃培養(yǎng)48h內(nèi)產(chǎn)氣，并于EC內(nèi)培養(yǎng)44℃24h產(chǎn)氣的一群細菌

第三十一頁，共九十八頁，2022年，8月28日

作為一種衛(wèi)生指標菌，耐熱大腸菌群中很可能含有糞源微生物，因此耐熱大腸菌群的存在表明可能受到了糞便污染，可能存在大腸桿菌。但是，耐熱大腸菌群的存在并不代表對人有什么直接的危害。作為糞便污染指標菌，耐熱大腸菌群與大腸菌群、大腸桿菌相似，主要以其檢出情況來判斷食品是否受到了糞便污染。糞便是腸道排泄物，有健康者，也有腸道病患者或帶菌者糞便，所以糞便中既有正常腸道菌，也可能有腸道致病菌（如沙門氏菌、志賀式菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌等）和食物中毒者。因此，食品既然受到糞便污染就有可能對食用者造成潛在的危害。通常情況下，耐熱大腸菌與大腸菌群相比，在人和動物糞便中所占的比例較大，而且由于在自然界容易死亡等原因，耐熱大腸菌群的存在可認為食品直接或間接的受到了比較近期的糞便污染。因而，耐熱大腸菌群在食品中的檢出，與大腸菌群相比，說明食品受到了更為不清潔的加工，腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。第三十二頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品微生物指標的意義致病菌：致病菌即能夠引起人們發(fā)病的細菌。不同的食品根據(jù)其受致病菌污染的風險程度，選擇一定的菌群進行檢驗。例如：海產(chǎn)品以致病性弧菌作為檢測目標；蛋與蛋制品以沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌等作為被檢菌；米、面類食品以蠟樣芽孢桿菌、變形桿菌、霉菌等作為參考菌群；肉類食品檢測單增李氏菌、致病性大腸桿菌等；罐頭食品以耐熱性芽孢菌作為參考菌群等等。第三十三頁，共九十八頁，2022年，8月28日

腸道桿菌(entericbacilli)一大群居住在人和動物腸道中生物學性狀近似的革蘭陰性桿菌屬于腸桿菌科多數(shù)是腸道的正常菌群，至少有30個菌屬，120個以上的菌種少數(shù)為致病菌，是胃腸傳染病的最重要病原菌第三十四頁，共九十八頁，2022年，8月28日在環(huán)境和食品衛(wèi)生學上，常被用作糞便污染的檢測指標衛(wèi)生學意義第三十五頁，共九十八頁，2022年，8月28日大腸桿菌(大腸埃希氏菌屬

Escherichiacoli)是人類和動物腸道中的正常菌群是國際公認的衛(wèi)生監(jiān)測指示菌出生后數(shù)小時就進入腸道，并終生伴隨有些菌型是人或動物的病原菌第三十六頁，共九十八頁，2022年，8月28日致病性大腸桿菌引起的腹瀉性疾病第三十七頁，共九十八頁，2022年，8月28日其中許多為人畜共患病一大群人與動物腸道中的寄生菌菌群菌型甚多，僅少數(shù)對人致病沙門氏菌第三十八頁，共九十八頁，2022年，8月28日廣泛存在于動物腸道、內(nèi)臟中引起中毒的主要是動物源性食品第三十九頁，共九十八頁，2022年，8月28日金黃色葡萄球菌急性化膿性感染食物中毒正常人帶菌，30-80%通過工人手和呼吸道污染食品第四十頁，共九十八頁，2022年，8月28日

單增李斯特氏菌人、畜共患，4℃生長，冷藏食品預防措施：充分烹調(diào)產(chǎn)品，對于經(jīng)過熱處理的食品應防止交叉污染。耐鹽，在10%的鹽中也可生長

革蘭氏陽性短小桿菌第四十一頁，共九十八頁，2022年，8月28日形態(tài)與染色涂片中呈穿梭樣運動非?；顫娨后w中排列整齊呈魚群狀革蘭染色陰性弧型或逗點狀，單鞭毛霍亂弧菌（V.cholerae）第四十二頁，共九十八頁，2022年，8月28日生物學特性嗜鹽（halophilic）在培養(yǎng)基中以含3.5%NaCl生長最為適宜在“我妻氏瓊脂平板”上產(chǎn)生溶血現(xiàn)象神奈川現(xiàn)象（Kanagawaphenomenon）副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）第四十三頁，共九十八頁，2022年，8月28日其它食品微生物指標霉菌及其毒素：我國還沒有制定出霉菌的具體指標，鑒于有很多霉菌能夠產(chǎn)生毒素，引起中毒，故應該對產(chǎn)毒霉菌進行檢驗。例如：曲霉屬的黃曲霉、寄生曲霉等，青霉屬的桔青霉、島青霉等，鐮刀霉屬的串珠鐮刀霉、禾谷鐮刀霉等等。第四十四頁，共九十八頁，2022年，8月28日第四十五頁，共九十八頁，2022年，8月28日其它食品微生物指標微生物指標還包括病毒，如肝炎病毒、諾沃克病毒，以及人畜共患病病原如：禽流感病毒、口蹄疫病毒、瘋牛病病原等。另外，從食品檢驗的角度考慮，寄生蟲也被很多學者列為微生物檢驗的指標：如旋毛蟲、囊尾蚴、住肉孢子蟲、蛔蟲、肺吸蟲、弓形體、螨、姜片吸蟲、中華分枝睪吸蟲等等。第四十六頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品企業(yè)常檢的微生物項目微生物計數(shù)項目：菌落總數(shù)、大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌、霉菌、酵母菌計數(shù)。致病菌：沙門氏菌、致病性大腸桿菌、副溶血性弧菌、霍亂弧菌、單核增生李氏菌、金黃色葡萄球菌其它：商業(yè)無菌、抗生素殘留第四十七頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品微生物檢驗的一般程序食品微生物檢驗是一門應用微生物學理論與實驗方法的一門科學，是對食品中微生物的存在與否及種類和數(shù)量的驗證。在生物科學中，微生物學是一門實踐性最強的學科之一，它有一套自己獨特的研究方法。要做好微生物檢驗，必須具有堅實的微生物學基礎(chǔ)知識，熟悉各種致病菌的生物學特性；掌握各種致病菌、霉菌和病毒的檢驗程序。第四十八頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物檢測的一般流程致病菌檢測：增菌（直接增菌或選擇性增菌）-篩選-純化-生化反應和血清學反應第四十九頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物檢測室的通用技術(shù)要求

微生物檢測室必須通過外部和內(nèi)部控制活動來保證相對穩(wěn)定的質(zhì)量。微生物檢驗作為一個檢測領(lǐng)域，其檢驗室除了具有實驗室的一般要求外，因其自身的特點兼具有特殊的技術(shù)要求。第五十頁，共九十八頁，2022年，8月28日一、對人員的要求有顏色視覺障礙的人員不能執(zhí)行某些實驗實驗室人員應熟悉生物測試安全操作知識和消毒知識實驗人員應具備高中畢業(yè)以上文化程度，要不斷培訓提高檢測技術(shù)和操作能力第五十一頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物學實驗的主要內(nèi)容：無菌操作技能的培養(yǎng)無菌概念的建立無菌操作：環(huán)境：無菌區(qū)人員：無菌概念物品：嚴格滅菌

無菌操作的概念第五十二頁，共九十八頁，2022年，8月28日人員要求實驗室人員的分類：管理人員、技術(shù)人員、技術(shù)支持人員等。相應崗位的人員，應具備相應的技術(shù)能力，相應的技術(shù)能力證明（證書及證件）。微生物檢驗室因有相應技術(shù)能力的人負責室內(nèi)的技術(shù)工作。并設(shè)立質(zhì)量監(jiān)督員。第五十三頁，共九十八頁，2022年，8月28日人員的衛(wèi)生要求(ISO7218)在個人衛(wèi)生方面，為避免污染樣品和培養(yǎng)基，避免個人感染的危險，需要注意下列事項：穿淺色的、干凈的、衛(wèi)生狀況好的實驗工作服，這些工作服由布制作，可減少燃燒的危險，這類工作服不能穿出工作區(qū)，和衣帽室；如果必要戴上帽子和口罩以保護頭發(fā)和胡須；修好指甲并保持指甲干凈，指甲不能留太長；進行微生物檢測前后和去廁所后用自來水徹底洗手，自來水由非手動開關(guān)控制；洗手時用液體或粉狀肥皂，也可用消毒劑，用適宜的分配容器以一種正確的清潔方式取用。用一次性紙巾或一次性毛巾擦干手；接種時不能說話、咳嗽等；在實驗區(qū)不能吃喝和抽煙；有感染（甲溝炎）或生病的人員應特別注意，有病部位可能導致細菌污染樣品使結(jié)果無效；不要把個人消費的食品放在實驗室冰箱里。第五十四頁，共九十八頁，2022年，8月28日二、對設(shè)施和環(huán)境條件的要求

實驗室的總體布局和各部位的安排應減少潛在的對樣本的污染和對人員的危害。設(shè)施要求以能獲得可靠的生物測試結(jié)果為重要依據(jù)無菌工作區(qū)域應予以明確標識，并能有效地控制、監(jiān)測和記錄第五十五頁，共九十八頁，2022年，8月28日布局示例

緩沖走廊辦公室儀器室清洗消毒室培養(yǎng)基室微生物檢驗室實驗臺緩沖室無菌室緩沖室第五十六頁，共九十八頁，2022年，8月28日ISO7218對實驗環(huán)境的要求微生物實驗的環(huán)境不能影響分析的可靠性。對場地要求的關(guān)注是為了避免交叉污染，應用“單向流動”原則有助于實現(xiàn)該目標。應對特別環(huán)境進行監(jiān)控，如：超高的溫度、粉塵、濕度、蒸汽、噪音、震動、直接暴露在日光下等。工作區(qū)面積應足夠大以保持工作區(qū)干凈、有秩序。為滿足所有的測試，推薦每名分析人員使用大約20平米的工作區(qū)。檢驗過程中，只允許需要進行實驗的人員進入測試區(qū)。第五十七頁，共九十八頁，2022年，8月28日CNAL實驗室生物安全認可準則的要求BSL-2實驗室1)滿足6.1(BSL-1)的要求。2)實驗室門應帶鎖并可自動關(guān)閉。實驗室的門應有可視窗。3)應有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用。在實驗室工作區(qū)域外還應當有供長期使用的存儲空間。4)在實驗室內(nèi)應使用專門的工作服；應戴乳膠手套。5)在實驗室的工作區(qū)域外應有存放個人衣物的條件。6)在實驗室所在的建筑內(nèi)應配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。7）應在實驗室內(nèi)配備生物安全柜。8)應設(shè)洗眼設(shè)施，必要時應有應急噴淋裝置。9)應通風，如使用窗戶自然通風，應有防蟲紗窗。10)有可靠的電力供應和應急照明。必要時，重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應設(shè)備用電源。11)實驗室出口應有在黑暗中可明確辨認的標識。第五十八頁，共九十八頁，2022年，8月28日環(huán)境設(shè)施的相關(guān)技術(shù)指標凈化室、凈化工作區(qū)域、潔凈環(huán)境按國家及部頒標準進行檢測。空氣潔凈度指標：檢測頻率及檢測方法。一次/月；空氣細菌檢測（沉降法）。級別≥0.5μm塵粒(個/L)≥5μm塵粒(個/L)活菌顆粒平均數(shù)(cfu/平板)100≤3.5≤0.0≤1.010000≤350.0≤2.5≤3.0第五十九頁，共九十八頁，2022年，8月28日

空氣和表面微生物監(jiān)測表面污染可直接使用含有營養(yǎng)試劑的表面接觸平板評估。空氣質(zhì)量可用含非選擇性瓊脂培養(yǎng)基(如平板計數(shù)瓊脂)的培養(yǎng)皿暴露于空氣中15分鐘的方法檢測。注意——別的方法也用于評估表面和空氣的污染。空氣監(jiān)測：3點5點

室內(nèi)面積不超過30m2，在對角線上設(shè)里、中、外三點，里、外點位置距墻1m；室內(nèi)面積超過30m2，設(shè)東、西、南、北、中5點，周圍4點距墻1m。采樣時，將含營養(yǎng)瓊脂的平皿（直徑9cm）置采樣點（約桌面高度），打開平皿蓋，使平皿在空氣中暴露15min。第六十頁，共九十八頁，2022年，8月28日無菌工作室的監(jiān)測至少每月一次監(jiān)測要有記錄SN0168規(guī)定放置15分鐘，每皿<15個菌落第六十一頁，共九十八頁，2022年，8月28日表面：工作臺：將經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5cm×5cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用一浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其內(nèi)涂抹10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。第六十二頁，共九十八頁，2022年，8月28日貯存設(shè)施或設(shè)備應足夠保存所有的實驗試劑和實驗樣本，并具備保持其完整性和不會改變其性狀的條件實驗室應有妥善處理廢棄樣品和有害廢棄物的設(shè)施和制度第六十三頁，共九十八頁，2022年，8月28日第六十四頁，共九十八頁，2022年，8月28日三、對設(shè)備的要求對影響檢測結(jié)果的設(shè)備應有相應的控制程序?qū)ι鏈卦O(shè)備（培養(yǎng)箱、干燥箱、水浴鍋、高壓滅菌器及冰箱）的溫度控制要有日常控制和使用記錄其它實驗設(shè)備（如天平、蒸餾水器、純水器、pH計、顯微鏡及微生物檢驗、鑒定儀等）也必須有相應的措施保證設(shè)備的運行正常和結(jié)果的準確。第六十五頁，共九十八頁，2022年，8月28日設(shè)備應有專人負責并定期維護，有檢查和校準的計劃使用的無菌工器具和器皿應能正確實施滅菌措施，并有明顯的標識與非無菌工具器和器皿加以區(qū)別第六十六頁，共九十八頁，2022年，8月28日滅菌設(shè)備第六十七頁，共九十八頁，2022年，8月28日四、對測量的可追溯性的要求實驗室必須保存有滿足實驗需要的標準菌種或參照標本。標準菌種或標本必須從認可的菌種或標本收集途徑獲得第六十八頁，共九十八頁，2022年，8月28日實驗室必須以文件化的程序管理菌種和對照標本管理記錄應包括：a.菌種或標本的收集途徑和日期。b.保存方式。c.確認記錄。d.傳代記錄。e.培養(yǎng)基及培養(yǎng)、保存條件等。所有的菌種都要有明確的標識以表明其名稱、標準號、接種日期和傳代數(shù)第六十九頁，共九十八頁，2022年，8月28日

第七十頁，共九十八頁，2022年，8月28日五、對實驗用培養(yǎng)基和檢測試劑的要求建立和保持有效的適合試驗范圍的培養(yǎng)基和檢測試劑的質(zhì)量控制程序?qū)ψ詡涞暮蜕虡I(yè)提供的培養(yǎng)基都需要評估，不得使用不符合要求的試劑、培養(yǎng)基和生物制品第七十一頁，共九十八頁，2022年，8月28日①對氧氣要求：專性需氧菌微需氧菌兼性厭氧菌專性厭氧菌②對CO2要求：5%CO2①水②碳源③氮源④無機鹽⑤生長因子有些細菌需要細菌生長條件4、對氣體要求3、PH2、溫度1、營養(yǎng)物質(zhì)第七十二頁，共九十八頁，2022年，8月28日

培養(yǎng)基的定義及其分類培養(yǎng)基：指人工方法合成的，專供細菌培養(yǎng)、分離、鑒定和保存用的混合營養(yǎng)物制品。

在實驗室中配制的適合微生物生長繁殖或累積代謝產(chǎn)物的任何營養(yǎng)基質(zhì)，都叫做培養(yǎng)基(Media)。由于各類微生物對營養(yǎng)的要求不同，培養(yǎng)目的和檢測需要不同，因而培養(yǎng)基的種類很多。我們可根據(jù)某種標準，將種類繁多的培養(yǎng)基劃分為若干類型。第七十三頁，共九十八頁，2022年，8月28日新購入的試劑、培養(yǎng)基和生物制品都要經(jīng)過適當?shù)尿炇蘸偷怯?，必要時要做驗證并記錄所有自備的培養(yǎng)基和試劑必須有配制記錄和內(nèi)容明確的標簽第七十四頁，共九十八頁，2022年，8月28日

一般質(zhì)量檢查生產(chǎn)廠必須提供的文件：

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培養(yǎng)基名稱、各種成分名稱和增補劑名稱以及產(chǎn)品編號；

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培養(yǎng)基使用前的pH；

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儲藏條件和有效期；

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所有性能評價和所用的測試菌種；

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技術(shù)數(shù)據(jù)清單；

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質(zhì)控證書；

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必要的安全及危害數(shù)據(jù)。實驗室檢查項目：

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培養(yǎng)基的名稱和批號；

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接收日期；

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有效期；

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包裝的情況和完整性。培養(yǎng)基的一般質(zhì)量檢查和儲藏第七十五頁，共九十八頁，2022年，8月28日脫水培養(yǎng)基及其補充劑的質(zhì)量管理：

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脫水培養(yǎng)基一般為粉狀物或顆粒狀，補充劑一般為膠狀或液體；

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采取先購先用的原則；

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實驗室應保存有效的培養(yǎng)基目錄清單：容器密閉性復查/首次開封日期/內(nèi)容物的感官檢查（粉末的流動性、均勻性、結(jié)塊情況和顏色變化等），任何受潮或物理性狀發(fā)生明顯改變的脫水培養(yǎng)基不應再使用。商品化現(xiàn)成培養(yǎng)基：

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應嚴格按照供應商提供的儲存條件、有效期和使用方法進行保存和使用

第七十六頁，共九十八頁，2022年，8月28日滅菌的培養(yǎng)基和試劑，要有正確的滅菌措施，并有明顯的無菌標識第七十七頁，共九十八頁，2022年，8月28日六、對檢測樣品的要求實驗室必須要有文件化的標準抽樣程序抽取的樣品必須保證于檢驗前不發(fā)生大的變化，避免污染和微生物含量發(fā)生大的變化第七十八頁，共九十八頁，2022年，8月28日抽樣工具和容器必須無毒無害和清潔無菌，不能影響樣品或受樣品影響樣品要有內(nèi)容明確的唯一性標識要有專門的樣品貯藏設(shè)備，保證樣品性質(zhì)的完整第七十九頁，共九十八頁，2022年，8月28日果蔬制品肉禽制品乳制品谷物制品水產(chǎn)制品第八十頁，共九十八頁，2022年，8月28日食品企業(yè)微生物實驗室的基本要求第八十一頁，共九十八頁，2022年，8月28日儀器和設(shè)施無菌室或超凈工作臺(當實驗在低污染環(huán)境中進行時)：以滿足檢驗量決定第八十二頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物常規(guī)儀器、設(shè)備：

a.恒溫培養(yǎng)箱:根據(jù)檢驗項目決定數(shù)量和類型

b.高壓滅菌設(shè)備：根據(jù)工作量需要選擇體積

c.顯微鏡：普通生物顯微鏡

d.天平：至少兩臺

e.蒸餾水器：或純水器

f.恒溫水浴鍋：

g.電冰箱：有冷凍和冷藏

h.電爐

I.均質(zhì)器第八十三頁，共九十八頁，2022年，8月28日其他設(shè)備和輔助設(shè)備：a.抗生素殘留初篩：離心機、振蕩器、均質(zhì)器、生化培養(yǎng)箱。b.貝類毒素檢測：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、均質(zhì)器、離心機、真空泵、水浴鍋、小鼠飼養(yǎng)設(shè)施

第八十四頁，共九十八頁，2022年，8月28日方法、標準1、國標：—20032、行標：如：SN01680169等

3、其它國家或國際組織認可的方法和標準：如：FDA、AOAC、ISO、NMKL4、非標準方法：由實驗室經(jīng)過驗證、比對后自已制定的方法。5、客戶要求的方法。第八十五頁，共九十八頁，2022年，8月28日標準物質(zhì)、試劑藥品標準菌株：ATCC(美國標準菌種收藏機構(gòu))、CCGMC(中國普通微生物菌種保藏管理中心)、CMCC(醫(yī)學微生物菌種保藏管理中心)、CICC(工業(yè)微生物菌種保藏管理中心)等。試劑、培養(yǎng)基：有效期內(nèi)使用、標識清楚。供應商資料完整。第八十六頁，共九十八頁，2022年，8月28日操作規(guī)范和安全措施檢驗人員：要有上崗培訓證明，通過比對、盲樣考核驗證檢驗員的檢測能力操作規(guī)程：全部方法和儀器要建立操作規(guī)程，并易于檢驗員取閱安全措施：保護人員安全、避免生物學危害、防止交叉污染。第八十七頁，共九十八頁，2022年，8月28日實驗記錄又稱原始記錄記錄的內(nèi)容至少包括：1，樣品的名稱和標識2，檢測項目3，檢測采用的方法4，實驗的主要步驟5，使用的主要培養(yǎng)基、試劑6，培養(yǎng)的溫度及時間7，實驗人員(包括復核人員)第八十八頁，共九十八頁，2022年，8月28日檢測報告檢測結(jié)果報告的主要內(nèi)容：1，樣品的名稱和來源以及樣品狀態(tài)的描述2，檢測采用的方法3，檢測的時間及檢測完成的時間4，檢測結(jié)果5，報告審核人員簽名第八十九頁，共九十八頁，2022年，8月28日微生物報告常見形式和意義菌落總數(shù)的報告：以計數(shù)結(jié)果報告，如：<10CFU/g(mL)

菌落形成單位CFU(colonyformingunit)大腸菌群的報告：以MPN值報告，如：<30MPN/100g(mL)、MPN/g(mL)；以定性結(jié)果報告，如：陰性/0.01g等最大可能數(shù)MPN(MostProbableNumber)致病菌的報告：