胰腺癌動(dòng)物模型設(shè)計(jì)方案及藤黃酸的藥效研究課件_第1頁
胰腺癌動(dòng)物模型設(shè)計(jì)方案及藤黃酸的藥效研究課件_第2頁
胰腺癌動(dòng)物模型設(shè)計(jì)方案及藤黃酸的藥效研究課件_第3頁
胰腺癌動(dòng)物模型設(shè)計(jì)方案及藤黃酸的藥效研究課件_第4頁
胰腺癌動(dòng)物模型設(shè)計(jì)方案及藤黃酸的藥效研究課件_第5頁
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胰腺癌動(dòng)物模型設(shè)計(jì)方案及藤黃酸作用胰腺癌的藥效研究思路背景介紹實(shí)驗(yàn)方法及材料的選擇造模過程模型特征藤黃酸的抗癌藥效研究背景介紹胰腺癌

是一種惡性程度很高的、轉(zhuǎn)移早、早期診斷困難的腫瘤,其發(fā)病率在近年呈逐年上升趨勢(shì)。臨床上尚無經(jīng)濟(jì)、有效的早期發(fā)現(xiàn)方法,也很難獲得新鮮的、不同時(shí)期的胰腺癌組織標(biāo)本,更不可能在臨床上觀察胰腺癌發(fā)生發(fā)展過程。因此建立合適的人胰腺癌動(dòng)物模型,在胰腺癌的治療研究中起著十分重要的作用。造模過程(禁食24h,不禁水)稱重后,10%水合氯醛(0.3ml/kg)腹腔注如麻醉經(jīng)上腹正中切口2cm進(jìn)腹,暴露出胰腺在普通環(huán)境中飼養(yǎng)大鼠6-0無損傷線荷包縫合包埋藥物于胰腺內(nèi)被膜分別置入6mg\9mg的DMBA晶體包于胰體尾部切開胰腺根據(jù)DMBA用量的不同,隨機(jī)分為胰腺癌模型組I(6mg,40只)和胰腺癌模型組Ⅱ(9mg,40只)

SD大鼠(150-200g,雄性)對(duì)照組:選取25只作對(duì)照組,僅行使胰腺被膜切開、6-0無損傷線包縫合胰腺。樣本采集:

隨時(shí)觀察大鼠精神狀況,每周稱大鼠體重。于術(shù)后1月、2月、3月、4月、5月、6月、7月分別處死胰腺癌模型組I、Ⅱ(5只/次)、對(duì)照組(3只/次),觀察腹腔及胰腺病變,切取胰腺標(biāo)本。模型特征外觀:

大體腫瘤0.5-1.5cm不等,灰白色,質(zhì)地堅(jiān)硬。腫塊向四周浸潤形成癌性粘連,幾乎所有癌癥大鼠伴有大量血性腹水。免疫組化染色:

每張切片分別觀察10個(gè)高倍視野,每個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞內(nèi)的免疫染色陽性細(xì)胞數(shù),計(jì)算出每張切片的陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù),按陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)分為小于10%為陰性,大于或等于10%為陽性。鏡下癌細(xì)胞呈腺管樣分布,腺腔大小不一,核異形明顯,并可見癌細(xì)胞巢,胰腺腺瘤鏡下瘤內(nèi)可見粗大的纖維間隔,實(shí)質(zhì)區(qū)細(xì)胞大小形態(tài)一致,囊性區(qū)常見片狀出血壞死,并見較多的乳頭狀結(jié)構(gòu)。藤黃酸的抗癌藥效研究藤黃是藤黃科植物)所分泌的干燥樹脂,藤黃酸(GA)是從藤黃中分離提取出來的一種抗癌有效成分。

藤黃味酸澀、有毒,具有攻毒蝕瘡、破血散結(jié)等功效,主治癰疽、腫毒、頑癬、惡瘡。

近年來研究認(rèn)為藤黃具有抗腫瘤作用,臨床上用于治療乳腺癌、淋巴肉瘤、皮膚癌均取得一定療效。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道藤黃酸對(duì)S180、肝癌、艾氏腹水癌等多種動(dòng)物移植性腫瘤均有明顯的抑制作用,且對(duì)正常的造血系統(tǒng)無明顯的影響,毒性較低,動(dòng)物耐受良好。

本實(shí)驗(yàn)通過觀察藤黃的有效成分藤黃酸對(duì)胰腺癌動(dòng)物模型的腫瘤生長抑制情況,以挖掘治療胰腺癌的新藥物。藤黃酸(GA)概述各組小鼠每天稱重,并分別于灌注后第3天、第7天、第14天開腹,用精密游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的最長徑a和垂直最短徑b,根據(jù)公式V=0.5×a×b2

計(jì)算腫瘤的體積,并繪制腫瘤生長曲線;

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),處死大鼠,剝離腫瘤,稱取瘤重,根據(jù)以下公式計(jì)算腫瘤生長抑制百分率:

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