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考綱要求熱點提示1.酶活力測定的一般原理和方法2.酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用3.制備和應(yīng)用固定化酶1.累計生產(chǎn)過程中應(yīng)用果膠酶的原理,注意事項及最適用量的探究2.固定化酶、固定化細(xì)胞的制備及在生產(chǎn)中的應(yīng)用高考要點基礎(chǔ)知識小比較:①果膠酶能催化果膠成為可溶性半乳糖醛酸。②纖維素酶能催化纖維素為纖維二糖,進(jìn)一步水解為葡萄糖。小常識:食物纖維的主要成分是纖維素和果膠,它們不能被人體直接吸收利用,由于人體內(nèi)缺乏消化它們的纖維素酶和果膠酶,所以人體不能從食物纖維中獲得能量。小討論:①容易失活,通常對強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫和有機(jī)溶劑非常敏感。②很難回收,不能被再次利用,提高生產(chǎn)成本。③會影響產(chǎn)物的純度,降低產(chǎn)品質(zhì)量。1.影響果汁產(chǎn)量的物質(zhì)纖維素和果膠是組成水果的重要物質(zhì),這兩種物質(zhì)的存在使制作果汁時存在兩個問題:一是果肉的出汁率低,耗時長;二是榨取的果汁渾濁、黏度高,容易發(fā)生沉淀。知識熱點2.處理方法——酶解法常用的酶及其作用特點如下:組成本質(zhì)作用果膠酶多聚半乳糖醛酸酶果膠分解酶果膠酯酶蛋白質(zhì)催化果膠分解成為可溶性半乳糖醛酸纖維素酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶蛋白質(zhì)1.果膠酶和纖維素酶都是復(fù)合酶,并不特指某一種酶,而是一類酶的總稱。2.如果隨著酶用量的增加,過濾到的果汁的體積也增加,說明酶的用量不足;當(dāng)酶的用量增加到某個值后,再增加酶的用量,過濾到的果汁的體積不再改變,說明酶的用量已經(jīng)足夠,那么這個值就是酶的最適用量?!纠?】關(guān)于果膠酶的敘述中錯誤的是()A.組成植物細(xì)胞壁的主要成分是果膠和纖維素,果膠主要分布在細(xì)胞的初生壁和胞間層B.果膠有多種,果膠酶也有多種,如半乳糖醛酸酶、果膠分解酶等C.果膠酶在食品工業(yè)中有廣泛的用途,在其他方面則無用處,體現(xiàn)了酶的專一性D.果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶配合使用,可分解植物細(xì)胞壁中的果膠和纖維素,促使淀粉、脂質(zhì)、維生素和蛋白質(zhì)的釋放,以提高飼料的營養(yǎng)價值解析:果膠酶的作用是分解細(xì)胞壁中的果膠,可以使果汁產(chǎn)量增加,提高透明度,有半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等,在食品工業(yè)如制作果汁、提高葡萄酒質(zhì)量等方面作用很大,也常與纖維素酶等共同使用,提高飼料營養(yǎng)和降低飼料黏度,促進(jìn)飼料在動物消化道內(nèi)的消化等作用。因此C錯誤。答案:C?變式1:加工橘子罐頭,采用酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò)),會產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò),可減少污染。下列生長在特定環(huán)境中的4類微生物,可以大量產(chǎn)生所用酶的有()A.生長在麥麩上的黑曲霉B.生長在酸奶中的乳酸菌C.生長在棉籽殼上的平菇D.生長在木屑上的木霉解析:由題干信息知:所用的酶為纖維素酶。黑曲霉、平菇、木霉,可以產(chǎn)生纖維素酶,來分解麥麩、棉籽殼中的纖維素。而生長在酸奶中的乳酸菌不產(chǎn)生纖維素酶。答案:ACD1.基礎(chǔ)知識加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,其他酶同樣可以將大分子的物質(zhì)水解成小分子的物質(zhì),使污漬容易從衣物上脫落。提醒:對于絲綢等主要成分為蛋白質(zhì)的面料,在加入堿性蛋白酶的洗衣粉作用下,衣物同樣會受到損傷,因此蛋白質(zhì)類絲織物不能用蛋白酶洗衣粉。2.探究不同種類加酶洗衣粉的洗滌效果(1)實驗原理:酶的催化作用具有專一性,復(fù)合酶洗衣粉加入的酶制劑種類較多,與單一加酶洗衣粉相比,對各種污漬都有較好的洗滌效果。(2)實驗變量①自變量:加酶洗衣粉。②無關(guān)變量:其他條件相同且適宜(如溫度、pH等)。(3)實驗步驟步驟燒杯編號ⅠⅡⅢ注入自來水500mL500mL500mL加入物質(zhì)(等量)奶漬布奶漬布奶漬布控制水溫37℃37℃37℃加入洗衣粉(等量)蛋白酶洗衣粉復(fù)合酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉用玻璃棒攪拌5min5min5min觀察實驗現(xiàn)象1.在比較普通洗衣粉和加酶洗衣粉的洗滌效果的實驗中,實驗中自變量為洗衣粉的種類,設(shè)計時應(yīng)遵循單一變量原則、對照原則,有效控制其他變量,如水的用量、污染物的量、所用實驗的布的質(zhì)地、大小、兩種洗衣粉的用量、攪拌及洗滌時間等。2.在使用加酶洗衣粉時不但要考慮最佳洗滌效果的條件,如最適溫度、pH,還要考慮衣物的承受力,如蛋白酶洗衣粉不能洗滌絲綢類衣物;也要考慮洗滌成本問題,因污漬的成分比較復(fù)雜,一般選擇復(fù)合加酶洗衣粉,以減少用量。3.該實驗探究多種加酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果,也可以探究同一種加酶洗衣粉對于不同污漬的洗滌效果?!纠?】加酶洗衣粉中的“酶”有多種,對各種污漬要考慮其不同情況選用不同的加酶洗衣粉,主要原因是 ()A.酶具有多樣性B.酶具有高效性C.酶具有專一性 D.酶易受環(huán)境影響解析:生活中各種污漬其成分有很大差別,如油漬主要是脂質(zhì),血漬主要為蛋白質(zhì),從酶的專一性出發(fā),購買時應(yīng)有所區(qū)別。答案:C?變式2:下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述正確的是()①加酶洗衣粉能將衣服上的蛋白質(zhì)、脂肪等水解成溶于水的小分子物質(zhì)②加酶洗衣粉最常用的酶制劑是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶③使用加酶洗衣粉時一般先用開水浸開,然后調(diào)至適宜溫度④使用加酶洗衣粉可減少對環(huán)境的污染⑤加酶洗衣粉中的酶被特殊的化學(xué)物質(zhì)層層包裹,遇水后溶解⑥實際生活中,用加酶洗衣粉的水溫在25℃~35℃之間較適宜⑦溫度過高或過低均不宜用加酶洗衣粉⑧使用加酶洗衣粉時應(yīng)注意衣服的承受能力A.①②③④⑤⑥⑦⑧ B.①②④⑤⑥⑦⑧C.①②③④⑤⑥⑦D.①②③④⑤⑦⑧解析:依據(jù)加酶洗衣粉特點分析回答。③中開水會使酶失活。答案:B1.固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)。2.將酶或細(xì)胞固定化的方法提醒:酶更適合采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化,而細(xì)胞多采用包埋法固定化。這是因為細(xì)胞個大,而酶分子很小,個大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合,而個小的酶容易從包埋材料中漏出。3.固定化細(xì)胞常用的載體材料常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。4.固定化酶的優(yōu)點:①易接觸;②易分離;③反復(fù)利用。5.固定化酶的應(yīng)用實例(1)固定化酶的反應(yīng)柱示意圖:將酶固定在一種顆粒狀的載體上,再將這些酶顆粒裝到一個反應(yīng)柱內(nèi),柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板。酶顆粒無法通過篩板的小孔,而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。(2)利用固定化酶技術(shù)生產(chǎn)高果糖漿的實例高果糖漿的生產(chǎn)需要使用葡萄糖異構(gòu)酶,它能將葡萄糖轉(zhuǎn)化成果糖。生產(chǎn)過程中,將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入,使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱,與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸,轉(zhuǎn)化成果糖,從反應(yīng)柱的下端流出。6.制備固定化酵母細(xì)胞(1)操作流程酵母細(xì)胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞→沖洗→發(fā)酵。(2)實驗結(jié)果①觀察凝膠珠的顏色和形狀:如果制作的凝膠珠顏色過淺,呈白色,說明海藻酸鈉的濃度偏低,固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說明海藻酸鈉的濃度偏高,制作失敗,需要再作嘗試。②觀察發(fā)酵的葡萄糖溶液:利用固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精,可以看到產(chǎn)生了很多氣泡,同時會聞到酒味。7.直接使用酶、固定化酶、固定化細(xì)胞的比較直接使用酶固定化酶固定化細(xì)胞酶的種數(shù)一種或幾種一種一系列酶常用載體高嶺土、皂土、硅膠、凝膠明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺制作方法化學(xué)結(jié)合法固定化、物理吸附法固定化包埋法固定化是否需要營養(yǎng)物質(zhì)否否是反應(yīng)底物各種物質(zhì)(大分子、小分子)各種物質(zhì)(大分子、小分子)小分子物質(zhì)直接使用酶固定化酶固定化細(xì)胞催化反應(yīng)單一或多種單一一系列缺點①對環(huán)境條件非常敏感,易失活②難回收,成本高,影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列的酶促反應(yīng)反應(yīng)物不易與酶接近,尤其是大分子物質(zhì),反應(yīng)效率低優(yōu)點催化效率高、耗能低、污染低①既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離②可以反復(fù)利用成本低、操作容易【例3】下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述,正確的是()A.固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯B.固定化酶的應(yīng)用中,要控制好pH、溫度和溶解氧C.利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥,需提供適宜的營養(yǎng)條件D.利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵,糖類的作用只是作為反應(yīng)底物解析:固定化酶的使用要控制好pH、溫度,但與氧氣無關(guān)。固定化酶的使用不需要適宜的營養(yǎng)條件。葡萄糖在固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵中不僅作為底物,還可以為酵母細(xì)胞提供營養(yǎng)和能量。答案:A評析:本題考查固定化酶技術(shù)的具體應(yīng)用。?變式3:固定化酶的優(yōu)點是()A.有利于提高酶活性B.有利于產(chǎn)物的純化C.有利于提高反應(yīng)速度D.有利于對酶發(fā)揮作用解析:制作固定化酶的目的一是能夠順利從發(fā)酵產(chǎn)物中把酶分離出來,二是使酶反復(fù)利用。從題目中看出,選項B是正確的。答案:B1.我國水果生產(chǎn)發(fā)展迅速,由于收獲的季節(jié)性強(qiáng),易造成積壓,腐爛變質(zhì),為了解決上述問題且滿足不同人群的需求,可以加工制作果汁、果酒、果醋等。在果汁生產(chǎn)中用到果膠酶,某課題研究小組為了探究果膠酶的某些特性,進(jìn)行了如下實驗:隨堂練習(xí)(1)實驗方法:如圖中所示的順序進(jìn)行操作。(2)實驗結(jié)果:對照組與實驗組進(jìn)行了相同時間的實驗,結(jié)果如圖所示:①圖中自變量是溫度,除此之外還可用________表示。A.酶的濃度 B.蘋果泥的量C.水的加入量 D.pH②圖中的縱坐標(biāo)還可用____________來表示。③實驗小組改變了實驗條件后重復(fù)做實驗,得到曲線乙,蘋果汁的澄清度最高點對應(yīng)的橫坐標(biāo)是同一位置的原因是__________________________。④步驟a中果膠酶和蘋果泥分別裝在不同試管中,恒溫的目的是__________________。解析:果膠酶的活性受溫度、pH等條件的影響,而與底物的量、酶的濃度和水的加入量沒有關(guān)系,所以每一種酶的最適pH和最適溫度是一定的。在衡量實驗結(jié)果的指標(biāo)中有兩種,一是果汁的量,另一個是果汁的澄清度。為使實驗中達(dá)到相應(yīng)的設(shè)計溫度,必須使酶與底物分別保溫達(dá)到要求后才能混合。答案:(2)①D②蘋果汁的體積③同一種酶的最適溫度是一定的,不會因酶的濃度、底物量不同而改變④保證底物和酶在混合時的溫度是相同的誤區(qū)警示:上題中(2)中的第④題易誤認(rèn)為酶與底物混合后再保溫,在探究pH對酶活性影響時也應(yīng)注意在混合前酶與底物的pH應(yīng)先達(dá)到實驗要求的pH。2.(1)商品化植酸酶主要來自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過程中,常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板,植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生________,可根據(jù)其大小選擇目的菌株,所得菌株需要進(jìn)一步測定植酸酶活性?;钚詼y定可以植酸鈉作為底物,活性可用一定條件下單位時間的________表示。(2)利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖:Ⅰ中的主要成分為________;Ⅱ中包含植酸酶等多種蛋白質(zhì)。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)。(3)為構(gòu)建基因工程菌,可用PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應(yīng)包括多次循環(huán),每次循環(huán)包括三步:________________________。反應(yīng)過程中打開模板DNA雙鏈的方法是__________________________。(4)除植酸酶外,微生物還能應(yīng)用在哪些酶的生產(chǎn)中?(至少寫兩種)解析:當(dāng)植酸鈣被植酸酶分解以后,會在平板上出現(xiàn)透明圈。植酸酶活性高低可以用單位時間內(nèi)底物減少量來表示。(2)透析的目的是將酶與
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