高速逆流色譜儀課件

學(xué)號：1姓名：吳智慧高速逆流色譜儀內(nèi)容簡介高速逆流色譜的原理及特點高速逆流色譜分離系統(tǒng)高速逆流色譜分離效果的影響因素及分離前準(zhǔn)備高速逆流色譜技術(shù)發(fā)展高速逆流色譜技術(shù)應(yīng)用高速逆流色譜儀的設(shè)計原理HSCCC分離原理利用一種特殊的流體動力學(xué)現(xiàn)象使互不混溶的兩相溶劑(固定相和流動相)在螺旋管中高效地接觸、混合、分配和傳遞其中固定相以一種相對均勻的方式分布在一根聚四氟乙烯管繞成的螺旋管中流動相以一定的速度通過固定相，并按照被分離物質(zhì)分配系數(shù)的不同依次洗脫而獲得分離HSCCC與HPLC的分離技術(shù)特征比較參數(shù)HSCCCHPLC固定相液體機理液-液分配（簡單）分配、吸附、離子交換、體積排阻等（復(fù)雜溶質(zhì)與固定相作用與液體固體相的整個體積相接觸在固體相與固體支撐體的界面相相互作用上樣量高中等分離效率低高操作容易復(fù)雜費用便宜昂貴危險性高速運轉(zhuǎn)產(chǎn)生一些機械故障安全液體傳輸系統(tǒng)傳輸泵

在高速逆流色譜分離時，通常是先通過傳輸泵將固定相注滿分離柱管，然后在一定的轉(zhuǎn)速下將流動相泵入分離柱。待分離柱中固定相與流動相達(dá)到平衡后，將一定量的試樣通過切換閥由流動相帶入分離柱中通過流動相的連續(xù)推力實現(xiàn)樣品的分離。進樣閥通過六通閥或旋轉(zhuǎn)進樣閥一次性注入試樣。在分離過程中試樣溶液必須以完整的試樣塞擠入或插入流動相載流中再以流動相帶入分離柱連接管道因分離量以及分離規(guī)模的不同而有差異分析性HSCCC儀：內(nèi)徑為0.8mm-1.0mm，其中0.85mm最為常用。制備型HSCCC儀：螺旋管內(nèi)徑可達(dá)到2.6mm或更大，柱體積相應(yīng)可達(dá)3L管材一般為聚四氟乙烯連接方式主要為壓管螺絲固定和插入鏈分離柱系統(tǒng)分離系統(tǒng)柱是色譜儀的核心部件，柱系統(tǒng)的連接方式以及柱系統(tǒng)內(nèi)螺旋管的纏繞方式?jīng)Q定了一起的分離性能。目前柱系統(tǒng)的連接方式主要包括：單柱系統(tǒng)雙柱系統(tǒng)三柱系統(tǒng)檢測器

幾乎所有的定量分析儀都可作為高速逆流色譜儀的檢測器。主要包括：紫外-可見光度檢測器（UV-Vis）傅里葉紅外光譜檢測器（FTIR）薄層色譜檢測器（TLC）近年新出現(xiàn)質(zhì)譜（MS）HSCCC-HPLC-DAD連用分離HSCCC分離效果影響因素來源硬件部分的影響，如螺旋管柱的幾何設(shè)計、柱徑及柱體積等溶劑體系操作條件如儀器轉(zhuǎn)速、方向、流動相的洗脫方式、流速及柱溫等。試樣準(zhǔn)備（1）將試樣注入到高效逆流色譜體系之前需對其進行必要的前處理。如稀釋、溶解、過濾。（2）高粘度或高濃度的試樣，需要先用體系中流動相或固定相進行溶解稀釋，以避免固定相的大量流失。溶劑體系的選擇（1）能夠形成穩(wěn)定的兩相溶劑體系（2）不造成樣品的分解與變性（3）足夠高的樣品溶解度（4）樣品在系統(tǒng)中有合適的分配系數(shù)值（5）固定相能實現(xiàn)足夠高的保留HCSSS的溶劑體系選擇步驟（1）盡可能獲取足夠多的有關(guān)被分離樣品的信息。（2）選擇一選擇另外兩種溶劑種最佳溶劑是樣品充分溶解于該溶劑中。（3）選擇另外兩種溶劑。其中一種的極性比最佳溶劑強，另一種比最佳溶劑弱，最佳溶劑后，可以形成穩(wěn)定的兩相溶劑體系。

對于未知樣品選擇溶劑體系方法：（1）參比已知的溶劑體系（2）測