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納豆菌細(xì)胞固定化材料優(yōu)化選擇的研究

主講人:姚承理StudyonTheImmobilizingTechnologyofBacillusNattoCellstoProduceNattokinase什么是納豆

納豆源于中國(guó),納豆類似中國(guó)的發(fā)酵豆、怪味豆。納豆傳入日本后,根據(jù)日本的風(fēng)土發(fā)展了納豆。古書(shū)記載有:“納豆自中國(guó)秦漢以來(lái)開(kāi)始制作。”吸附法表面吸附法交聯(lián)法操作簡(jiǎn)單,符合細(xì)胞的生理?xiàng)l件,且不影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。但是吸附容量小,結(jié)合強(qiáng)度低。所以此法在工業(yè)上尚未得到推廣應(yīng)用。固定化細(xì)胞的方法包埋法共價(jià)結(jié)合法細(xì)胞聚集法用微生物細(xì)胞吸附于固體物質(zhì)表面的天然傾向制備固定化細(xì)胞某些細(xì)胞能夠分泌出高分子化合物,使細(xì)胞發(fā)生吸附作用,有形成聚集體或絮凝體顆粒的傾向。特點(diǎn)吸附法交聯(lián)法穩(wěn)定性好,但反應(yīng)條件苛刻,操作復(fù)雜,而且固定化細(xì)胞的死亡率非常高。固定化細(xì)胞的方法包埋法共價(jià)結(jié)合法利用細(xì)胞表面的反應(yīng)基團(tuán)與活化的無(wú)機(jī)或有機(jī)載體間反應(yīng)形成共價(jià)鍵而成為固定化細(xì)胞。特點(diǎn)吸附法交聯(lián)法所使用化學(xué)試劑的毒性可能會(huì)破壞細(xì)胞,損壞細(xì)胞的活性,故此法應(yīng)用較少。固定化細(xì)胞的方法包埋法共價(jià)結(jié)合法利用雙功能或多功能試劑直接與細(xì)胞表面的基團(tuán)反應(yīng),使細(xì)胞彼此交聯(lián),形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)而制得固定化細(xì)胞。特點(diǎn)吸附法凝膠包埋法交聯(lián)法操作簡(jiǎn)單,符合細(xì)胞的生理?xiàng)l件,且不影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。但是吸附容量小,結(jié)合強(qiáng)度低。所以此法在工業(yè)上尚未得到推廣應(yīng)用。固定化細(xì)胞的方法包埋法共價(jià)結(jié)合法微囊化法將細(xì)胞包埋在高分子凝膠的細(xì)胞網(wǎng)格中。特點(diǎn)吸附法凝膠包埋法交聯(lián)法具有提高細(xì)胞密度、降低培養(yǎng)是對(duì)細(xì)胞的剪切力、與液體培養(yǎng)相近的培養(yǎng)環(huán)境、細(xì)胞可重復(fù)使用的優(yōu)點(diǎn)。固定化細(xì)胞的方法包埋法共價(jià)結(jié)合法微囊化法把分散的細(xì)胞等小物質(zhì)包封在由一層膜構(gòu)成的微膠囊中的方法。特點(diǎn)菌體一定濃度的包埋劑混合滴入交聯(lián)劑中進(jìn)行交換取出固定化細(xì)胞小球,無(wú)菌水沖洗后備用具體操作SA與PVA混合固定化將融化的SA與PVA混合物和菌懸液混合,用注射器滴入硼酸、CaCl2溶液中,形成球狀固定化細(xì)胞。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析序號(hào)硼酸濃度/%SA濃度/%PVA濃度/%CaCl2濃度/%酶活mm2/15μL使用批次14111663.79425111687.926350.511451.675440.511419.682551.511662.91464211452.835741.59461.723851.5126113.844從上表可以看出,2號(hào)的活性較高且使用次數(shù)最多,因此這是最好的方案,也就是當(dāng)硼酸的濃度為5%,SA的濃度為1%,PVA的濃度為11%,CaC

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