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文檔簡介
實驗三
細菌芽孢染色法一、實驗?zāi)康呐c要求:1.學(xué)習(xí)并掌握芽孢染色法2.了解芽孢桿菌的形態(tài)特征,注意觀察芽孢的形態(tài)、大小、著生位置二、實驗原理:芽孢壁厚、透性差、不易著色,無法用單染色的方法使其著色用著色力強的染色劑孔雀綠或石炭酸復(fù)紅,在加熱條件下染色,使染料不僅進入菌體也可進入芽孢內(nèi),進入菌體的染料經(jīng)水洗后被脫色,當(dāng)用對比度大的復(fù)染色劑染色后,芽孢仍保留初染劑的顏色,是芽孢和菌體更易區(qū)分。
三、材料儀器:
1.儀器:顯微鏡、試管、電爐等
2.實驗材料:菌種:枯草芽孢桿菌巨大芽孢桿菌染液:苯酚品紅黑墨水
四、內(nèi)容及方法:1.制備菌懸液:加10滴無菌水于小試管內(nèi),用接種環(huán)挑取2-3環(huán)菌苔于試管內(nèi),攪拌均勻,制成濃的菌懸液。2.染色:加苯酚品紅染液15-18滴于小試管內(nèi),并使其與菌液混合均勻,然后將試管置于沸水浴的燒杯中,加熱染色6-8分鐘。
3.涂片固定:用接種環(huán)挑取試管底部菌液數(shù)環(huán)于潔凈載玻片上,涂成薄膜,然后將涂片通過火焰3次溫?zé)峁潭ā?.脫色:95%乙醇脫色,直至流出的水無紅色為止。5.水洗6.復(fù)染:用黑墨水染背景7.鏡檢:干燥后用油鏡觀察。
五、實驗結(jié)果
芽孢結(jié)果繪圖芽孢菌形態(tài)六、思考題在芽孢染色中
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