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文檔簡(jiǎn)介
棒狀薄層色譜簡(jiǎn)介及在分析脂類組成上的應(yīng)用周波相關(guān)概念薄層色譜(thinlayerchromatography,TLC)是一種簡(jiǎn)便、快速的微量色譜方法原理:組分不斷被吸附劑(固定相)吸附,又被展開劑(流動(dòng)相)溶解而解吸附,且隨之向前移動(dòng)。組成吸附劑(固定相)展開劑(流動(dòng)相)種類:常規(guī)的薄層色譜、高效薄層色譜、棒狀薄層色譜、加壓薄層色譜、膠束薄層色譜等等流出曲線和色譜峰棒狀薄層色譜構(gòu)成原理板薄層棒薄層
色譜棒(組份分離工具)氫火焰離子化檢測(cè)技術(shù)棒狀薄層色譜C:\DocumentsandSettings\zhoubo\桌面\色譜分離的過程原理.swf氫火焰離子化檢測(cè)技術(shù)1976年英國(guó)Padley
發(fā)明了棒狀薄層色譜/氫火焰掃描法
原理:化合物燃燒裂解,形成離子碎片和自由電子,再由電極收集它們并產(chǎn)生與化合物量成正比的電流信號(hào)而測(cè)出各物質(zhì)的含量利用棒狀色譜分析脂類組成儀器:雅特隆薄層色譜分析儀
展開劑:正己烷:乙醚:甲酸=42:28:0.3(分析純即可)具體展開劑的選擇依據(jù)不同樣品而定分析步驟前期處理:1、采用Folch法取得總脂2、待測(cè)樣品用氯仿稀釋至10~20mg/ml流程圖空白掃描點(diǎn)樣展開分離干燥脫除展開劑掃描檢測(cè)原點(diǎn)掃描相關(guān)參數(shù)
1.空白掃描次數(shù)根據(jù)色譜棒的實(shí)際情況大致為3—5次2.點(diǎn)樣時(shí)用微量點(diǎn)樣器吸取1ul3.展開槽中放入70ml左右展開劑,用濾紙潤(rùn)濕,形成飽和蒸汽4.在60℃下,烘干5分鐘5.氫火焰,氫氣流量為160ml/min,空氣流量2L/min數(shù)據(jù)處理和分析根據(jù)顯示的組份離子流圖上峰的保留時(shí)間和出現(xiàn)的先后順序,比照標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間和先后順序確定種類燃燒離化后得到對(duì)應(yīng)的組份離子流圖,對(duì)出現(xiàn)的各組分對(duì)應(yīng)的峰,積分得到峰與峰基線所包圍的面積成為峰面積。成分(%)=(峰面積/總峰面積)x100%事例注意事項(xiàng)由于溫度以及展開時(shí)間等的影響實(shí)際操作中每次得到的離子流圖與標(biāo)準(zhǔn)品的離子流圖有著差異,可以根據(jù)峰出現(xiàn)的先后順序確定組分。樣品濃度必須控制在10—20mg/ml,點(diǎn)樣斑控制在3
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