抗白色念珠菌感染中納米技術(shù)的作用及運(yùn)用,預(yù)防醫(yī)學(xué)論文

抗白色念珠菌感染中納米技術(shù)的作用及運(yùn)用,預(yù)防醫(yī)學(xué)論文摘要：白色念珠菌(Candidaalbicans,C.albicans)在引發(fā)血源性感染的病原微生物中位列第四，全國(guó)每年由C.albicans引起的各類感染性疾病高達(dá)千萬(wàn)例。該菌極易附著于植入醫(yī)療器械的外表，構(gòu)成堅(jiān)固生物被膜阻礙藥物和免疫系統(tǒng)的進(jìn)攻，給治療帶來(lái)了極大難度。同時(shí)，近年來(lái)C.albicans的高流行率和不斷加強(qiáng)的耐藥性使C.albicans的治療面臨更大的挑戰(zhàn)。納米材料因其具有低毒性、尺寸效應(yīng)、良好的抑菌性，以及促進(jìn)光動(dòng)力抗菌作用等成效被廣泛應(yīng)用于抗感染治療。本文綜述了近年來(lái)納米技術(shù)在C.albicans預(yù)防、診斷和治療中應(yīng)用的研究進(jìn)展，并討論其作用機(jī)制，為納米技術(shù)抗C.albicans感染的進(jìn)一步研究提供參考。本文關(guān)鍵詞語(yǔ)：納米技術(shù);白色念珠菌;抗感染;應(yīng)用;Abstract：Candidaalbicans(C.albicans)isthefourthmostcommonpathogenicmicroorganismthatcausesblood-borneinfections,and10millionsofvariousinfectiousdiseasesarecausedbyC.albicansinChinaeveryyear.However,C.albicanscaneasilyattachtothesurfaceofimplantablemedicaldeviceandformastrongbiofilmthatresiststheeffectsofdrugsandtheimmunesystem,soitisextremelydifficulttobekilled.Atthesametime,thetreatmentofC.albicansalsofaceahugechallengeduetoitshighprevalencerateandincreasingresistance.Nanomaterialsarewidelyusedintheantibacterialfieldbecauseoftheirlowertoxicity,sizeeffect,goodantibacterialpropertiesandenhancementtophotodynamicantimicrobialchemotherapy.Inthispaper,wesummarizedtheadvanceandpossiblemechanismofnanotechnologyintheprevention,diagnosisandtreatmentofC.albicans,providingareferenceforthefurtherresearchofnanotechnologyagainstC.albicans.Keyword：nanotechnology;Candidaalbicans;antibacterialeffects;application;白色念珠菌(Candidaalbicans,C.albicans)又叫白假絲酵母菌，是一種黏附寄生于人體口腔、陰道、胃腸道等黏膜及皮膚的常見真菌[1]，同時(shí)又是一種條件致病菌，某些因素(如pH改變、機(jī)體免疫功能下降、廣譜抗生素和激素使用過(guò)度)會(huì)使正常菌落所處環(huán)境平衡被打破，C.albicans可迅速增殖，并轉(zhuǎn)化為有強(qiáng)致病能力的菌絲體形態(tài)，侵入黏膜和組織深層或進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，引發(fā)淺表性、深部或系統(tǒng)性的C.albicans感染[2]。在全球范圍內(nèi)，念珠菌引發(fā)的感染病癥每年約4000萬(wàn)例，華而不實(shí)C.albicans是最常見也最致命的，約占念珠菌感染病例的50%～70%，總死亡率為43%[3,4]。隨著廣譜抗生素的濫用，以及癌癥、糖尿病、艾滋病等使人免疫能力低下病癥的盛行，C.albicans感染發(fā)病率逐年增加，并且深部C.albicans感染成為免疫抑制宿主死亡的主要原因之一[3]。除此之外，C.albicans常黏附于植入體內(nèi)的醫(yī)療器械如導(dǎo)管、支架、起搏器、人工心臟瓣膜和膝蓋、義齒等的外表，由生物醫(yī)學(xué)設(shè)備周圍的體液給菌體提供營(yíng)養(yǎng)，并構(gòu)成生物被膜[5]。然而，生物被膜不僅能降低C.albicans對(duì)藥物的敏感性，使其對(duì)抗真菌藥的抵御能力提高10～1000倍，還可加強(qiáng)菌體在宿主免疫系統(tǒng)攻擊下的存活能力[6]。當(dāng)前藥物治療仍然是抗C.albicans感染的主要手段，但是傳統(tǒng)抗真菌藥物種類很少，常用藥物僅有唑類、多烯類及棘白菌素類等，且其肝腎毒副作用強(qiáng)、價(jià)格昂貴，大多對(duì)生物被膜的作用有限，其廣泛應(yīng)用和無(wú)選擇性的使用更是導(dǎo)致諸多耐藥菌株的產(chǎn)生[7]。因而，迫切需要研究出新的抵抗C.albicans的治療策略。納米顆粒因其尺寸微小和比外表積較大，更易透過(guò)生物膜與真菌互相作用，近年來(lái)被廣泛應(yīng)用于抗真菌研究[8,9,10]。與傳統(tǒng)抗菌劑相比，以納米銀(silvernanoparticles,AgNPs)為代表的一些金屬納米粒子不僅具有良好的抗菌活性，而且其抗菌譜更廣、抗菌更持久、化學(xué)性能更穩(wěn)定，不易產(chǎn)生耐藥性[11]。因此大量科研人員將納米技術(shù)引入C.albicans的診治中，期望借助納米技術(shù)降低C.albicans的感染機(jī)率，改善其耐藥性，增加藥物的療效和安全性，為設(shè)計(jì)新型抗真菌藥物提供方向。1、納米技術(shù)在預(yù)防C.albicans感染中的應(yīng)用不治已病治未病是中國(guó)最早的醫(yī)學(xué)典籍(黃帝內(nèi)經(jīng)〕中提出的觀點(diǎn)，也是中醫(yī)藥的精華真髓理論。西醫(yī)則稱之為第一級(jí)預(yù)防亦稱病因預(yù)防，即在疾病發(fā)生之前，針對(duì)健康影響因素采取措施，防止或減少疾病發(fā)生。疫苗是預(yù)防C.albicans感染的重要策略之一，近年來(lái)有諸多學(xué)者對(duì)其進(jìn)行了研究。1.1、在研制疫苗方面的應(yīng)用常見的真菌疫苗有全菌疫苗、蛋白疫苗、糖結(jié)合疫苗及核酸疫苗等，但大多數(shù)仍停留在實(shí)驗(yàn)室階段，當(dāng)前還沒(méi)有被允許投入臨床使用的真菌疫苗[12]，所以對(duì)C.albicans疫苗的研制還是現(xiàn)前階段的重要任務(wù)。Carneiro等[13]采用單油酸甘油酯作為穩(wěn)定劑制備了雙十八烷基二甲基溴化銨脂質(zhì)體，作為C.albicans細(xì)胞壁蛋白的載體，該脂質(zhì)體制劑性質(zhì)穩(wěn)定，無(wú)細(xì)胞毒性，可被巨噬細(xì)胞攝取。該研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，制備的納米脂質(zhì)體顯示出良好的佐劑活性，可誘導(dǎo)免疫小鼠表現(xiàn)出強(qiáng)烈的體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答。與僅使用細(xì)胞壁蛋白單獨(dú)免疫的小鼠相比，該系統(tǒng)可誘導(dǎo)高水平的白介素-17和干擾素-，講明該納米脂質(zhì)體對(duì)輔助型T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答有極化作用，進(jìn)而確認(rèn)其具有免疫佐劑的潛力。關(guān)麗影[14]將殼聚糖(chitosan,CS)與C.albicans熱休克蛋白90重組質(zhì)粒制備成CS-核酸疫苗納米粒，經(jīng)皮下兩點(diǎn)注射的方式免疫小鼠，發(fā)現(xiàn)制成的CS納米粒子不僅能夠幫助重組質(zhì)粒抵御酶解，還可使免疫小鼠產(chǎn)生抗重組蛋白的特異性抗體，同時(shí)對(duì)核酸疫苗還起到了明顯的緩釋作用。盡管這方面研究不是很多，但免疫效果比擬明顯，因而，為預(yù)防C.albicans或其它真菌感染提供了新的思路。1.2、在預(yù)防植入性生物材料被C.albicans污染中應(yīng)用C.albicans是人口腔中的常見共生真菌，非常容易黏附于植入材料如義齒或?qū)Ч芡獗?，并在其上?gòu)成生物膜，這是C.albicans感染的常見途徑之一。然而，一旦構(gòu)成生物膜，C.albicans對(duì)抗機(jī)體免疫力及抗真菌藥物的能力就會(huì)大大加強(qiáng)，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體反復(fù)感染。臨床上常用手術(shù)刮除或藥物治療等手段除去植入性醫(yī)學(xué)生物材料外表的生物膜，但這些方式方法受花費(fèi)高、毒性強(qiáng)、療程長(zhǎng)和耐藥性等限制[2]。因而，對(duì)常用的植入材料進(jìn)行改進(jìn)來(lái)抑制病原菌黏附和菌膜構(gòu)成是預(yù)防C.albicans感染的有效策略之一。常見的改進(jìn)方式有兩種。(1)材料中摻雜不同物質(zhì)。如Li等[15]探尋求索了在丙烯酸樹脂基托材料中參加AgNPs之后對(duì)C.albicans的抵御作用，結(jié)果表示清楚參加AgNPs后不僅能夠通過(guò)AgNPs本身的抗真菌作用抑制生物被膜的產(chǎn)生，銀離子濃度到達(dá)5%時(shí)還能抑制C.albicans的黏附。Lee等[16]發(fā)現(xiàn)，氧化石墨烯納米片的添加可提高義齒材料聚甲基丙烯酸甲酯對(duì)C.albicans的抗黏附效果。其作用機(jī)制主要基于氧化石墨烯提供的大量羥基和羧基基團(tuán)能夠增加聚甲基丙烯酸甲酯的親水性，有助于在其外表構(gòu)成致密的水合層，對(duì)于防止微生物黏附起到物理屏障作用。(2)改進(jìn)材料外表性質(zhì)。如李斌等[17]考察了在義齒基托外表鍍用納米非晶金剛石薄膜的抗C.albicans黏附作用效果，發(fā)現(xiàn)金剛石膜能夠通過(guò)提高義齒外表光潔度來(lái)減少C.albicans在其外表的黏附，其耐腐蝕和膜基結(jié)合力強(qiáng)等特性還能保證長(zhǎng)期抑菌，為開發(fā)減少真菌黏附的義齒材料提供了新的思路。除此之外，Beltrn-Partida等[18]發(fā)現(xiàn)，用超氧水消毒鈦合金-TiO2納米管制備的牙科材料抗C.albicans黏附作用可持續(xù)24h，同時(shí)可抑制生物膜構(gòu)成和定植。作用機(jī)制主要是毀壞真菌-材料界面處的黏附點(diǎn)，進(jìn)而減少真菌定植。2、納米技術(shù)在抗C.albicans診斷中的應(yīng)用早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療被列為第二級(jí)預(yù)防亦稱臨床前期預(yù)防，可逆轉(zhuǎn)、停止或延緩病變的發(fā)展，是提高患者生存率和生活質(zhì)量的關(guān)鍵因素。第二級(jí)預(yù)防對(duì)于C.albicans感染的治療尤為重要，一旦C.albicans侵入血液，并進(jìn)入器官當(dāng)中，再進(jìn)行治療就非常困難，死亡率極高。因而，早確診、早治療是C.albicans抗感染的最佳選擇。當(dāng)前，檢測(cè)C.albicans感染的常用方式方法主要有血培養(yǎng)法、分子生物學(xué)法、直接鏡檢法等。華而不實(shí)，血培養(yǎng)法被以為是臨床上真菌感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但是敏感性差且培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，容易錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)間。其他方式方法也存在價(jià)格昂貴、重現(xiàn)性較低等缺點(diǎn)，難以知足臨床診治需求[2]。因而，對(duì)早期診斷新方式方法的開發(fā)刻不容緩。Tian等[9]將刀豆蛋白A與超順磁性納米顆粒作用得到外表荷電的磁性納米粒子，利用帶正電的納米粒與C.albicans細(xì)胞壁的甘露聚糖產(chǎn)生特異性結(jié)合及強(qiáng)靜電作用來(lái)捕獲C.albicans。研究發(fā)現(xiàn)，在102～107cfu/mL的初始酵母濃度范圍內(nèi)，磁性納米顆粒均表現(xiàn)出良好的酵母分離效率[9]。然后，采用熒光素-刀豆蛋白A熒光染色和T2磁共振分析對(duì)捕獲的C.albicans進(jìn)行檢測(cè)。Misiak等[19]制備了Yb3+和Tm3+共摻雜CaF2納米顆粒，并用蛋白質(zhì)G對(duì)其外表修飾。采用蛋白質(zhì)G功能化上轉(zhuǎn)換納米晶對(duì)C.albicans進(jìn)行標(biāo)記和成像，表現(xiàn)出良好的信噪比和較高的特異性。除此之外，東北師范大學(xué)王麗課題組初次利用噬菌體文庫(kù)對(duì)氧化鐵納米顆粒進(jìn)行挑選，他們分別將單一多肽及結(jié)合在抗分泌型天冬氨酰蛋白酶2(secretedaspartylproteinase2,Sap2)抗體上的多肽展示在不同噬菌體展示系統(tǒng)上，與氧化鐵納米顆粒孵育后，制備了一種雙展示噬菌體磁性納米纖維[2,20]。Sap2抗體是臨床輔助診斷C.albicans感染的重要檢測(cè)標(biāo)志物，一般在感染的初期就會(huì)產(chǎn)生。將上述磁性納米纖維用于Sap2抗體的檢測(cè)研究發(fā)現(xiàn)，該檢測(cè)方式方法的最低檢測(cè)限為1.1pg/mL，大大提高了常規(guī)抗原Sap2檢測(cè)方式方法的靈敏度，約降低了2個(gè)數(shù)量級(jí)。上述研究講明，納米技術(shù)的引入不僅能夠使C.albicans的檢測(cè)方式方法多樣化，且愈加靈敏和精準(zhǔn)，值得進(jìn)一步深切進(jìn)入開發(fā)和利用。3、納米技術(shù)在抗C.albicans治療中的應(yīng)用3.1、納米顆粒在抗C.albicans治療中的應(yīng)用隨著抗真菌藥物越來(lái)越多地應(yīng)用于臨床，真菌耐藥性問(wèn)題日益突出，華而不實(shí)C.albicans的耐藥率也在逐年上升，甚至出現(xiàn)了多重耐藥菌。怎樣減少真菌的耐藥性、什么樣構(gòu)造的藥物既能有效抗真菌又對(duì)機(jī)體沒(méi)有更大毒性？這是醫(yī)藥科技工作者迫切需要解決的難題。為此，有研究人員開發(fā)出了噬菌體、細(xì)胞壁水解酶和抗菌肽等一些新型的抗生素替代品，同時(shí)也有科研團(tuán)隊(duì)關(guān)注納米材料在疾病治療中的作用。Priyadarshini等[21]將碳點(diǎn)(carbondots,CDs)覆蓋在金納米顆粒(goldnanoparticle,GNP)外表構(gòu)成一種納米共軛構(gòu)造，并比擬了五種不同粒徑的納米粒子對(duì)C.albicans的抑制效果。結(jié)果表示清楚，納米粒對(duì)C.albicans的毒性主要源于CDs的高毒性，并且納米粒子的粒徑越小、比外表積越大，致使更多的CDs浸透到菌體中通過(guò)產(chǎn)生活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)殺傷真菌。Wani等[22]采用超聲化學(xué)方式方法制備出粒徑約25nm的金納米盤和粒徑約為30nm的多面體GNP，并比擬了兩種GNP對(duì)C.albicans的抑制效果。結(jié)果顯示，兩種納米粒均有抑菌活性，但金納米盤比多面體GNP具有更好的抑制作用。分析其機(jī)理，可能是GNP直接與質(zhì)膜H+-三磷酸腺苷酶互相作用，使質(zhì)子泵活性降低，導(dǎo)致C.albicans無(wú)法吸收養(yǎng)分供其正常生長(zhǎng)。與多面體GNP相比，具有更小粒徑的金納米盤擁有更大的比外表積，與細(xì)胞膜上蛋白結(jié)合位點(diǎn)之間的作用更強(qiáng)，且更易透過(guò)質(zhì)膜進(jìn)入真菌內(nèi)部發(fā)揮金的毒性作用，該研究為提高抗真菌藥物療效提供了全新的思路。除此之外，據(jù)報(bào)道，CS、銀、硒及氧化鋅等納米粒對(duì)C.albicans均有不同程度的抑制作用。華而不實(shí)，納米硒由于其低外表能和帶負(fù)電等特性使其極易黏附在菌體外表，滲入菌體內(nèi)并通過(guò)收縮折疊細(xì)胞膜改變其形態(tài)，殺傷病菌[23]；氧化鋅納米粒和AgNPs則均能使C.albicans體系中生成更多ROS，促進(jìn)殺菌效果[24,25]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，納米CS對(duì)變形鏈球菌和C.albicans雙菌種構(gòu)成的生物膜總能量及兩菌細(xì)胞活力均有明顯的抑制作用，且存在濃度依靠性[26]。除此之外，Randhawa等[5]發(fā)現(xiàn)，粒徑為5～20nm的兩性霉素B、酮康唑和百里香醌顆粒對(duì)C.albicans及其生物膜的抑制效果是微米級(jí)藥物的2～4倍，分析原因可能是納米級(jí)藥物由于其尺寸微小更易進(jìn)入細(xì)胞體內(nèi)；并且，一樣粒徑條件下，上述藥物對(duì)C.albicans的抗菌活性是其生物膜的8～10倍。3.2、納米載體在抗C.albicans治療中的應(yīng)用近年來(lái)，隨著納米技術(shù)的蓬勃發(fā)展，人們逐步認(rèn)識(shí)到納米材料作為藥物載體具有多種優(yōu)勢(shì)，如增加藥物穩(wěn)定性、改善其溶解行為、促進(jìn)藥物在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)、靶向分布等，進(jìn)而加強(qiáng)藥物療效甚至實(shí)現(xiàn)多功能化治療[27]。因而，有大量研究人員將載藥納米材料用于抗C.albicans感染的研究。眾所周知，巨噬細(xì)胞是人體固有免疫的重要組成部分，通過(guò)辨別、吞噬和處理抗原等作用來(lái)降低感染發(fā)生的可能性，是抵御外來(lái)病原菌的第一道防線。山東大學(xué)藥學(xué)院姜新義團(tuán)隊(duì)提出一個(gè)對(duì)抗C.albicans感染的新思路，即通過(guò)調(diào)控巨噬細(xì)胞分化的免疫策略來(lái)抵抗系統(tǒng)性C.albicans感染[28]。他們報(bào)道了一種可生物降解的納米三元復(fù)合物甘露糖修飾的CS負(fù)載伊馬替尼，研究表示清楚，該甘露糖化納米復(fù)合物能夠提高巨噬細(xì)胞外表M1型受體CD80的比例，增加腫瘤壞死因子-、白介素-6以及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的表示出，促進(jìn)體外實(shí)驗(yàn)中巨噬細(xì)胞對(duì)C.albicans的吞噬能力。同時(shí)，在體實(shí)驗(yàn)證明，該納米復(fù)合物可利用巨噬細(xì)胞再分化的調(diào)節(jié)途徑來(lái)指導(dǎo)其原位重塑，使小鼠脾臟C.albicans載量顯著降低，脾臟中M1型巨噬細(xì)胞比例明顯提高，進(jìn)而加強(qiáng)機(jī)體抗C.albicans感染的能力，該研究成果為治療病原微生物感染提供了新的免疫調(diào)控研究思路。除此之外，有科研人員分別采用絲素蛋白、pH響應(yīng)膠束體系及乳化給藥系統(tǒng)[29,30,31]作為藥物載體，考察了載體在藥物抑制C.albicans方面能否有促進(jìn)作用。結(jié)果非常令人興奮，載體不僅能有效地遞送伊曲康唑、改善藥物釋放，而且能夠抑制菌絲的產(chǎn)生，干擾菌膜的構(gòu)成[29]。除此之外，姜黃素-絲素蛋白納米粒能夠減少C.albicans黏附在細(xì)胞外表，抑制生物膜產(chǎn)生，與姜黃素相比具有更高層次的水溶性和抗菌活性[30]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，C.albicans往往與一種甚至多種微生物在醫(yī)療器械外表構(gòu)成雙菌種或多菌種抗性更強(qiáng)的生物膜，為其治療帶來(lái)更大困難[6]。因而，探尋求索新的抗多菌種生物膜的藥物或治療手段迫在眉睫。Monteiro課題組將氯己定負(fù)載在CS功能化氧化鐵納米粒(ironoxidenanoparticles,IONPs)上，得到IONPs-CS-氯己定納米系統(tǒng)，并考察了該納米系統(tǒng)對(duì)C.albicans和變形鏈球菌共感染構(gòu)成的雙物種生物膜的抑制作用[32]。結(jié)果表示清楚，IONPs-CS-氯己定的存在能夠使雙物種菌落數(shù)減少4.27log10。然而，作用于已構(gòu)成的雙物種生物膜時(shí)，效果略有下降，使菌落數(shù)減少了3.25log10。除此之外，Monteiro課題組還將CS功能化的IONPs作為咪康唑的載體，考察其對(duì)C.albicans和光滑念珠菌雙菌種生物膜的抑制效果[33]。研究結(jié)果證實(shí)，IONPs-CS-咪康唑與單獨(dú)咪康唑相比，在降低生物膜代謝活性和細(xì)胞活力方面表現(xiàn)出更強(qiáng)的作用效果，可降低生物膜代謝活性93.04%～94.40%,C.albicans菌落數(shù)減少1.85～2.05log10，但對(duì)生物膜的總生物量和細(xì)胞外基質(zhì)成分無(wú)顯著影響。3.3、納米技術(shù)輔助光動(dòng)力抗菌化學(xué)療法在抑制C.albicans感染中的應(yīng)用光動(dòng)力抗菌化學(xué)療法(photodynamicantimicrobialchemotherapy,PACT)是近年來(lái)新興的一種抗菌方式方法，該方式方法主要是借助特定波長(zhǎng)的光照射聚集在病灶區(qū)的光敏劑時(shí)，可激活光敏劑產(chǎn)生單線態(tài)氧等ROS，同時(shí)可誘發(fā)一系列聲化學(xué)反響及物理作用，到達(dá)殺傷微生物的目的[26,34]。該技術(shù)不易誘發(fā)耐藥菌的產(chǎn)生，因而近年來(lái)有科研人員將其用于抗C.albicans的感染中，并獲得了較好的作用效果。Yang等[35]將二氫卟吩e6封裝在溴化十六烷三甲基銨(cetyltrimethylammo-niumbromide,CTAB)制備的脂質(zhì)體中，考察其介導(dǎo)的PACT在抑制C.albicans上的效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，脂質(zhì)與二氫卟吩e6的摩爾比越低、脂質(zhì)體粒徑越小及脂質(zhì)體中CTAB的濃度越高，負(fù)載二氫卟吩e6的CTAB-脂質(zhì)體對(duì)C.albicans的敏感株和耐藥株可展示出更強(qiáng)的光動(dòng)力抗菌效果。Khan等[36]考察了GNP對(duì)于亞甲藍(lán)(methyleneblue,MB)介導(dǎo)的PACT在對(duì)抗頑固性C.albicans生物膜經(jīng)過(guò)中的加強(qiáng)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，GNP能夠明顯促進(jìn)MB介導(dǎo)的PACT作用，使C.albicans生物膜抑制率從單獨(dú)使用MB時(shí)的81.9%提高到95.4%。Sherwani等[37]則考察了在C.albicans感染的雌性巴比賽小鼠體內(nèi)，GNP對(duì)于MB和甲苯胺藍(lán)(toluidineblue,TB)介導(dǎo)PACT的促進(jìn)作用。研究結(jié)果表示清楚，不管是無(wú)光照GNP-MB和GNP-TB組，還是GNP-MB和GNP-TB介導(dǎo)的PACT組均能夠減少生物膜的構(gòu)成，并且發(fā)現(xiàn)GNP與MB和TB之間具有明顯的協(xié)同作用。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，PACT實(shí)驗(yàn)組可將生物膜抑制率從單獨(dú)使用GNP-MB或GNP-TB組的40%～50%提高到接近80%，充分講明GNP能夠明顯提高PACT在抗生物膜方面的作用。4、納米技術(shù)抗C.albicans作用機(jī)制研究納米材料抗C.albicans的機(jī)制比擬復(fù)雜，主要可概括為下面幾方面：(1)納米粒子具有較大的比外表積，可加強(qiáng)其與C.albicans的互相作用，而極小的尺寸促使其更易浸透到細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用[5,8];(2)通過(guò)改變細(xì)胞膜的流動(dòng)性和完好性，或者使胞內(nèi)微環(huán)境改變，進(jìn)而影響其物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)等正常功能[10];(3)借助某些因素(如光照)產(chǎn)生羥基自由基、超氧負(fù)離子等ROS，利用ROS引起系列氧化應(yīng)激反響，使微生物內(nèi)有機(jī)組成成分的化學(xué)鍵斷裂，對(duì)DNA等生物分子造成嚴(yán)重的氧化損傷。除此之外，還有研究表示清楚ROS可通過(guò)激活鈣離子流進(jìn)而毀壞鈣離子通道的正常功能，影響正常信號(hào)傳導(dǎo)，進(jìn)而到達(dá)殺菌效果[10,31];(4)影響生物膜相關(guān)基因的表示出，GNP對(duì)C.albicans細(xì)胞膜上兩種重要基因均有明顯抑制作用；(5)金屬離子溶出機(jī)制[32,38]，金、銀、鋅等重金屬離子可與帶負(fù)電的細(xì)胞膜靜電吸附，進(jìn)而擴(kuò)散入菌體內(nèi)與酶蛋白或核酸上的硫或磷互相作用，使酶失活或DNA構(gòu)造改變；(6)納米粒子直接與質(zhì)膜上一些重要的蛋白質(zhì)互相作用使蛋白質(zhì)變性，導(dǎo)致質(zhì)子泵的正常功能遭到干擾進(jìn)而發(fā)揮殺菌作用[22,39];(7)利用納米材料特性加強(qiáng)抗菌性或者改變材料外表性質(zhì)，進(jìn)而抑制C.albicans在植入性醫(yī)學(xué)生物材料外表的吸附或定植。5、瞻望近年來(lái)，C.albicans感染逐年增加的發(fā)病率和不斷加強(qiáng)的耐藥性使其預(yù)防與治療幾乎成為全球性的難題，引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，針對(duì)C.albicans感染的相關(guān)研究和文獻(xiàn)也不斷涌現(xiàn)。將納米技術(shù)引入抗C.albicans感染不僅能減緩真菌耐藥性，還能加強(qiáng)抑菌效果與靶向性。有些納米材料不僅對(duì)病原菌構(gòu)成的生物膜有很好的抑菌作用，還能有效抑制生物被膜的構(gòu)成。除此之外，針對(duì)近年來(lái)出現(xiàn)的多菌種生物膜抗感染研究也獲得了一定進(jìn)展。但當(dāng)前納米技術(shù)應(yīng)用于抗C.albicans感染的研究仍處于初級(jí)階段，針對(duì)生物效應(yīng)的機(jī)制方面研究較少，納米材料的抑菌機(jī)制和作用靶點(diǎn)仍不特別明確，納米制劑靶向治療方面的研究更是薄弱，因而，系統(tǒng)地對(duì)納米材料或納米載體促進(jìn)抗C.albicans的效果機(jī)制進(jìn)行討論將成為一個(gè)具有突破性的研究方向，而真菌基因組學(xué)技術(shù)可能是幫助人們深切進(jìn)入理解作用機(jī)制的另一個(gè)重要突破點(diǎn)。除此之外，納米技術(shù)想要在抗C.albicans感染臨床應(yīng)用中推廣開來(lái)，仍然面臨著體內(nèi)不可控、未知的毒性和不良反響等難題，需要大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究做補(bǔ)充。因而，在今后的研究中，需要更深切進(jìn)入地關(guān)注納米材料應(yīng)用于抗C.albicans感染的抑菌機(jī)制、耐藥機(jī)制、體內(nèi)代謝和藥物毒性等，進(jìn)而為納米制劑更高層次效、安全地應(yīng)用于真菌感染臨床治療中奠定基礎(chǔ)。以下為參考文獻(xiàn)[1]李葦.光動(dòng)力體外殺滅白念珠菌的效果評(píng)價(jià)[D].重慶:重慶大學(xué),2021:2-3[2]施洪喜.展示Fba1表位的雜合噬菌體應(yīng)用于白色念珠菌感染預(yù)防和檢測(cè)的研究[D].長(zhǎng)春:東北師范大學(xué),2022:1-6[3]NaglikJR,RichardsonJP,MoyesDL.Candidaalbicanspathogenicityandepithelialimmunity.PLoSPathog,2020,10(8):e1004257[4]SanguinettiM,PosteraroB,Lass-Fl?rlC.AntifungaldrugresistanceamongCandidaspecies:mechanismsandclinicalimpact.Mycoses,2021,58(S2):2-13[5]RandhawaMA,GondalMA,Al-ZahranialAJ,etal.Synthesis,morphologyandantifungalactivityofnano-particulatedamphotericin-B,ketoconazoleandthymoquinoneagainstCandidaalbicansyeastsandCandidabiofilm.JEnvironSciHealthAToxHazardSubstEnvironEng,2021,50(2):119-124[6]李瑞蓮,王倬,杜昱光.白色念珠菌生物被膜研究進(jìn)展.微生物學(xué)報(bào),2021,57(8):1206-1218[7]KhodavandiA,AlizadehF,VandaNA,etal.PossiblemechanismsoftheantifungalactivityoffluconazoleincombinationwithterbinafineagainstCandidaalbicans.PharmBiol,2020,52(12):1505-1509[8]LaraHH,Romero-UrbinaDG,PierceC,etal.EffectofsilvernanoparticlesonCandidaalbicansbiofilms:anultrastructuralstudy.JNanobiotechnol,2021,13:91[9]TianW,LiF,WuS,etal.EfficientcaptureandT2magneticresonanceassayofCandidaalbicanswithinorganicnanoparticles:roleofnanoparticlesurfacechargeandfungalcellwall.ACSBiomaterSciEng,2022,5:3270-3278[10]RadhakrishnanVS,MudiamMKR,KumarM,etal.Silvernanoparticlesinducedalterationsinmultiplecellulartargets,whicharecriticalfordrugsusceptibilitiesandpathogenicityinfungalpathogen(Candidaalbicans).IntJNanomed,2021,13:2647-2663[11]李哲,藍(lán)菁,亓慶國(guó).納米載銀無(wú)機(jī)抗菌劑對(duì)白色念珠菌生物膜構(gòu)成的影響.口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志,2020,13(3):137-141[12]胡倩穎.白色念珠菌HSP90表位C核酸疫苗及CpG佐劑效應(yīng)研究[D].長(zhǎng)春:東北師范大學(xué),2021:1-7[13]CarneiroC,CorreiaA,CollinsT,etal.DODAB:monooleinliposomescontainingCandidaalbicanscellwallsurfaceproteins:anoveladjuvantanddeliverysystem.EurJPharmBiopharm,2021,89:190-200[14]關(guān)麗影.殼聚糖-白念菌熱休克蛋白90核酸疫苗納米粒子的制備及其緩釋作用初探[D].長(zhǎng)春:東北師范大學(xué),2018:27-34[15]LiZ,SunJ,LanJ,etal.EffectofadenturebaseacrylicresincontainingsilvernanoparticlesonCandidaalbicansadhesionandbiofilmformation.Gerodontology,2021,33(2):209-216[16]LeeJH,JoJK,KimDA,etal.Nano-grapheneoxideincorporatedintoPMMAresintopreventmicrobialadhesion.DentMater,2021,34(4):e63-e72[17]李斌,姚月玲,安銀東,等.納米非晶金剛石膜抗口腔白色念珠菌粘附作用的研究.中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2005(2):203-204,264[18]Beltrn-PartidaE,Valdez-SalasB,Curiel-?lvarezM,etal.Enhancedantifungalactivitybydisinfectedtitaniumdioxidenanotubesviareducednano-adhesionbonds.MaterSciEngC,2021,76:59-65[19]MisiakM,SkowickiM,LipińskiT,etal.BiofunctionalizedupconvertingCaF2:Yb,TmnanoparticlesforCandidaalbicansdetectionandimaging.NanoRes,2021,10(10):3333-3345[20]鞠志剛.雙展示噬菌體納米材料的制備及其在白色念珠菌檢測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