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文檔簡介
胃蛋白酶原PG臨床推廣-—一、胃蛋白酶原的特性
(pepsinogen)胃蛋白酶原有Ⅰ型和Ⅱ型兩種胃蛋白酶原在pH﹤5.0時活化為胃蛋白酶(pepsin)胃蛋白酶原I/II(PGI/II)分泌部位PGⅠ是胃底腺的主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞分泌;PGⅡ除主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞分泌外,幽門腺和十二指腸腺亦可產(chǎn)生.PGI&PGII食道胃底賁門幽門十二指腸胃竇幽門括約肌黏膜皺襞斜肌層胃大彎內(nèi)腔胃小彎漿膜縱肌層環(huán)肌層蜂巢胃胃腺黏膜黏膜肌層胃小凹血管黏膜下層斜肌層環(huán)肌層肌層縱肌層結(jié)締組織層內(nèi)臟腹層漿膜胃部結(jié)構(gòu)圖胃蛋白酶原I/II(PGI/II)PGI是檢測胃泌酸腺(胃底腺)細(xì)胞功能的指針,胃酸分泌增多PGI升高,胃酸分泌減少或胃粘膜腺體萎縮PGI降低;PGII與胃底粘膜病變的相關(guān)性較大(相對于胃竇粘膜),其升高與胃底腺管萎縮、腸上皮化生或假幽門腺化生、異型增生有關(guān);PGI/II比值進(jìn)行性降低與胃粘膜萎縮進(jìn)展相關(guān).介紹內(nèi)容一、胃蛋白酶原的特性三、胃蛋白酶原I/II臨床應(yīng)用四、胃蛋白酶原的檢測檢測方法放射免疫測定法(RIA):有放射性酶免疫測定法(EIA):
需樣少,較低特異性和靈敏度時間分辨熒光免疫分析法(TRFIA):靈敏、簡便,較高特異性、靈敏度較低、易受干擾。乳膠增強(qiáng)免疫比濁法:較低靈敏度及特異性,方便,適合大規(guī)模篩查,易受干擾。五、胃蛋白酶原檢測五、胃蛋白酶原檢測酶標(biāo)板反應(yīng)底物包被抗體檢測抗原酶標(biāo)抗體酶標(biāo)抗體反應(yīng)產(chǎn)物酶免疫測定法乳膠免疫測定法(LIA法)以血清或血漿為樣本,利用全自動生化分析儀對樣本的乳膠凝集反應(yīng)所導(dǎo)致的吸光度變化進(jìn)行檢測。將抗PGI(II)抗體與乳膠顆粒表面結(jié)合制成乳膠試劑,與試驗樣本中的PGI(II)反應(yīng),使乳膠顆粒產(chǎn)生凝集。在確定的波長下測定該反應(yīng)的濁度變化,其變化量會隨著檢測樣本中PGI(II)的濃度而成比例增加。根據(jù)已知濃度的PGI(II)標(biāo)準(zhǔn)液制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出樣本中PGI(II)的濃度。+乳膠顆粒
抗體
抗原
乳膠免疫測定法(LIA法)凝集產(chǎn)生濁度
化學(xué)發(fā)光(chemiluminescence)是指伴隨化學(xué)反應(yīng)過程所產(chǎn)生的光的發(fā)射現(xiàn)象。
某些物質(zhì)(發(fā)光劑)在化學(xué)反應(yīng)時,吸收了反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學(xué)能,使反應(yīng)的產(chǎn)物分子或反應(yīng)的中間態(tài)分子中的電子躍遷到激發(fā)態(tài),當(dāng)電子從激發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時,以發(fā)射光子的形式釋放出能量,這一現(xiàn)象稱為化學(xué)發(fā)光?;瘜W(xué)發(fā)光法原理底物A底物B發(fā)光反應(yīng)化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法(CLEIA)胃蛋白酶原I/II(PGI/PGII)
試劑盒性能指標(biāo)BSBE最低檢測限為PGI:1ng/ml,PGII:1ng/ml線性范圍,PGI:200ng/mL,PGII:100ng/mL抗干擾性:0.1g/l的膽紅素、18g/l的甘油三酯和2.5g/l的血紅蛋白,RF為520IU/ml,小于上述濃度的物質(zhì)不會對該試驗產(chǎn)生干擾穩(wěn)定性:開蓋放在試劑倉中14天,空白無變化,質(zhì)控結(jié)果基本無變化,可兩點(diǎn)定標(biāo)采血要求靜脈采血2-3mL于普通管中(不能使用含EDTA、枸櫞鹽酸試管),離心分離出血清。2-8℃條件下,樣本可保存7天,-20℃可長期保存。避免樣本反復(fù)凍融。五、胃蛋白酶原檢測
檢驗方法
實驗前準(zhǔn)備:
1.將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出,放置室溫(18~25℃)平衡至少30分鐘。
2.將恒溫箱或恒溫水浴鍋溫度調(diào)到37℃,待溫度穩(wěn)定后使用。
3.取1包固體洗液用500mL純化水溶解后備用。
實驗步驟:
較準(zhǔn)品或血清酶結(jié)合物室溫振蕩洗板拍干發(fā)光底物A、B
發(fā)光儀檢測包被板37℃溫育60min河南美凱生物其他二類產(chǎn)品A:化學(xué)發(fā)光定量檢測系列產(chǎn)品
1)性激素系列
LH、FSH、PRL、T、P、E2、fE3
2)甲功系列
T3、fT3、T4、fT4、TSH、Anti-TG、Anti-TPO
3)糖尿病系列
C-P、INSB:膠體金快速檢測系列產(chǎn)品
LH、HCGC:微生物類系列產(chǎn)品
BV診斷(唾液酸酶法)、BV聯(lián)合檢測(化學(xué)反應(yīng)法)、
Uu和Mh培養(yǎng)鑒定藥敏(微生物檢驗法)。廠家:河南美凱生物科技
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