羅蘇伐他汀與阿伐他汀和氟伐他汀的降脂效果比較

Rosuvastatin’sLipid-loweringeffectcomparisionwith

AtorvastatinandFluvastatin

羅蘇伐他汀與阿伐他汀和氟伐他汀的降脂效果比較湘雅醫(yī)學(xué)院10級研究背景（Background）他汀類藥物是臨床上常用的降脂藥，羅蘇伐他汀（Rosuvastatin）是近年來開發(fā)的他汀類新品種。用于高膽固醇血癥、血脂代謝紊亂癥及單純高甘油三酯血癥的治療。是目前認(rèn)為最有效的降脂藥，所以被稱為“超級他汀”。因此自主研發(fā)他汀藥物羅素伐他汀，對填補(bǔ)我國新藥空白，促進(jìn)人們身體健康水平，取得社會效益和經(jīng)濟(jì)效益，都有重大意義。實驗原理（Experimentalprinciple）羅蘇伐他汀通過抑制HMGCoA還原酶的活性,抑制體內(nèi)膽固醇的合成,反饋性刺激細(xì)胞表面的低密度脂蛋白(LDL)受體增加,加速低密度脂蛋白膽固醇進(jìn)入細(xì)胞降解,LDL的降低效果達(dá)到52%～63%,其幅度比其他他汀類藥物高8.4%。[1]該藥有輕微升高高密度脂蛋白（HDL）的作用。[1]實驗?zāi)康模≒urpose）建立wistar大鼠高血脂模型測羅蘇伐他汀的降脂效果比較阿伐他汀、氟伐他汀、和羅蘇伐他汀降脂作用實驗步驟(Steps)實驗對象、器材選擇動物模型建立藥效試驗結(jié)果記錄數(shù)據(jù)分析（灌胃方法）（內(nèi)眥取血）實驗藥物、器材(DrugandEquipment)藥物：阿伐他汀、氟伐他汀、羅蘇伐他汀、生理鹽水、乙醚、高脂飼料、基礎(chǔ)飼料

器材：試劑盒、醫(yī)用離心機(jī);恒溫振蕩器;FA2004

型分析天平；751型分光光度計;CL-28000全自動生化分析儀、棉線、16號針頭、注射器、毛細(xì)吸管Wistar大鼠[2](雄性,老齡鼠,體重相當(dāng))

優(yōu)點：價格低、壽命長、性情溫和、對他汀類藥物敏感、血量豐富[3]

實驗對象(ExperimentalObject)實驗方法與步驟(一)構(gòu)建大鼠高血脂動物模型1.將選好的實驗大鼠隨機(jī)分為A、B、C、D、E五組，每組10只，編號。2.在相同條件下灌胃法喂飼料喂養(yǎng)4周高脂乳劑：

高脂乳劑(配方：豬油10%雞蛋黃5%膽固醇1~2%丙基硫氧嘧啶0.2%普通飼料82.8~83.8%另可酌加膽酸鹽0.2%左右，給予量1．5mE／(100g·d)

原理：豬油富含甘油三酯；雞蛋黃是天然食物中含膽固醇最高的；丙基硫氧嘧啶有助于成模，因甲狀腺素促進(jìn)膽固醇的分解，而丙基抑制其作用；膽酸鹽主要是促進(jìn)膽固醇的吸收。

實驗方法與步驟（二）藥物試驗3.第五周起，每天上午灌胃法給藥（持續(xù)飼料喂養(yǎng)）4.喂藥2W后，測定各組大鼠血清TC，TG，HDL,LDL。（內(nèi)眥靜脈采血1mL）藥物及劑量（mg/d）血脂及脂蛋白變化（%）TCLDL-CHDL-CTG氟伐他?。?0）-21.4-30.1+11.2-7.3普伐他?。?0）-23.7-31.5+3.1-12.0辛伐他?。?0）-27.4-35.5+4.2-18.3阿伐他?。?0）-34.5-44.3+12.1-33.2常用他汀類調(diào)血脂藥中，氟伐他（來適可）汀作用效果相對較弱，而阿伐他?。⑵胀装罚┬Ч顝?qiáng)，因此，選用這兩種藥物為常用他汀類藥物代表與新藥羅蘇伐他汀進(jìn)行對比。藥品(8mg/d)高脂飼料A阿伐他汀B氟伐他汀C羅蘇伐他汀D生理鹽水基礎(chǔ)飼料E生理鹽水藥物劑量參考Db=Da×Rb/Ra(Wa/Wb)1/3以人20mg/d為參考標(biāo)準(zhǔn)（Da,Db分別為人,大鼠的每公斤體質(zhì)量劑量(mg/kg)，Rb人體型系數(shù)，Ra大鼠體型系數(shù)，WA人體重，WB大鼠體重，RA=0.09；RB=0.11)，用生理鹽水配成0.4mg/ml混懸液，每天1次連續(xù)灌胃兩周。大鼠灌胃法[7]灌胃器的制作1.用鉗子將16號針頭斜面部分的針尖掐掉;2.用直徑大小適宜的鐵絲插入針芯中,將針芯灌通;3.

將針尖毛刺用細(xì)砂紙磨掉并在酒精燈上灼燒,確保針頭部位光滑。灌胃方法①將大鼠放置于桌面,右手抓住其尾部,牽制大鼠的活動,左手放在大鼠背部,并迅速向前推移,從其頸部保定②迅速將大鼠翻轉(zhuǎn)過來,同時左手作半握狀,大拇指用力頂住大鼠下頜骨,并適當(dāng)?shù)膲鹤〈笫笄爸?力度要適當(dāng),以頭不能抬、前肢不能掙扎為宜,其余四指下頂住枕骨。右手也作半握狀,保定其后肢及大鼠尾巴,防止其掙扎,左右兩手用力將大鼠身體拉直,力度適宜③操作者兩手將由適宜的細(xì)線做成的繩套拉直掛在大鼠的門齒,繩套的另一端是掛在鐵架臺上的,同時可以用左手從下面頂住大鼠頭部,防止大鼠頭部掙扎,繩套脫落④保定助手與掛繩同時將大鼠向后拉,力度適宜,防止大鼠在掙扎時損傷門齒,使大鼠頭、身體和繩套在一條直線,大鼠尾部略向下傾斜⑤操作者可以左手食指半曲狀從下面頂住大鼠頭部防止頭部上面掙扎,由于助手把大鼠身體拉直,可阻止大鼠頭部的左右掙扎,右手拇指、食指、中指捏著注射器,針管方向與大鼠身體平行向下略傾斜,從右側(cè)口角沿上顎向內(nèi)推進(jìn)⑥當(dāng)針頭完全進(jìn)入大鼠口腔時,此時針頭也已沿咽后壁插入食管。如果灌胃針的位置插入正確，小鼠可自行吞服藥，灌胃針插入位置不正確，小鼠會強(qiáng)烈掙扎，必須拔出重插，否則可能將藥物灌入氣管，造成小鼠死亡。待大鼠穩(wěn)定后由慢到快推藥即可。注意事項右手對大鼠后肢及背部的保定主要以大鼠身體成一條直線為原則插入灌胃針時，如果遇到阻力，不能用力繼續(xù)進(jìn)針，應(yīng)停止進(jìn)針，等待其自動吞咽時，迅速進(jìn)針。否則，容易損傷動物食道。大鼠內(nèi)眥取血[6]步驟麻醉取一只密閉容器，將蘸取適量乙醚的棉花放入其中，然后將大鼠放入，待大鼠麻醉后采血大鼠內(nèi)眥取血步驟采血采血者以左手拇指、食指從背部緊握住大鼠頸部，當(dāng)取血時輕輕壓迫大鼠頸部兩側(cè)，使眶后靜脈叢充血。以酒精擦拭大鼠眼內(nèi)眥后，取長約2~3cm、內(nèi)徑0.5~1.0mm消毒備用的毛細(xì)吸管，使毛細(xì)吸管與鼠面成45?的夾角，由內(nèi)眥刺入，刺入深度約4~5mm。當(dāng)感到有阻力時停止推進(jìn)，輕輕旋轉(zhuǎn)毛細(xì)吸管，血液便能自然流入毛細(xì)管中。通常棄去第一滴血，從第二滴血開始收集，當(dāng)?shù)玫剿璧难亢?，即除去加于頸部的壓力，同時，將毛細(xì)吸管拔出，用消毒棉球按壓穿刺處止血。體重200~300g大鼠每次可采血2~3ml，如有需要可每周一次，左右兩眼輪換更好。此種采血方法尤其適用于需觀測血液中各項指標(biāo)的動態(tài)變化。大鼠內(nèi)眥取血步驟大鼠內(nèi)眥取血注意事項（1）采血場所要有充足的光線，溫度以室溫20度為宜。（2）麻醉深淺要適度，且宜淺不宜深，麻醉太深對順利采血不利；可以多只間隔麻醉，幾個人相互配合操作更加迅速。（3）采血用具及大鼠采血部位要求消毒，否則易致大鼠眼部感染。（4）若需抗凝全血，在收集血的試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。（5）正確掌握操作要領(lǐng)，嚴(yán)格按上述的要求操作，手法一定要嫻熟，否則會導(dǎo)致大鼠致盲，不利于后續(xù)實驗。（6）正確選用采血器，可以選用注射器，但是通過實際操作，選用毛細(xì)吸管更為合適。指標(biāo)A1…A10B1…B10C1…C10D1…D10E1…E10體重KGTCLDL-CHDL-CTGx±s實驗結(jié)果記錄（Records）

羅蘇伐他汀降脂作用強(qiáng)于阿伐他??；羅蘇伐他汀降脂作用介于兩者之間；羅蘇伐他汀降脂作用弱于氟伐他汀。預(yù)期結(jié)果(Prediction)結(jié)論臨床試驗設(shè)計（ClinicalExperiment）1.選擇600名病人（≥18周歲），LDL-C水平≥160mg/dL、<250mg/dL，甘油三酯（TG）水平≤400mg/dL。2.采用雙盲法隨機(jī)進(jìn)行12周的治療，劑量分別為羅蘇伐他汀10mg/d(n=200)；普伐他汀20mg/d（n=200）和氟伐他汀20mg/d（n=200）3.測量病人治療后的LDL-C水平，甘油三酯(TG)水平，HDL-C水平。4.統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)。文獻(xiàn)來源（Literaturesources）[1]須媚.降脂藥羅蘇伐他汀.世界臨床用藥.2004,25(10):637[2]劉雪梅.幾類高脂血癥動物模型的比較.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報.2004,2(2)[3]李林鵬.金黃地鼠和大鼠高血脂模型的應(yīng)用研究