基因文庫及復(fù)習(xí)_第1頁
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第1頁/共18頁基因文庫基因組文庫第2頁/共18頁為什么要建立基因文庫？直接從含目的基因的生物中提取不行嗎？第3頁/共18頁第4頁/共18頁第5頁/共18頁利用PCR技術(shù)擴增目的基因條件：已知目的基因的核苷酸序列先加熱至90－95度后降溫至55－56度結(jié)果：指數(shù)式增加第6頁/共18頁2基因表達載體的構(gòu)建－－基因工程的核心基因表達載體啟動子：終止子：目的基因標(biāo)記基因目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并遺傳給下一代，同時能夠表達和發(fā)揮作用第7頁/共18頁一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片斷，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點；使轉(zhuǎn)錄開始啟動子：終止子：一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片斷，使轉(zhuǎn)錄停止?將生物所有DNA直接導(dǎo)入受體細胞不是更簡單嗎？如果這么做，結(jié)果會怎樣？第8頁/共18頁3、將目的基因?qū)胧荏w細胞轉(zhuǎn)化？目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，受體細胞？植物細胞動物細胞微生物細胞第9頁/共18頁將目的基因?qū)胫参锛毎p子葉植物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法第10頁/共18頁將目的基因?qū)胫参锛毎瓎巫尤~植物基因槍法第11頁/共18頁將目的基因?qū)胫参锛毎ǚ酃芡ǖ婪ㄞD(zhuǎn)基因抗蟲棉第12頁/共18頁將目的基因?qū)雱游锛毎@微注射將目的基因?qū)胛⑸锛毎Ｓ玫臑榇竽c桿菌，用CaCl2處理感受態(tài)細胞重組載體與之混合

受精卵第13頁/共18頁將目的基因?qū)胛⑸锛毎Ｓ玫臑榇竽c桿菌，用CaCl2處理感受態(tài)細胞重組載體與之混合

第14頁/共18頁4、目的基因的檢測和鑒定－－檢查基因工程是否成功的一步A、轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因－DNA分子雜交法B、目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA－分子雜交法C、目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)－抗原抗體雜交個體生物學(xué)水平鑒定第15頁/共18頁第16頁/共18頁如何從基因文庫中找到所需要的基因根據(jù)目的基因的有關(guān)信息基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色體上位置基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)第17頁/共18頁作為基因工程表達載體，只需目的基因就可以完成任務(wù)嗎？根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機理，你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎？大腸桿菌可以

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