家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)試驗(yàn)報(bào)告

家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)報(bào)告［目的與要求］1學(xué)習(xí)直接測(cè)定家兔動(dòng)脈血壓的急性實(shí)驗(yàn)的方法2觀察神經(jīng),體液因素對(duì)心血管活動(dòng)的影響［基本原理］在正常人體內(nèi),任何高等動(dòng)物的動(dòng)脈血壓時(shí)相對(duì)穩(wěn)定的.這種相對(duì)穩(wěn)定是通過(guò)神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)來(lái)實(shí)現(xiàn)的,其中以靜動(dòng)脈竇-主動(dòng)脈弓壓力感受性反射最為重要.此反射即可使升高的血壓下降,又可使降低血壓升高,故有血壓緩沖反射之稱。［動(dòng)物與器材］家兔,手術(shù)臺(tái),常用手術(shù)器械,止血鉗,眼科剪,支架,雙凹管,氣管插管,動(dòng)脈插管,三道管,動(dòng)脈夾,計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng),壓力傳感器,保護(hù)電極,照明燈,紗布,棉球,絲線,注射器（1ml,5ml,20ml）,生理鹽水,4%檸檬酸鈉，20%-25%氨基甲酸已酯,肝素（200U/ml）,腎上腺素（1:5000）,已酰膽堿（1:10000）【方法與步驟】1、實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備打開(kāi)計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)，接通壓力傳感器。從顯示器的“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”中找出“循環(huán)實(shí)驗(yàn)”的“家兔血壓的調(diào)節(jié)”條，使顯示器顯示壓力讀數(shù)。2、連通液導(dǎo)系統(tǒng)并制壓將壓力傳感器的下方支管，通過(guò)輸液管連接三通管，再連接動(dòng)脈插管。上側(cè)管供制壓時(shí)排除管內(nèi)空氣使用。先用裝有20ml4%檸檬酸鈉的注射器，通過(guò)三通管向連接動(dòng)脈插管的輸液管內(nèi)推注，使之充滿液體（不要使動(dòng)脈插管高過(guò)壓力傳感器的上方支管）后，再用止血鉗夾住動(dòng)脈插管端的輸液管。然后繼續(xù)向三通管內(nèi)推注，直至充滿壓力傳感器的上方支管，并用塞子塞?。ㄗ⒁猓阂簩?dǎo)系統(tǒng)內(nèi)不可有氣泡）。繼續(xù)向三通管內(nèi)推注，同時(shí)觀察顯示器上壓力變化。當(dāng)加壓到120mmHg時(shí)既可關(guān)閉三通管。觀察壓力是否變化，如果壓力下降，則需要檢查液導(dǎo)系統(tǒng)的漏液原因，并重新制壓。調(diào)節(jié)血壓顯示器的靈敏度，使30?130mmHg的變化都能在顯示器上明顯的反映出來(lái)。將動(dòng)脈插管端的導(dǎo)管內(nèi)充滿肝素溶液。3、動(dòng)物的準(zhǔn)備（1）按照實(shí)驗(yàn)4-9方法，麻醉家兔并進(jìn)行頸部手術(shù)，插入氣管插管、分離主動(dòng)脈神經(jīng)。同時(shí)分離迷走神經(jīng)并穿線備用。再將止血鉗從頸總動(dòng)脈下方穿過(guò)，輕輕張開(kāi)止血鉗，分離出2?3cm長(zhǎng)的頸總動(dòng)脈。分離出的頸總動(dòng)脈外壁應(yīng)該十分光潔，外面并無(wú)結(jié)締組織及脂肪等物。在動(dòng)脈上穿兩條備用棉線，分別打上活結(jié)。將兩線分別拉至分離出的動(dòng)脈兩端備用。同樣方法分離另一側(cè)血管與神經(jīng)（一側(cè)動(dòng)脈用于插管側(cè)壓，另側(cè)動(dòng)脈實(shí)驗(yàn)用）。由于家兔的品種不同，個(gè)體之間也有差異，常發(fā)現(xiàn)3條神經(jīng)的解剖位置有些變異。主動(dòng)脈神經(jīng)的最后確認(rèn)，蓄意對(duì)血壓的影響為準(zhǔn)。（2）動(dòng)脈插管首先用5ml注射器從耳緣靜脈注入肝素（200U?kg體重）以防凝血。然后在一側(cè)動(dòng)脈行動(dòng)脈插管術(shù)以記錄血壓。其方法如下：將動(dòng)脈頭端的備用線盡可能靠頭端結(jié)扎（務(wù)必扎緊，以防滲血），然后在另一備用線的向心側(cè)（盡可能近心端），用動(dòng)脈夾夾閉。輕輕提起動(dòng)脈頭端的結(jié)扎線，用銳利的眼科剪在靠近扎線的稍后方，沿向心方向斜向剪開(kāi)動(dòng)脈上壁（注意：不可只剪開(kāi)血管外膜，也切勿剪斷整個(gè)動(dòng)脈，剪口大小約為管徑的一半）。一手持彎頭眼科鑷，將其一個(gè)彎頭從剪口處插進(jìn)動(dòng)脈少許，輕輕挑起剪開(kāi)的動(dòng)脈上壁，另一手將準(zhǔn)備好的動(dòng)脈插管由開(kāi)口處插入動(dòng)脈管內(nèi)。如果插入較淺，可用一手輕輕捏住進(jìn)入插管的動(dòng)脈管壁，另一手拿住動(dòng)脈插管，順勢(shì)輕輕推進(jìn)至6?8mm左右（如果手感滯澀，說(shuō)明插管并未進(jìn)入動(dòng)脈，必須退出插管，重新剪口再插），用備用線將動(dòng)脈連同進(jìn)入的插管扎緊（插管不可因扎線松動(dòng)而滑出，亦不可漏液），并將余線系在插管的固定側(cè)支上，以免滑脫。注意：插管應(yīng)與動(dòng)脈血管的方向一致，以防插管尖端扎破動(dòng)脈管壁。輕輕取下向心端動(dòng)脈夾，可見(jiàn)動(dòng)脈血與插管內(nèi)液體混合。再取下通向壓力傳感器的止血鉗，此時(shí)顯示器上出現(xiàn)血壓的波動(dòng)曲線。4、實(shí)驗(yàn)觀察（1）觀察正常血壓曲線調(diào)節(jié)掃描速度與增益，可以明顯地觀察到心室射血與主動(dòng)脈回縮形成的壓力變化與收縮壓、舒張壓的讀數(shù)。有時(shí)可以觀察到血壓曲線隨呼吸變化，心搏為一級(jí)波，呼吸波為二級(jí)波。然后將掃描速度調(diào)慢，觀察正常血壓曲線。(2)輕輕提起對(duì)側(cè)完好頸總動(dòng)脈上的備用線，用動(dòng)脈夾夾閉30s(于夾閉前記錄動(dòng)脈通暢時(shí)的血壓曲線)，觀察并記錄血壓變化。出現(xiàn)變化后即取下動(dòng)脈夾，記錄血壓的恢復(fù)過(guò)程。(3)記錄對(duì)照血壓曲線后，用手指按壓頸動(dòng)脈竇(下頜下方內(nèi)側(cè))，觀察并記錄血壓變化。當(dāng)血壓明顯下降時(shí)，則停止按壓，待血壓恢復(fù)(如果血壓反而升高，說(shuō)明按壓的是血管，需重新尋找按壓位置)。(4)刺激主動(dòng)脈神經(jīng)使刺激輸出端連接保護(hù)電極，輕輕提起主動(dòng)脈神經(jīng)上的備用線，小心地將神經(jīng)置于保護(hù)電極之上。記錄對(duì)照血壓曲線后，再用中等強(qiáng)度的連續(xù)電脈沖信號(hào)，通過(guò)保護(hù)電極，刺激神經(jīng)10?20s。血壓出現(xiàn)明顯下降后即可停止刺激，并待血壓恢復(fù)。如果血壓并不下降，可調(diào)整刺激強(qiáng)度或刺激頻率再行刺激。任何刺激都無(wú)效時(shí)，則表示此神經(jīng)并非主動(dòng)脈神經(jīng)。需要重新辨認(rèn)神經(jīng)后再行實(shí)驗(yàn)。(5)分別刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端和外周端雙結(jié)扎主動(dòng)脈神經(jīng)后(務(wù)必結(jié)扎)，從兩扎線結(jié)之間剪斷神經(jīng)。記錄對(duì)照血壓后，同法分別刺激神經(jīng)的中樞端和外周端，觀察并記錄血壓變化。(6)刺激迷走神經(jīng)記錄對(duì)照血壓后，用同樣的方法刺激迷走神經(jīng)，觀察血壓下降曲線與(4)有何不同(如果血壓下降很快、很低，應(yīng)立即停止刺激)。(7)結(jié)扎并剪斷迷走神經(jīng)同時(shí)結(jié)扎雙側(cè)迷走神經(jīng)后剪斷，觀察血壓有何變化。(8)刺激迷走神經(jīng)外周端分別刺激兩側(cè)迷走神經(jīng)外周端，觀察并記錄血壓變化有何不同。(9)腎上腺素對(duì)血壓的影響記錄對(duì)照血壓曲線后，用1ml注射器，從耳緣靜脈注入0.1?0.3ml腎上腺素溶液，觀察并記錄血壓變化及恢復(fù)曲線。(10)乙酰膽堿對(duì)血壓的影響同法注入0.1?0.2ml乙酰膽堿溶液，觀察并記錄注射前后血壓變化。(11)失血對(duì)血壓的影響從另一側(cè)動(dòng)脈插管后慢慢放血，觀察放血量對(duì)血壓的影響。5、整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表家兔血壓實(shí)驗(yàn)記錄表

實(shí)驗(yàn)前血壓對(duì)照實(shí)驗(yàn)時(shí)血壓變化極值恢復(fù)穩(wěn)定值夾閉另一側(cè)頸總動(dòng)脈按壓頸動(dòng)脈竇刺激主動(dòng)脈神經(jīng)刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端刺激主動(dòng)脈神經(jīng)外周端剪斷雙側(cè)迷走神經(jīng)刺激左側(cè)迷走神經(jīng)外周端刺激右側(cè)迷走神經(jīng)外周端注入腎上腺素溶液注入乙酰膽堿溶液失血1（ ml）失血2（ ml）失血3（ ml）【思考題】1、討論各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明血壓正常及發(fā)生變化的機(jī)理。2、如何證明主動(dòng)脈神經(jīng)是傳入神經(jīng)？3、如何證明迷走神經(jīng)外周端對(duì)心臟有調(diào)節(jié)作用？4、試分析主動(dòng)脈神經(jīng)放電與血壓變化的關(guān)系。5、根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明神經(jīng)、藥物對(duì)心率與呼吸的影響。三、參數(shù)設(shè)置：（一）RM6240系統(tǒng)：點(diǎn)擊“實(shí)驗(yàn)”菜單，選擇“循環(huán)”或“自定義實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”菜單中的“兔動(dòng)脈血壓調(diào)節(jié)”。系統(tǒng)進(jìn)入該實(shí)驗(yàn)信號(hào)記錄狀態(tài)。儀器參數(shù)：4通道時(shí)間常數(shù)為直流，濾波頻率100Hz,靈敏度12Kpa,采樣頻率800Hz,掃描速度500ms/div。連續(xù)單刺激方式，刺激強(qiáng)度5~10V,刺激波寬2ms,刺激頻率30Hz。（二）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容.正常血壓曲線。.夾閉右側(cè)頸總動(dòng)脈。.刺激減壓神經(jīng)：（1）刺激完整減壓神經(jīng)（2）刺激減壓神經(jīng)中樞端 （3）刺激減壓神經(jīng)外周端。.刺激迷走神經(jīng)外周端。.靜脈注射NE0.5mlo（三）注意事項(xiàng)：.分離減壓神經(jīng)注意:減壓神經(jīng)要從向心端開(kāi)始往頭端分離,避免損傷神經(jīng),分離時(shí)不使神經(jīng)上帶有結(jié)締組織膜，分離后滴加生理鹽水以防干燥，穿2根線備用。.連接儀器：注意避免動(dòng)脈插管滑出。.夾閉頸總動(dòng)脈時(shí)勿牽拉動(dòng)脈（夾閉，血壓增高；牽拉，血壓下降）。.刺激減壓神經(jīng)，如神經(jīng)損傷，向頭端移動(dòng)（與減壓神經(jīng)放電移動(dòng)方向相反）。.刺激右側(cè)迷走神經(jīng)末梢端，血壓.心率變化更為明顯。三、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求：（10分）.實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 各種影響因素引起動(dòng)脈血壓變化曲線圖。（不要求觀察定量變化）376.DO380.OZl3G4.3C 36E00 3E￡,OO田E.匚0 3匚匚□二

hHEE也就663.00 S72.O3 67&.00 689.00 ?S4,：G0 68S.W 692.00B工￡巨包股4hHEE也就663.00 S72.O3 67&.00 689.00 ?S4,：G0 68S.W 692.00B工￡巨包股4刺謝外周端激壓神級(jí) 曲線類型:血壓4T2,DQ4T6,DD400,00 404.D3400.□□ 492.00 496.□□t復(fù)剌激：頻率30Hi國(guó)榭1Z6B.00 12B9.COtZT?OG1ZT5ATI!?rgCHIZ^lMIWB*00 1Z3T.00.實(shí)驗(yàn)討論：（各1分）1）夾閉頸總動(dòng)脈，血壓升高：夾閉頸總動(dòng)脈一頸動(dòng)脈竇血壓下降一頸動(dòng)脈竇壓力感受器受到刺激減弱一竇神經(jīng)傳入沖動(dòng)心迷走中樞（抑制）一迷走神經(jīng)傳出沖動(dòng)減少一心跳加快.加強(qiáng)一心輸出量增多減少一心交感中樞（興奮）小靜脈收縮一回心血量增多一血壓升高交感神經(jīng)傳出沖動(dòng)增多,交感縮血管中樞（興奮）小動(dòng)脈收縮f外周阻力增大2）刺激完整減壓神經(jīng)及其中樞端均可引起血壓下降，而刺激該神經(jīng)外周端基本不變：兔減壓神經(jīng)是傳入神經(jīng)，其作用是將主動(dòng)脈弓感受器發(fā)出的沖動(dòng)傳入延髓心血管中樞，反射性引起血壓降低。因此，刺激完整的減壓神經(jīng)或其中樞端，使傳入中樞的沖動(dòng)增加，致血壓明顯下降，而刺激其外周端雖又沖動(dòng)傳向外周，但不會(huì)引起血壓變化3）刺激迷走神經(jīng)末梢外周端，引起血壓下降在實(shí)驗(yàn)中，多用刺激右迷走神經(jīng)外周端，其中的副交感神經(jīng)纖維興奮，釋放乙酰膽堿，乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜上的M受體結(jié)合，產(chǎn)生負(fù)性變時(shí)，變力，變傳導(dǎo)作用，出現(xiàn)心率減慢，心輸出量下降，血壓下降。4）靜脈注射去甲腎上腺素后血壓升高：［實(shí)驗(yàn)結(jié)果］各種影響因素引起動(dòng)脈血壓變化曲線圖。［結(jié)果分析］.夾閉一側(cè)頸總動(dòng)脈15s后，觀察到兔動(dòng)脈血壓升高的現(xiàn)象：這是由于頸動(dòng)脈竇管壁的外膜下分布有豐富的感覺(jué)神經(jīng)末梢，是動(dòng)脈張力感受器。這個(gè)感受器位于兔頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)心端，頸內(nèi)動(dòng)脈與頸外動(dòng)脈的分叉交界處。夾閉頸動(dòng)脈后，遠(yuǎn)心端的頸動(dòng)脈竇張力感受器感受到血壓下降，傳出神經(jīng)沖動(dòng)的頻率減慢。信息沿竇神經(jīng)上傳至延髓孤束核心血管中樞。使心迷走緊張減弱，心交感和心縮血管緊張加強(qiáng)，作用于心臟，使心率加快，心輸出量增加，血管收縮，血管外周阻力增加。從而血壓恢復(fù)性升高。若血壓下降過(guò)大，交感縮血管緊張還會(huì)擴(kuò)展到靜脈系統(tǒng)，是靜脈收縮，促進(jìn)血液回心，使每博輸出量增加。.刺激完整減壓神經(jīng)及其中樞端均可引起血壓下降，而刺激該神經(jīng)外周端基本不變：兔減壓神經(jīng)是傳入神經(jīng)，其作用是將主動(dòng)脈弓感受器發(fā)出的沖動(dòng)傳入延髓心血管中樞，反射性引起血壓降低。因此，刺激完整的減壓神經(jīng)或其中樞端，使傳入中樞的沖動(dòng)增加，致血壓明顯下降，而刺激其外周端雖又沖動(dòng)傳向外周，但不會(huì)引起血壓變化。.刺激迷走神經(jīng)后觀察到，刺激迷走神經(jīng)和迷走神經(jīng)外周端都能引起明顯的減壓反應(yīng)，而刺激迷走中樞端則沒(méi)有減壓反應(yīng)，只是稍有輕微抬升變化：迷走神經(jīng)中含從延髓下行的傳出纖維，通向心臟。節(jié)前纖維末端釋放Ach,節(jié)后纖維末端釋放Ach,屬于副交感神經(jīng)纖維，能使cAMP濃度降低，心率減慢，心房收縮力減弱，傳導(dǎo)性減弱。從而使心輸出量變小，平均動(dòng)脈壓降低。此外，還有主動(dòng)脈體化學(xué)感受器的上行纖維在迷走神經(jīng)中并行，化學(xué)感受器受刺激的效應(yīng)是血壓升高。所以，刺激迷走中樞不能引起減壓反應(yīng)，卻可以使血壓輕微抬高。.加入0.2ml0.01%去甲腎上腺素后，觀察到平均動(dòng)脈壓抬高。這是由于去甲腎上腺素與血管平滑肌上的a和B2甲腎上腺