微生物和生化藥學(xué)重點(diǎn)整理

以下內(nèi)容應(yīng)該為選擇題1、質(zhì)粒的性質(zhì)包括：具有遺傳傳遞的能力、具有遺傳交換的能力、具有不相容性。2、質(zhì)粒的復(fù)制子可以分為松弛型復(fù)制子、嚴(yán)緊型復(fù)制子兩種3、用于基因工程的表達(dá)載體，除了應(yīng)含有復(fù)制子，選擇標(biāo)記和多克隆位點(diǎn)外，還應(yīng)該含有啟動(dòng)子、終止子以及編碼翻譯起始信號(hào)的序列4、目的基因的常用制備方法有：化學(xué)合成法、PCR法、基因文庫(kù)法、cDNA文庫(kù)法。5、反轉(zhuǎn)錄法合成cDNA第一鏈所需的引物是（D）polyApolyCpolyGpolyT6、質(zhì)粒的構(gòu)型包括共價(jià)閉合環(huán)狀DNA,開(kāi)環(huán)DNA和線性分子三種。7、制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，外源基因轉(zhuǎn)入早期胚胎的方法有哪些：（1）、基因顯微注射法（2）、反轉(zhuǎn)錄病毒感染法（3）、胚胎干細(xì)胞法（4）、精子載體導(dǎo)入法（5）、基因打靶法8、蛋白質(zhì)多肽的純化方法：離子交換層析疏水層析親和層析凝膠過(guò)濾層析9、動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)方法：懸浮培養(yǎng)法微載體培養(yǎng)法多孔載體培養(yǎng)法微囊化培養(yǎng)法中空纖維培養(yǎng)法10、骨髓瘤細(xì)胞對(duì)環(huán)境敏感，對(duì)培養(yǎng)基要求較高，具體什么要求？11、離體培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞分為貼壁依賴性細(xì)胞、非貼壁依賴性細(xì)胞和兼性貼壁細(xì)胞三類。以下內(nèi)容應(yīng)該為名詞解釋1、反義核酸(antisensenucleicacid)能夠與DNA或mRNA發(fā)生特異性結(jié)合，分別阻斷核酸的轉(zhuǎn)錄或翻譯功能，阻止與病理過(guò)程相關(guān)的核酸或蛋白質(zhì)的生物合成。這種可與DNA或信使RNA結(jié)合的互補(bǔ)鏈2、啟動(dòng)子(promotor)DNA鏈上能與RNA聚合酶結(jié)合并起始mRNA合成的一段序列。3、抗原(antigen,Ag)指能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生(特異性)免疫應(yīng)答，并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物——抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體外結(jié)合，發(fā)生免疫效應(yīng)的(特異性反應(yīng))物質(zhì)4、固定化酶(immobilizedenzyme):是指固定在載體上并在一定空間范圍內(nèi)進(jìn)行催化反應(yīng)的酶。5、抗體工程制藥(antibodyengineeringpharmaceutics):指的是利用基因工程、細(xì)胞工程和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物以及轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)產(chǎn)生抗體藥物的過(guò)程。6、核酶(rybosyme):是具有生物催化功能的RNA。7、次級(jí)代謝產(chǎn)物(secondarymetabolite)：指生物生長(zhǎng)到一定階段才產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜、對(duì)該生物無(wú)明顯生理功能，或并非是該生物生長(zhǎng)和繁殖所必需的物質(zhì)，如抗生素、毒素、激素、色素等。8、定點(diǎn)修飾(sitespecificmodification)：是指選擇蛋白質(zhì)分子上特定位點(diǎn)的基團(tuán)進(jìn)行修飾。問(wèn)答題：1、固定化酶的方法及固定化酶的優(yōu)缺點(diǎn)方法：載體結(jié)合法（物理吸附法、離子結(jié)合法、共價(jià)結(jié)合法）交聯(lián)法包埋法（網(wǎng)格型，微囊型）優(yōu)點(diǎn)：（1）可以多次使用，酶的穩(wěn)定性提高；（2）酶與底物和產(chǎn)物易于分開(kāi)，產(chǎn)物易純化。（3）反應(yīng)條件易控制，可實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化反應(yīng)的連續(xù)化；（4）酶利用率高，催化的底物量增加，用酶量少；（5）比水溶性酶更適合于多酶反應(yīng)。缺點(diǎn)：固定化過(guò)程中往往會(huì)引起酶的失活。2、基因工程的基本過(guò)程基因工程藥物的生產(chǎn)必須首先獲得目的基因（1分），然后用限制性內(nèi)切酶和連接酶將所需目的基因插入適當(dāng)?shù)妮d體（質(zhì)?；蚴删w）中，并轉(zhuǎn)入大腸桿菌或其他宿主菌（細(xì)胞），以便大量復(fù)制目的基因（2分）。對(duì)目的基因要進(jìn)行限制性內(nèi)切酶和核苷酸序列分析（1分）。目的基因獲得后，進(jìn)行目的基因表達(dá)（1分）。將目的基因與表達(dá)載體重組（1分），轉(zhuǎn)入合適表達(dá)系統(tǒng)，獲得穩(wěn)定高效表達(dá)的基因工程菌（細(xì)胞）（1分）。基因的表達(dá)系統(tǒng)有原核生物系統(tǒng)和真核生物系統(tǒng)（1分）。立適于目的基因高效表達(dá)的發(fā)酵工藝（1分），以便獲得較高產(chǎn)量的目的基因表達(dá)產(chǎn)物。建立起一系列相應(yīng)的分離純化（1分）、質(zhì)量控制（1分）、產(chǎn)品保存（1分）等技術(shù)3、制備單抗的基本過(guò)程1、制備目的基因；2、載體DNA與目的基因的連接；3、重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞；4、重組子的篩選與鑒定;5、工程細(xì)胞的培養(yǎng)；6、單抗的分離純化。4、HAT篩選原理B淋巴細(xì)胞編碼次黃嘌呤鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT+）和胸腺嘧啶激酶（TK+）,可以通過(guò)主要途徑和應(yīng)急途徑合成DNA,但B淋巴細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，體外不能長(zhǎng)期存活（4分）。骨髓瘤細(xì)胞為HGPRT-或HGPRT-，只能通過(guò)主要途徑合成DNA，在HAT培養(yǎng)基中，由于氨甲喋呤阻斷了細(xì)胞DNA合成的主要途徑,骨髓瘤細(xì)胞不能存活（4分）。雜交瘤細(xì)胞為HGPRT+和TK+,又具有無(wú)限增殖的能力，因此可以在HAT培養(yǎng)基中無(wú)限增殖（2分）。5、傳統(tǒng)疫苗與現(xiàn)代疫苗比較之下，有哪些不足P127雖然可在一個(gè)健康的人體中激活特異性免疫應(yīng)答，產(chǎn)生特異性抗體和CTL，從而獲得對(duì)該病原體的免疫預(yù)防能力，但對(duì)已感染的個(gè)體卻不能產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，僅有預(yù)防作用?，F(xiàn)代疫苗是治療性疫苗，不僅預(yù)防，還可以誘導(dǎo)患病個(gè)體特異性免疫應(yīng)答，清除病原體或異常細(xì)胞。6、限制抗癌疫苗發(fā)展的因素有哪些7、組合生物合成的定義和常用方法8、大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞的反應(yīng)器有哪些9、分批培養(yǎng)、補(bǔ)料-分批培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)，四種方法的區(qū)別和各自的優(yōu)缺點(diǎn)論述題改變蛋白質(zhì)半衰期的方法1、以紅細(xì)胞