AGS8830-816型實時熒光定量PCR儀操作規(guī)程

AGS8830-8/16型實時熒光定量PCR儀操作規(guī)程.目的規(guī)范AGS8830-8/1卵實時熒光定量PCFK使用操作過程，確保儀器的正常運轉和檢測結果的準確。.范圍該產(chǎn)品基于熒光聚合酶鏈式反應（PCR,與配套的核酸檢測試劑共同使用，在臨床上可對來源于人體的核酸樣本（RNA/DNA進行定量、定性檢測，包括病原體和人類基因項目。.職責科主任負責審核制定AGS8830-8/16型實時熒光定量PCRZ操作規(guī)程；負責AGS8830-8/16型實時熒光定量PCRZ日常使用、保養(yǎng)的監(jiān)督和管理。儀器負責人負責起草AGS8830-8/16型實時熒光定量PCR儀操作規(guī)程；指導和監(jiān)督AGS8830-8/16型實時熒光定量PCRZ日常使用和保養(yǎng)，遇特殊情況及時報告。儀器操作人員負責AGS8830-8/16型實時熒光定量PCRZ使用操作；負責AGS8830-8/16型實時熒光定量PCRZ日常維護、保養(yǎng)和儀器故障報修申請。.實驗環(huán)境溫度本儀器應在室內(nèi)使用，放置儀器的工作臺應水平、穩(wěn)固。儀器要求在海拔2000米以下使用。本儀器應安裝在濕度較低、灰塵較少并遠離水源（如水池、水管等）的地方，室內(nèi)應通風良好，無腐蝕性氣體或強磁場干擾。不要將儀器安放在潮濕或灰塵較多的地方。本儀器上的開口都是為了通風而設，為了避免溫度過熱，一定不要阻塞或覆蓋這些通風孔。單臺儀器使用時，儀器四周的通風孔與最近物體的距離應不小于 30cmi多臺儀器同時使用時，每臺儀器之間的距離應不小于50cm溫度過高會影響儀器的檢測性能或引起故障。不要在陽光和強光源直射的地方使用本儀器，以免影響儀器熒光檢測，并應遠離暖氣、爐子以及其它一切熱源。環(huán)境溫度：10?30c 相對濕度：10?85%.操作步驟開機前的檢查在接通電源以前，應先確認以下內(nèi)容：電源是否與系統(tǒng)要求相符合；確認電源線插頭已正確、可靠的插入電源插座中；確認儀器后側的升級開關是否處于下端“ Normal”位置；周圍工作環(huán)境、儀器的放置條件是否符合要求；開機后熱蓋預熱 2min。開機啟動界面開機自檢通過進入啟動界面.AGS5.2.2軟件啟動后，自動進入主界面。軟件界面介紹主界面介紹五個子按鍵。主界面包含“DNA、”RNA、”自定義”、“文件”和“系統(tǒng)設置”

五個子按鍵。點擊“DNA可進入DNA檢測項目，快速運行DNA檢測項目程序進行檢測。點擊“RNA可進入RNA檢測項目，快速運行RNA檢測項目程序進行檢測。點擊“自定義”可根據(jù)需要自定義設置運行參數(shù)進行檢測。點擊“文件”可進入文件操作界面進行文件的打開、刪除、導入和導出操作。參數(shù)編輯界面介紹參數(shù)編輯界面包含孔位顯示區(qū)、功能區(qū)、按鍵欄?？孜豢赏ㄟ^單擊選中?？赏ㄟ^點擊孔位前的全選按鈕圖標進行全選注：16孔位排布界面如下圖所示,Al：A3"AJA4A5A&A7A3B1凱的打ES B796可以編輯實驗程序參數(shù)、染料、樣品參數(shù)以及查看熒光曲線和標準曲線。程序參數(shù)編輯程序選項包含溫度步設置、循環(huán)步設置、熒光采集點設置、刪除和速度設置+循環(huán)步：添加循環(huán)步，最大循環(huán)為99。2個循環(huán)之間不能交叉，也不能嵌套。+溫度步：添加溫度步。刪除：可以刪除選中的溫度步或者循環(huán)步。速度：可設置變溫速率。讀取熒光：設置需要采集熒光的溫度步。染料設置包含染料選擇和對應染料的增益設置。

報告熒光：可選擇需要采集熒光的染料增益設置：設置選中的染料的增益。樣本參數(shù)編輯選項包括八項分別為：孔位，樣本ID,染料，檢測項目，樣本類型，濃度，檢測結果和Ct值樣本ID由英文字符和數(shù)字組成，最多7位染料顯示選擇的染料檢測項目采用下拉列表的形式，內(nèi)容是判定標準里的檢測項目（ DNA口RNM固定項目，不能

修改）o樣本類型選擇樣本的類型。o檢測結果根據(jù)檢測項目來進行判斷。濃度是表示樣本的濃度標準。針對樣本編輯按鈕欄增加刪除按鍵，當處于選中狀態(tài)時，“刪除”按鍵可用，其他狀態(tài)不可Ct顯示分析后的當前染料的Ct值。功能鍵包括：新建，開始，打開，保存，清除，導出結果，返回。新建：點擊新建彈出新建對話框，可編輯文件名稱，并在文件存儲區(qū)域新建該文件開始：運行當前文件，運行之前需要設置熱蓋溫度和增益設置，運行時需實時保存上傳數(shù)據(jù)（擬合后的熒光數(shù)據(jù)和溫度數(shù)據(jù)）。運行循環(huán)少于5個不分析。打開：可打開歷史文件。保存：保存當前文件修改。清除：清除選中孔位的樣本信息。導出結果：可以將實驗的熒光曲線和結果導出到U盤返回：返回主界面。運行開始運行單擊運行，“運行”按鍵變?yōu)椤巴Ｖ埂卑存I.點擊曲線選項可以查看、導入、導出標準曲線點擊曲線選項運行程序采集熒光過程中可以查看當前實驗的實時熒光曲線、 運行時間、剩余時間、模塊溫度、循環(huán)次數(shù)，可以設置顯示的染料和染料熒光顏色；有實驗結果時，可以查看實驗分析結果，熒光曲線，可以手動分析實驗結果。左上角全選框，點擊之后可以實現(xiàn)全選孔位，全取消孔位選中，而曲線界面會根據(jù)選中的孔位，顯示對應的分析曲線。運行過程中，單擊“停止”按鍵，彈出警告對話框，確認“是否停止實驗？”，確認實驗停止運行，單擊“否”取消該動作，繼續(xù)運行。停止運行后，如果運行的循環(huán)大于等于 5個,則自動分析，否則不分析；然后進入到樣本界面。在運行中異常斷電，系統(tǒng)會在重啟之后提示是否繼續(xù)實驗。分析分析界面1）自動分析和手動分析為互斥，只能同時選擇一個?？梢酝瑫r不勾選，都不勾選，表示不分析。2）自動分析選中，基線（開始和結束）和閾值不可設置。3）手動分析時，基線和閾值可設置，輸入基線和閾值之后 ，單擊鍵盤確認鍵，進行手動分析,調(diào)用分析算法（算法提供），顯示分析后的曲線和結果。通道選擇需要查看的染料，只對當前選中染料進行分析，顯示當前染料的熒光曲線，樣本里顯示所有染料的結果值和CT值?；€設置手動分析才可進行基線設置，結束基線設置需大于等于開始基線。范圍：最小1,上限當前實驗的運行的循環(huán)數(shù)。閾值手動閾值最小值是4,最大值是1000。手動分析時，閾值可以設置。自動分析時，閾值自動計算，不能手動輸入。.檢測程序文件的運行試劑樣本的準備檢測試劑樣本的基本要求準備試劑-----實時熒光定量PCR儀使用0.1mL/0.2mL透明離心試管根據(jù)試劑要求選用5-100仙L合適的加液量。離心操作-----配置完成試劑樣本的試管在放入儀器之前，要用離心機進行離心操作，確保試劑液體處于試管底部，且液體內(nèi)部不含有氣泡。放置試管-----如果樣本數(shù)量少于模塊的孔位數(shù)，那么在放置試管時應盡量將樣本試管均勻地分