流感病毒試劑盒產(chǎn)品的介紹

流感病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒公司的產(chǎn)品分為甲型流感病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒和乙型流感病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒，分別檢測(cè)甲型流感病毒和乙型流感病毒，遵循相同的技術(shù)原理。試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR(Real-TimePCR)技術(shù)作為核心原理。該技術(shù)整個(gè)過程均在完全閉管的狀態(tài)下進(jìn)行,無需PCR后處理冗長(zhǎng)的電泳檢測(cè),解決了常規(guī)PCR產(chǎn)物污染導(dǎo)致的假陽性問題,是目前最先進(jìn)的PCR技術(shù)。試劑盒采用自行設(shè)計(jì)的Taqman探針，自行研制的RNA抽提試劑，自行研制的RT-PCR反應(yīng)體系做成流感病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒，適用于流感病毒引起的呼吸道疾病的輔助診斷。試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法進(jìn)行流感病毒特異性核酸的病原學(xué)診斷，在疾病癥狀出現(xiàn)的早期確定引起呼吸道傳染病的病原體：有利于在疾病早期針對(duì)性進(jìn)行有效的抗生素或特效藥物（如“達(dá)菲”等）治療，減少抗菌素濫用引起的耐藥，縮短其病程，減輕患者的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)；對(duì)于合并其它呼吸道并發(fā)癥的重癥患者、機(jī)體抵抗力低下（兒童、老年、免疫力缺陷等）合并呼吸道感染者等危重患者，積極和早期的特異性治療措施，可以挽救患者的生命或降低其死亡率；對(duì)流感及時(shí)而準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷，有利于對(duì)流感病毒的流行病學(xué)進(jìn)行研究，指導(dǎo)在疾病流行的初期進(jìn)行預(yù)防，從而能極大程度的降低呼吸道傳染病的流行范圍和程度，降低呼吸道傳染病對(duì)社會(huì)的危害。同傳統(tǒng)的雞胚培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、血凝和血凝抑制實(shí)驗(yàn)、抗原檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)相比較，流感病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷的方法具有高特異性、高靈敏度、方便快捷等的特點(diǎn)，具有明顯的應(yīng)用價(jià)值。1、甲型流感病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒敏感性本試劑盒對(duì)甲型流感病毒屬內(nèi)不同亞型病毒均能檢測(cè)。圖中表示對(duì)H1N1、H3N2、H5N2、H9N1、H5N1亞型均能檢出靈敏度以“金標(biāo)準(zhǔn)”方法——流感病毒分離培養(yǎng)法為對(duì)照，本試劑盒檢測(cè)的靈敏度約高于細(xì)胞培養(yǎng)法的100倍以上，比傳統(tǒng)方法大大提高了臨床檢出率。圖中表示病毒稀釋梯度的檢測(cè)結(jié)果，細(xì)胞培養(yǎng)僅能檢出前四個(gè)梯度特異性試劑盒采用針對(duì)流感病毒型高度保守的M基因進(jìn)行引物和探針的設(shè)計(jì)，保證了試劑盒的特異性和保守性。對(duì)呼吸道合胞病毒、乙型流感病毒、呼吸道腺病毒、腸道病毒、副流感病毒、肺炎支原體等檢測(cè)結(jié)果均呈陰性，顯示無非特異性擴(kuò)增，說明該試劑盒具有較高的特異性。穩(wěn)定性確定本試劑盒的有效期為12個(gè)月。臨床性能評(píng)價(jià)本試劑盒共在三家省級(jí)衛(wèi)生醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行了臨床考核，總例數(shù)為1150份，以病毒分離培養(yǎng)法為對(duì)照，陽性符合率為97.74%（130/133），陰性符合率為97.64%（993/1017），總有效率為97.65%（1123/1150）。2、乙型流感病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒敏感性本試劑盒用于乙型流感病毒的檢測(cè)。靈敏度以“金標(biāo)準(zhǔn)”方法——流感病毒分離培養(yǎng)法為對(duì)照，本試劑盒檢測(cè)的靈敏度約高于細(xì)胞培養(yǎng)法的100倍以上，比傳統(tǒng)方法大大提高了臨床檢出率。圖中表示病毒稀釋梯度的檢測(cè)結(jié)果，細(xì)胞培養(yǎng)僅能檢出前四個(gè)梯度特異性對(duì)呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒（H3N2亞型、H1N1亞型）、呼吸道腺病毒、腸道病毒、副流感病毒、肺炎支原體等檢測(cè)結(jié)果均呈陰性，顯示無非特異性擴(kuò)增，說明該試劑盒具有較高的特異性。穩(wěn)定性確定本試劑盒的有效期為12個(gè)月。臨床性能評(píng)價(jià)本試劑盒共在三家省級(jí)衛(wèi)生醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行了臨床考核，總例數(shù)為1347份，以病毒分離培養(yǎng)法為對(duì)照，陽性符合率為97.09%（167/172），陰性符合率為94.55%（1111/1175），總有效率為94.88%（1278/1347）。

其他呼吸道病毒核酸檢測(cè)呼吸道病毒是指一大類能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病變或僅以呼吸道為侵入門戶，主要引起呼吸道外組織器官病變的病毒。呼吸道病毒包括正粘病毒科(Orthomyxoviridae)中的流感病毒；副粘病毒科(Paramyxoviridae)中的副流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒以及其它病毒科中的一些病毒，如腺病毒、風(fēng)疹病毒、鼻病毒、冠狀病毒和呼腸病毒等。據(jù)統(tǒng)計(jì)，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。3、副流感病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒副流感病毒(HPIVs)常常引起兒童、老年人及免疫缺陷人群的呼吸道感染，可以造成反復(fù)發(fā)作的上呼吸道感染（如感冒和喉嚨痛），也能造成嚴(yán)重的反復(fù)感染的下呼吸道疾?。ㄈ绶窝?，支氣管炎和細(xì)支氣管炎）。敏感性本試劑盒用于副流感病毒的檢測(cè)，對(duì)I/II/III型副流感病毒均能檢出。靈敏度以“金標(biāo)準(zhǔn)”方法——病毒分離培養(yǎng)法為對(duì)照，本試劑盒檢測(cè)的靈敏度約高于細(xì)胞培養(yǎng)法的100倍以上，比傳統(tǒng)方法大大提高了臨床檢出率。特異性對(duì)呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒（H3N2亞型、H1N1亞型）、乙型流感病毒、呼吸道腺病毒、腸道病毒、肺炎支原體等檢測(cè)結(jié)果均呈陰性，顯示無非特異性擴(kuò)增，說明該試劑盒具有較高的特異性。穩(wěn)定性確定本試劑盒的有效期為12個(gè)月。4、呼吸道合胞病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒呼吸道合胞病毒是世界范圍內(nèi)嬰幼兒及成人呼吸道感染的首位病毒病原，是嬰幼兒下呼吸道感染的主要原因之一，2歲前的兒童其感染率幾乎達(dá)到100%，及時(shí)準(zhǔn)確的診斷出RSV感染，對(duì)疾病的早期診斷、治療和預(yù)防以及流行病學(xué)的研究都具有極其重要的意義。敏感性本試劑盒用于呼吸道合胞病毒的檢測(cè)。靈敏度以“金標(biāo)準(zhǔn)”方法——病毒分離培養(yǎng)法為對(duì)照，本試劑盒檢測(cè)的靈敏度約高于細(xì)胞培養(yǎng)法的100倍以上，比傳統(tǒng)方法大大提高了臨床檢出率。圖中表示病毒稀釋梯度的檢測(cè)結(jié)果，細(xì)胞培養(yǎng)僅能檢出前四個(gè)梯度特異性對(duì)甲型流感病毒（H3N2亞型、H1N1亞型）、乙型流感病毒、呼吸道腺病毒、腸道病毒、副流感病毒、肺炎支原體等檢測(cè)結(jié)果均呈陰性，顯示無非特異性擴(kuò)增，說明該試劑盒具有較高的特異性。穩(wěn)定性確定本試劑盒的有效期為12個(gè)月。5、呼吸道腺病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒敏感性本試劑盒用于呼吸道腺病毒的檢測(cè)。靈敏度以“金標(biāo)準(zhǔn)”方法——病毒分離培養(yǎng)法為對(duì)照，本試劑盒檢測(cè)的靈敏度約高于細(xì)胞培養(yǎng)法的100倍以上，比傳統(tǒng)方法大大提高了臨床檢出率。特異性對(duì)甲型流感病毒（H3N2亞型、H1N1亞型）、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腸道病毒、副流感病毒、肺炎支原體等檢測(cè)結(jié)果均呈陰性，顯示無非特異性擴(kuò)增，說明該試劑盒具有較高的特異性。穩(wěn)定性確定本試劑盒的有效期為12個(gè)月。6、鼻病毒核酸擴(kuò)增（PCR）熒光診斷試劑盒敏感性本試劑盒用于鼻病毒的檢測(cè)。靈敏度以“金標(biāo)準(zhǔn)”方法——病毒分離培養(yǎng)法為對(duì)照，本試劑盒檢測(cè)的靈敏度約高于細(xì)胞培養(yǎng)法的100倍以上，比傳統(tǒng)方法大大提高了臨床檢出率。特異性對(duì)甲型流感病毒（H3N2亞型、H1N1亞型）、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腸道病毒、副流感病毒、肺炎支原體等檢測(cè)結(jié)果均呈陰性，顯示無非特異性擴(kuò)增，說明該試劑盒具有較高的特異性。穩(wěn)定性確定本試劑盒的有效期為12個(gè)月。

乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）1、HBV核酸定量檢測(cè)的方法和意義目前，乙肝病毒DNA定量檢測(cè)已經(jīng)走進(jìn)大小醫(yī)院，每一個(gè)乙肝患者在診療過程中，都要反復(fù)定期檢測(cè)該指標(biāo)。本試劑盒采用TaqMan的熒光定量PCR方法。TaqMan熒光PCR方法要求有一對(duì)引物及一條探針，探針位于擴(kuò)增目標(biāo)區(qū)段之間，兩端標(biāo)記上特定熒光基團(tuán)，并要使某端基團(tuán)的發(fā)射光譜與另一端基團(tuán)的激發(fā)光譜重合，使得外界檢測(cè)不到發(fā)光基團(tuán)的熒光。本試劑盒通過對(duì)GenBank中超過500例的HBV基因組的分析，選取了HBV進(jìn)化保守的區(qū)域作為檢測(cè)目標(biāo)。并使檢測(cè)區(qū)段在一定程度上盡可能的短，提高探針引物與模板的結(jié)合效率，提高PCR反應(yīng)的效率。乙肝病毒DNA定量已成為判斷乙肝傳染性大小、病情嚴(yán)重程度以及治療效果的硬指標(biāo)，彌補(bǔ)了以往乙肝病毒“兩對(duì)半”檢測(cè)的不足，只要抽血化驗(yàn)檢測(cè)乙肝病毒DNA呈陽性，無論其他乙肝病毒檢測(cè)結(jié)果如何，都說明患者體內(nèi)存在復(fù)制狀態(tài)的乙肝病毒，血液具有一定傳染性，這對(duì)于評(píng)估治療效果和了解病情變化有重要意義。概括的說，HBVDNA檢測(cè)有下列幾點(diǎn)臨床意義：了解乙肝病毒在體內(nèi)存在的數(shù)量。盡管單純的知道體內(nèi)病毒載量并沒有明顯的臨床意義，但是美國(guó)FoxChase癌癥中心進(jìn)行10年隨訪研究表明，HBV感染者的HBV病毒載量與重度慢性肝病(CLD)和肝細(xì)胞癌(HCC)的發(fā)生危險(xiǎn)具有明確的量效關(guān)系。2）、病毒是否高復(fù)制。慢性HBV患者常常伴有HBV的復(fù)制，但是復(fù)制的程度不一樣。HBV在人體內(nèi)處于一個(gè)復(fù)制與被免疫系統(tǒng)清除的平衡狀態(tài)，如果復(fù)制程度過高造成細(xì)胞異常，免疫系統(tǒng)或者未能有效清除病毒為發(fā)病造就隱患，或者過度活躍導(dǎo)致肝功能受損。3）、是否傳染，傳染性有多強(qiáng)。乙肝患者都具有傳染性，高滴度病毒提示體內(nèi)病毒復(fù)制活躍，傳染性高。陰性則相反，病毒復(fù)制已得到抑制，血液中含量底，傳染性弱。4）、判斷藥物治療效果。服藥前后的DNA定量的變化速度及幅度可為判斷藥物療效及劑量的明顯依據(jù)。慢性乙肝患者一般沒有明顯的表觀癥狀，短期內(nèi)的兩對(duì)半的檢測(cè)（抗原抗體變化）可能不大明顯，難以判斷藥效。一般臨床上需定期監(jiān)測(cè)HBVDNA定量的變化，跟蹤病情發(fā)展，判斷藥物療效、傳染性等，結(jié)合其他檢測(cè)的結(jié)果還可以判斷是否變異，以確定下一步的治療方案。目前國(guó)內(nèi)外乙肝藥物的開發(fā)也都以治療患者HBV含量的降低為重要參考指標(biāo)。HBVDNA定量檢測(cè)指標(biāo)降低在乙肝治療中有著非常重要的意義，是乙肝轉(zhuǎn)陰的前奏，也是康復(fù)最為關(guān)鍵的一步，只有體內(nèi)的HBVDNA定量指標(biāo)降低，病毒的復(fù)制繁殖才會(huì)停止，乙肝的徹底治愈才有希望。2、HBV核酸定量檢測(cè)試劑盒敏感性本試劑盒用于乙型肝炎病毒的定量檢測(cè)，對(duì)各型HBV均能檢出。靈敏度本試劑盒的有效檢測(cè)線性范圍103~109IU/mL。圖中表示對(duì)HBV國(guó)家線性定量靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品（L0-L6）的檢測(cè)結(jié)果特異性對(duì)甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、腺病毒、腸道病毒、流感病毒、肺炎支原體等檢測(cè)結(jié)果均呈陰性，顯示無非特異性擴(kuò)增，說明該試劑盒具有較高的特異性。穩(wěn)定性確定本試劑盒的有效期為12個(gè)月。臨床性能評(píng)價(jià)本試劑盒共在三家省級(jí)衛(wèi)生醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行了臨床考核，總例數(shù)為1540份，以深圳匹基公司產(chǎn)品為對(duì)照，陰性性符合率為97.47%（655/672），陽性符合率為97.81%（849/868），定量結(jié)果的相關(guān)性為95.80%，定量準(zhǔn)確。

乙型肝炎病毒基因分型檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）1、HBV基因分型檢測(cè)的方法和意義HBV主要通過宿主免疫機(jī)制引起肝臟損害，細(xì)胞識(shí)別并攻擊受感染的肝細(xì)胞引起炎癥，此過程受包括宿主與病毒的多個(gè)因素影響。病毒基因異質(zhì)性影響著抗原的表達(dá)，可能也從中扮演了重要的角色。不同毒株對(duì)機(jī)體免疫清除抵抗力不同以及其它的因素可能導(dǎo)致了不同基因型具有不同的感染后疾病譜。從目前的研究來看，HBVC基因型與較重的肝臟病變相關(guān)，B型則與較輕的病變相關(guān)；A型與慢性肝炎相關(guān)，D型與急性自限型肝炎相關(guān)。Kao等發(fā)現(xiàn)C型與重癥如肝硬化和肝細(xì)胞癌有關(guān)，B型多存在于年輕的非肝硬化患者中。C型患者多是HBeAg(+)并且血清DNA含量高于B型，C型患者在HBV的免疫清除階段血清轉(zhuǎn)化比B型延遲，同時(shí)C型比B型有更高的C基因啟動(dòng)子突變率。在抗病毒治療中，B型比C型對(duì)拉咪呋啶敏感。Orito等在466例日本病人的研究中，C和B基因型的HBeAg陽性率分別為53％和16％，提示B基因型的清除率較高。Mayerat等比較了35例急性肝炎及30例慢性肝炎病人中的基因型分布，發(fā)現(xiàn)在慢性肝炎組中，A型占80％(28/35)，D型占11％(4/35)；急性肝炎組D型占80％(24/30)，A型占10％(3/30)，提示病毒基因型在病毒-宿主相互作用中有一定差異，原因是基因型A所產(chǎn)生的抗原性要弱于基因型D，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫清除的能力也較弱，導(dǎo)致感染遷延。Lindh等對(duì)東亞地區(qū)的43名基因型為B和C的HBV慢性感染者的基因型及CP變異的研究表明，T1762變異更易出現(xiàn)在C基因型，感染C型后更易出現(xiàn)較重的肝臟炎癥。侯金林等對(duì)148例接受干擾素治療的e抗原陽性的慢性乙肝病人(其中103例來自歐洲16個(gè)中心、45例來自中國(guó)廣州)進(jìn)行分析，研究了干擾素治療結(jié)局與HBV病毒學(xué)特點(diǎn)之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)A基因型對(duì)標(biāo)準(zhǔn)干擾素治療應(yīng)答較好；與B、C或D基因型相比，C基因的氨基酶突變率在A基因型中發(fā)生率最低。我國(guó)HBV型別分布目前我國(guó)的HBV攜帶者眾多，約占10%，其中以B、C型居多，另有少量的A、D型等。乙型肝炎是病毒與機(jī)體免疫應(yīng)答的主要結(jié)果，在沒有特效藥的今天，不同患者的治療效果不一，治療乙肝仍然難有一個(gè)普遍應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)方案。長(zhǎng)期的宿主攜帶和藥物濫用會(huì)提高變異株出現(xiàn)的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)HBV進(jìn)行基因分型以及變異熱點(diǎn)的檢測(cè)，在選擇合適的藥物或制訂治療方案等方面都有重要指導(dǎo)。目前臨床檢測(cè)市場(chǎng)迫切需要有相關(guān)成熟的技術(shù)方案尤其是針對(duì)病毒分子特征以及機(jī)理的方法，來進(jìn)一步指導(dǎo)乙肝的臨床治療以及發(fā)現(xiàn)和構(gòu)建特效藥物。本試劑盒采用熒光PCR法進(jìn)行基因分型，結(jié)合了型特異性引物分型法和型特異性探針分型法的優(yōu)點(diǎn)，既提高了分型靈敏度、精確度，又延續(xù)了方法的快速簡(jiǎn)便性能。選取GenBank中超過300例已明確基因型的HBV基因組，進(jìn)行ClustalW分析并尋找型特異性堿基的分布規(guī)律。所謂型特異性堿基是指各型在同一位置上各自相對(duì)于其他型而異的堿基，也就是說例如在某一位置上A型絕大多數(shù)出現(xiàn)某一個(gè)固定的堿基，而其他型都不會(huì)是這一堿基。再進(jìn)一步找出各型HBVDNA型特異性堿基的聚集區(qū)域，本試劑盒遵循的原則是100bp內(nèi)至少有6個(gè)以上的型特異性堿基才認(rèn)為是型特異性堿基聚集區(qū)域。結(jié)果是A型在第2355堿基附近，B型在第1640堿基附近，C型在第1350堿基附近，D型在第100堿基附近都存在型特異性堿基聚集的區(qū)域。分別針對(duì)各型的堿基聚集區(qū)域設(shè)計(jì)探針和引物，使得探針和引物3’端最后一個(gè)堿基都盡可能包含型特異性堿基。設(shè)計(jì)的同時(shí)考慮探針引物的Tm值、空間結(jié)構(gòu)、相互作用力等因素，使得在一定嚴(yán)謹(jǐn)?shù)耐嘶饻囟壬咸结樢镏粚?duì)相應(yīng)型的模板能進(jìn)行PCR反應(yīng)。設(shè)計(jì)的引物探針與反應(yīng)結(jié)果成正對(duì)應(yīng)，即是說在某一型反應(yīng)中有擴(kuò)增就定為某一型。2、HBV基因分型檢測(cè)試劑盒靈敏度基因定量最低檢測(cè)約為1000IU/mL。試劑盒的線性范圍為1×103~109IU/mL，結(jié)果重現(xiàn)性好。準(zhǔn)確性與S基因序列分析為對(duì)照，大量臨床樣本考核顯示準(zhǔn)確性為98.3%特異性結(jié)果重現(xiàn)性良好，對(duì)于DNA含量高的樣本結(jié)果尤其穩(wěn)定，不發(fā)生型間交叉反應(yīng)。大量臨床樣本考核顯示分型特異性為99.8%。圖中顯示型間不發(fā)生交叉反應(yīng)（左邊為B型反應(yīng)，右邊為C型反應(yīng)）

腸道病毒核酸檢測(cè)腸道病毒（Enterovirus，EV）是小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)的一個(gè)屬，在人類消化道細(xì)胞繁殖，通過血液侵犯其他器官，主要侵犯嬰幼兒免疫力低下者，可引起各種臨床綜合病癥，主要引起手足口病，還可引起無菌性腦膜炎、腦干腦炎和脊髓灰質(zhì)炎樣的麻痹等多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病。手足口病和中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染是EV感染而引起的兩大常見臨床癥狀。EV主要包括脊髓灰質(zhì)炎病毒(Poliovirus)、柯薩奇病毒(Coxsackievirus)、?？刹《?EntericCytopathogenicHumanOrphanvirus,簡(jiǎn)稱ECHO病毒)等，相互間有些為重復(fù)命名，1969年后陸續(xù)分離出的新型腸道病毒(NewEnterovirus)，統(tǒng)一編號(hào)為68、69、70、71、72……1、總腸道病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）敏感性對(duì)EV71、CoxA16、Poliovirus、ECHO病毒皆可檢出。靈敏度熒光PCR最低檢測(cè)量可達(dá)0.001個(gè)TCID50，比病毒分離培養(yǎng)靈敏度高1000倍。圖中顯示靈敏度可達(dá)Ct35（即0.001個(gè)TCID50）準(zhǔn)確性經(jīng)大樣本的核酸測(cè)序分析比對(duì)研究表明準(zhǔn)確性為100%。特異性對(duì)呼吸道病毒等無特異擴(kuò)增。2、腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）特異性僅對(duì)EV71可檢出，CoxA16、Poliovirus、ECHO等病毒陰性。靈敏度熒光PCR最低檢測(cè)量可達(dá)0.001個(gè)TCID50，比病毒分離培養(yǎng)靈敏度高1000倍。圖中顯示靈敏度可達(dá)0.001個(gè)TCID50準(zhǔn)確性經(jīng)大樣本的核酸測(cè)序分析比對(duì)研究表明準(zhǔn)確性為100%。3、腸道病毒CoxA16核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）特異性僅對(duì)CoxA16可檢出，對(duì)EV71、Poliovirus、ECHO等病毒陰性。靈敏度熒光PCR最低檢測(cè)量可達(dá)0.001個(gè)TCID50，比病毒分離培養(yǎng)靈敏度高1000倍。圖中顯示靈敏度可達(dá)0.001個(gè)TCID50準(zhǔn)確性經(jīng)大樣本的核酸測(cè)序分析比對(duì)研究表明準(zhǔn)確性為100%。

諾如病毒核酸檢測(cè) 諾如病毒（Noroviruses,NVs）又稱諾瓦克病毒（Norwalkvirus）、類諾瓦克病毒（Norwalk-likevirus）、小圓結(jié)構(gòu)病毒（smallroundstructuredvirus），屬于嵌杯狀病毒科的諾瓦克病毒屬，是導(dǎo)致人類急性胃腸炎的重要病原體之一，食源性病毒性腹瀉約85%與NVs有關(guān)。該病毒的特點(diǎn)是高發(fā)病率、低致病劑量和對(duì)外界抵抗力較強(qiáng)。NVs也是導(dǎo)致急性病毒性腹瀉的主要病原，被WHO定為B類病原。NVs屬于單鏈正股RNA病毒，基因組約7.7kb，編碼3個(gè)開放閱讀框（ORF1、ORF2、ORF3），各ORF間有部分基因重疊，具有高度變異特性。諾如病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）特異性僅對(duì)諾如病毒可檢出，對(duì)其他腸道病毒為陰性。靈敏度熒光PCR最低檢測(cè)量可達(dá)0.001個(gè)TCID50，比病毒分離培養(yǎng)靈敏度高1000倍。圖中顯示靈敏度可達(dá)0.001個(gè)TCID50準(zhǔn)確性經(jīng)大樣本的核酸測(cè)序分析比對(duì)研究表明準(zhǔn)確性為100%。

星狀病毒核酸檢測(cè)星狀病毒（Astrovirus）由于電鏡下病毒顆粒呈星形而得名。世界各地均已有星狀病毒感染的報(bào)道,既可散發(fā)也可以引起暴發(fā)流行,亦可引起醫(yī)源性感染。星狀病毒感染多發(fā)生在2歲以內(nèi)尤其是1歲以內(nèi)的嬰幼兒，是病毒性胃腸炎的第二位病因,僅次于輪狀病毒。此外,老年人和免疫缺陷患者也是星狀病毒感染的高危人群,人類免疫缺陷病毒感染者、接受骨髓移植及聯(lián)合免疫缺陷患者發(fā)生星狀病毒感染均已有報(bào)道。星狀病毒亦是健康成年人發(fā)生胃腸炎的病因之一。星狀病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）特異性僅對(duì)星狀病毒可檢出，對(duì)其他腸道病毒為陰性。靈敏度熒光PCR最低檢測(cè)量可達(dá)0.001個(gè)TCID50，比病毒分離培養(yǎng)靈敏度高1000倍。圖中顯示靈敏度可達(dá)0.001個(gè)TCID50準(zhǔn)確性經(jīng)大樣本的核酸測(cè)序分析比對(duì)研究表明準(zhǔn)確性為100%。腸道腺病毒核酸檢測(cè)腸道腺病毒（Entericadenovirus）是嬰幼兒腹瀉的重要病原體。屬于普通腺病毒的40、41血清型，外形與普通腺病毒相同，為直徑70～80nm的雙鏈DNA病毒，主要侵犯嬰幼兒，通過人與人的接觸傳播，也可經(jīng)糞—口途徑及呼吸道傳播。本病無明顯季節(jié)性，夏秋季略多?？沙时┌l(fā)流行。臨床表現(xiàn)為較重的腹瀉，稀水樣便，每日3～30次不等。常有呼吸道癥狀。如咽炎、鼻炎、咳嗽等，發(fā)熱及嘔吐較輕，可有不同程度的脫水征。病程8～12天。多數(shù)患兒病后5～7個(gè)月內(nèi)對(duì)蔗糖不耐受，并可伴有吸收不良。診斷方法有：免疫電鏡、免疫熒光、PCR等檢測(cè)糞便中腸腺病毒抗原。腸道腺病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）特異性僅對(duì)腸道腺病毒可檢出，對(duì)其他腸道病毒為陰性。靈敏度熒光PCR最低檢測(cè)量可達(dá)0.001個(gè)TCID50，比病毒分離培養(yǎng)靈敏度高1000倍。圖中顯示靈敏度可達(dá)0.001個(gè)TCID50準(zhǔn)確性經(jīng)大樣本的核酸測(cè)序分析比對(duì)研究表明準(zhǔn)確性為100%。

輪狀病毒核酸檢測(cè)輪狀病毒(Rotavirus，RV)是世界范圍內(nèi)引起嬰幼兒腹瀉的主要原因，超過90%的兒童3歲之前都感染過輪狀病毒。在世界范圍內(nèi)每年約有35～60萬名兒童因輪狀病毒腹瀉而死亡。我國(guó)每年5歲以下兒童RV腹瀉約1300萬人次，約3.3～4.7萬兒童死于RV腹瀉。目前還沒有治療輪狀病毒腹瀉的特效藥。世界衛(wèi)生組織將發(fā)展疫苗作為控制感染的首要措施。輪狀病毒主要感染小腸上皮細(xì)胞，從而造成細(xì)胞損傷，引起腹瀉。感染從無癥狀、輕微發(fā)病到嚴(yán)重發(fā)病，嚴(yán)重時(shí)發(fā)生致命性胃腸炎、脫水及電解質(zhì)平衡失調(diào)。輪狀病毒胃腸炎的癥狀包括發(fā)燒、嘔吐、腹痛以及無血色水樣腹瀉，癥狀可持續(xù)3～9天，嚴(yán)重出現(xiàn)脫水癥狀甚至死亡。主要以對(duì)癥及支持