總結(jié)生物復(fù)習(xí)：細胞工程

細胞工程前者是細胞水平或細胞器水平上生物技術(shù),后者是分子水平上的生物技術(shù)?？寺《嗬蜓蚣夹g(shù)是

水平上的技術(shù)，培育抗蟲棉是

水平上的技術(shù)。細胞工程與基因工程相比：細胞分子有什么相同點嗎？典例精析知識梳理細胞的全能性與細胞分化植物細胞工程動物細胞工程細胞工程知識歸納比較細胞工程植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植植物細胞工程動物細胞工程理論基礎(chǔ)細胞的全能性其他動物細胞技術(shù)的基礎(chǔ)二植物細胞工程的基本技術(shù)一）細胞的全能性

1、概念：生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能。2、原因：受精卵有絲分裂體細胞含全套遺傳基因3、全能性的程度（1）受精卵的全能性最高

受精卵生殖細胞體細胞＞＞（2）植物細胞＞動物細胞

（3）4、形成不同組織、器官原因：基因選擇性表達5、條件：

（1）離體狀態(tài)，（2）完全營養(yǎng)物質(zhì)、激素

一.細胞的全能性與細胞分化（1）細胞的全能性是指已分化的細胞仍具有發(fā)育成完整個體的潛能。其原因是生物體的每一個細胞都包含有該物種特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成完整個體所必需的全部基因。（2）細胞全能性大小比較植物細胞﹥動物細胞（僅細胞核具全能性）受精卵﹥生殖細胞(卵細胞等)>體細胞幼嫩的細胞﹥衰老的細胞體細胞：分化程度低的﹥分化程度高的分裂能力強的﹥分裂能力弱的植物組織培養(yǎng)三植物組織培養(yǎng)技術(shù)(重點理解)1、概念：

在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。2、原理：植物細胞的全能性3、過程：

外植體

愈傷組織根、芽植物體再分化脫分化也叫：外植體如：莖尖、根尖

適宜的溫度、PH值、養(yǎng)料、激素、充足氧氣條件避光需光無細胞分裂、分化能力特點：具分裂、分化能力，既具全能性（主要）無定形狀態(tài)、高度液泡化、排列疏松、無規(guī)則、無葉綠體,不進行光合作用離體植物細胞（外植體）胚狀體根芽愈傷組織脫分化再分化植物體植物激素：細胞分裂素、生長素植物組織培養(yǎng)的過程雜種細胞愈傷組織雜種植株植物細胞A植物細胞B原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B正在融合的原生質(zhì)體去細胞壁!再生細胞壁植物組織培養(yǎng)植物細胞融合植物體細胞雜交過程將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。4、優(yōu)勢：（與有性雜交方法比較）克服植物遠緣雜交不親和性3、原理：細胞膜的流動性和細胞全能性主要：原生質(zhì)體融合結(jié)果2、概念：四、植物體細胞雜交技術(shù)（重點理解）：如小麥和玉米之間存在生殖隔離四、植物體細胞雜交技術(shù)：重點理解

白菜－甘藍白菜甘藍5、實例：生長期短、耐熱性強和易于貯藏番茄-馬鈴薯（理性圖）比較植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交技術(shù)所屬范疇原理步驟意義聯(lián)系無性繁殖細胞全能性①脫分化②再分化保持優(yōu)良性狀繁殖速度快、大規(guī)模生產(chǎn)提高經(jīng)濟效益雜交技術(shù)應(yīng)用了組織培養(yǎng)克服不同種生物遠緣雜交不親和的障礙①去除細胞壁②融合形成雜種細胞③組織培養(yǎng)膜流動性細胞全能性染色體變異植物細胞工程的實際應(yīng)用植物繁殖的新途徑微型育種作物脫毒人工種子作物新品種的培育單倍體育種誘導(dǎo)突變體細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)人參皂甘的生產(chǎn)單倍體育種1、單倍體的概念:體細胞中含有本物種配子染色體數(shù)目的個體2、單倍體育種涉及的技術(shù):花藥離體培養(yǎng)花藥離體培養(yǎng)

過程:細胞工程植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植植物細胞工程動物細胞工程理論基礎(chǔ)細胞的全能性其他動物細胞技術(shù)的基礎(chǔ)動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶（分解彈性纖維、膠原蛋白）10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞傳代培養(yǎng)細胞株無限傳代細胞系遺傳物質(zhì)改變遺傳物質(zhì)未改變單個細胞動物細胞的培養(yǎng)過程:3、條件：1、無菌、無毒的環(huán)境

2、營養(yǎng)3、溫度和PH

4、氣體環(huán)境：（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)36.5+0.5度；PH為7.2-7.4。O2作用：進行呼吸，提供能量CO2作用：維持培養(yǎng)液的PH值（95%空氣和5%CO2）（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、動物血清、血漿等。）有氧（1）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干

擾素、單克隆抗體等。（2）獲得大量自身的皮膚細胞，用于植皮。（3）用于檢測有毒物質(zhì)（4）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)4、應(yīng)用1、概念：六、動物細胞核移植和克隆動物

將一個動物的細胞核，移入另一個去核的卵母細胞中，使其重組發(fā)育成一個胚胎，最終發(fā)育成動物個體。結(jié)果：原理：分類：克隆動物(用核移植方法得到的動物)動物細胞核的全能性胚胎細胞核移植、體細胞核移植2、動物體細胞核移植的過程供體細胞（供核）細胞培養(yǎng)體細胞卵母細胞（減Ⅱ中期：供質(zhì)）去核無核卵母細胞核移植雜種細胞早期胚胎胚胎移植代孕母體新個體分娩激活卵裂3克隆動物的研究意義1.克隆動物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白2.改良動物品種3.治療人類疾病，作為供體4.保護瀕危動物體細胞核移植技術(shù)存在的問題：許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟器缺陷，免疫失調(diào)等。1、概念：qi、動物細胞融合兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。原理：結(jié)果：細胞膜的流動性得到雜交細胞誘導(dǎo)方式物理法：化學(xué)法：生物法：滅活的病毒(與植物細胞雜交不同點)離心、振動、電刺激；聚乙二醇；2、誘導(dǎo)融合的方法：細胞A細胞B雜種細胞滅活的病毒物理法化學(xué)法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒動物細胞融合比較：培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基性質(zhì)原理比較項目細胞的全能性植物體或組織快速繁殖、培育無病毒植株等蔗糖、植物激素固體培養(yǎng)基植物組織培養(yǎng)細胞株、細胞系獲得細胞或細胞分泌蛋白葡萄糖、動物血清液體培養(yǎng)基細胞增殖動物細胞培養(yǎng)植物、動物細胞融合的比較主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目單克隆抗體制備過程

注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體用篩選培養(yǎng)基篩選專一抗體檢驗1、原理：雜交瘤細胞具有兩個親本的特性，即能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的單一抗體。2、過程B淋巴細胞骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合B-B細胞B-瘤細胞瘤-瘤細胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細胞（