實(shí)驗(yàn)室常用生物安全操作技術(shù)1415

病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)病毒研究所實(shí)驗(yàn)室生物安全實(shí)驗(yàn)室常用生物安全操作技術(shù)

1實(shí)驗(yàn)室常用儀器的生物安全操作

2課程內(nèi)容3生物安全管理組織體系實(shí)驗(yàn)室常用生物安全操作技術(shù)

一.血清分離的生物安全操作

血清分離作為實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)工作，應(yīng)有相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。1.血清分離操作時(shí)應(yīng)戴手套，同時(shí)做好眼晴和粘膜的防護(hù)措施。

2.進(jìn)行血清或血液操作時(shí)，應(yīng)用移液器小心吸取，不能傾倒。

3.移液管使用完后應(yīng)完全浸入適當(dāng)?shù)南疽褐?，要浸泡足夠長(zhǎng)的時(shí)間，然后再丟棄或高壓滅菌后重復(fù)使用。

4.準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出的樣品。5.帶有血凝塊的廢棄樣品管，在加蓋后置于適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)高壓滅菌。二.組織勻漿器和研磨器的生物安全操作

可能造成的危害因素為氣溶膠，溢漏和容器破碎。

1.使用實(shí)驗(yàn)室專用的結(jié)構(gòu)上可以最大限度避免氣溶膠產(chǎn)生的組織勻漿器，homogenizer。當(dāng)使用勻漿器處理危險(xiǎn)度3級(jí)以上的微生物時(shí)，應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行操作。

2.盡量選用在轉(zhuǎn)子軸承和墊圈處有防漏設(shè)計(jì)的機(jī)型。器具的蓋，管和瓶體應(yīng)處于良好狀態(tài)，無裂縫或變形。3.使用勻漿器或超聲處理器，sonicator時(shí)，應(yīng)選擇有一定強(qiáng)度的透明塑料罩設(shè)備，并在操作后進(jìn)行消毒處理。這些儀器也可以在生物安全柜內(nèi)覆蓋塑料蓋后操作。

4.玻璃研磨器,glassgrinder外部應(yīng)使用吸收材料包裹，戴手套操作，以采用聚四乙烯塑料研磨器較為安全。操作和打開研磨器時(shí)應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

三.攪拌器和振蕩器的生物安全操作

可能造成的主要危害為氣溶膠，飛濺物和溢出物。

1.使用實(shí)驗(yàn)室專用的攪拌器,stirrer和混勻器,vortex.2.使用這些儀器前，所使用的管子，蓋子，杯子和瓶子都應(yīng)保持完好，無裂縫，無變形。采用結(jié)實(shí)的螺旋蓋培養(yǎng)瓶，瓶口裝有防護(hù)濾膜。

3.在混勻，振蕩的過程中，容器的壓力會(huì)增加，所以裝容液的容器應(yīng)控制樣品量，含有感染性材料的氣溶膠可能從容器和蓋子之間的空隙逸出。4.使用攪拌器和振蕩器,oscillator時(shí)，應(yīng)有防護(hù)裝置，并在生物安全柜中操作。特別在使用渦旋振蕩器時(shí)，必須在生物安全柜內(nèi)操作，操作的容器必須是密閉的，以免產(chǎn)生氣溶膠和液體飛濺而污染工作臺(tái)面。四.離心機(jī)使用的安全操作技術(shù)

可能造成的危害因素為氣溶膠，飛濺物和離心管液體泄露。在離心過程中可以產(chǎn)生高速運(yùn)動(dòng)的氣溶膠顆粒，在傳統(tǒng)開口的I級(jí)和II級(jí)生物安全柜內(nèi)，也不能防護(hù)這些產(chǎn)生的氣溶膠。1.在使用離心機(jī)時(shí)，應(yīng)按操作程序使用離心機(jī)，保持離心機(jī)有良好的機(jī)械性能。

2.離心管和裝液體的容器應(yīng)為厚壁玻璃，最好為塑料制品，應(yīng)檢查是否破損。

3.用于離心的試管和標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊。采用封閉式的吊桶，離心杯和轉(zhuǎn)頭。固定角轉(zhuǎn)頭要加蓋離心，用前要檢查密封圈是否完好。水平轉(zhuǎn)頭最好選用風(fēng)屏密閉式的離心機(jī)。4.離心機(jī)吊桶，套管，離心管必須按重量配對(duì)，準(zhǔn)確配平，空離心桶應(yīng)當(dāng)用水來平衡，而不能使用鹽溶液。離心管中溶液不能裝過量，應(yīng)留有適當(dāng)空間。5.對(duì)危險(xiǎn)度3級(jí)和4級(jí)的微生物，必須使用可封口的離心桶。生物安全管理組織體系

我國(guó)的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理組織體系由國(guó)家、地區(qū)、單位上級(jí)主管部門、實(shí)驗(yàn)室所在單位和實(shí)驗(yàn)室五個(gè)層面構(gòu)成。國(guó)家病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專家委員會(huì)

組成由國(guó)務(wù)院衛(wèi)生主管部門和獸醫(yī)主管部門會(huì)同國(guó)務(wù)院有關(guān)部門與病原學(xué)、免疫學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、流行病學(xué)、預(yù)防獸醫(yī)學(xué)、環(huán)境保護(hù)和實(shí)驗(yàn)室管理等方面的專家組成。職責(zé)承擔(dān)從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)立與運(yùn)行的生物安全評(píng)估和技術(shù)咨詢、論證工作。地區(qū)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專家委員會(huì)

組成由省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生主管部門和獸醫(yī)主管部門會(huì)同同級(jí)人民政府有關(guān)部門組織病原學(xué)、免疫學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、流行病學(xué)、預(yù)防獸醫(yī)學(xué)、環(huán)境保護(hù)和實(shí)驗(yàn)室管理等方面的專家組成。職責(zé)承擔(dān)本地區(qū)實(shí)驗(yàn)室設(shè)立和運(yùn)行的技術(shù)咨詢工作。單位或上級(jí)主管部門病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全委員會(huì)

組成由病原微生物實(shí)驗(yàn)室所在單位或上級(jí)主管部門成立的生物安全委員會(huì)。

職責(zé)制定所在單位的生物安全規(guī)章制度、操作規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)操作程序等；對(duì)某些研究方案進(jìn)行審查和風(fēng)險(xiǎn)程度評(píng)估；負(fù)責(zé)日常監(jiān)督和檢查。

實(shí)驗(yàn)室感染控制管理機(jī)構(gòu)

組成該實(shí)驗(yàn)室具有病原微生物有關(guān)的傳染病防治知識(shí)的機(jī)構(gòu)或人員。

職責(zé)承擔(dān)實(shí)驗(yàn)室感染控制工作，定期檢查實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)、病原微生物菌毒種和樣本保存與使用、安全操作、實(shí)驗(yàn)室排放的廢物處置等規(guī)章制度的實(shí)施情況。生物安全委員會(huì)的組成

生物安全委員會(huì)制定所在單位的生物安全政策和操作規(guī)范，研究方案涉及感染性因子，動(dòng)物使用和重組DNA時(shí)，生物安全委員會(huì)應(yīng)進(jìn)行審查。其它工作還包括危險(xiǎn)度評(píng)估，制定新的安全政策和仲裁安全事件糾紛。

生物安全委員會(huì)的組成

⒈生物安全官員⒉生物科學(xué)研究人員⒊醫(yī)務(wù)人員⒋動(dòng)物科學(xué)研究人員⒌技術(shù)人員⒍實(shí)驗(yàn)室管理人員生物安全官員

在一個(gè)研究機(jī)構(gòu)，生物安全官員可以是微生物學(xué)家或者是一位專業(yè)人員，他們可以以兼職的形式來完成這一職責(zé)，必須具有良好的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作背景和實(shí)驗(yàn)室安全工作的經(jīng)驗(yàn)。⒈定期的生物安全檢查⒉確保所有工作人員都接受了適當(dāng)?shù)慕逃团嘤?xùn)⒊對(duì)所有人員進(jìn)行繼續(xù)安全教育⒋為工作人員提供新的安全操作程序和資料⒌參與感染性物質(zhì)和有毒物品意外事故的處理和調(diào)查實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人

組成由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或任命的具有專業(yè)知識(shí)的實(shí)驗(yàn)室生物安全負(fù)責(zé)人。

職責(zé)對(duì)所有員工和實(shí)驗(yàn)室來訪者的安全負(fù)責(zé)。2、生物安全管理制度規(guī)章制度

1.人員培訓(xùn)制度

2.實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)入制度

3.安全計(jì)劃審核制度

4.安全檢查制度

5.事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度

6.危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)制度

7.記錄制度

管理規(guī)范

1.實(shí)驗(yàn)室安全手冊(cè)

2.食品、飲料及類似物品

3.化妝品、發(fā)、珠寶

4.免疫

5.個(gè)人物品

6.內(nèi)務(wù)行為

7.洗手

8.接觸生物源性材料的安全工作行為

9.減少接觸有害氣溶膠行