實驗室常用生物安全操作技術1415

病毒學國家重點實驗室武漢大學基礎醫(yī)學院醫(yī)學病毒研究所實驗室生物安全實驗室常用生物安全操作技術

1實驗室常用儀器的生物安全操作

2課程內(nèi)容3生物安全管理組織體系實驗室常用生物安全操作技術

一.血清分離的生物安全操作

血清分離作為實驗室的常規(guī)工作，應有相應的標準操作程序。1.血清分離操作時應戴手套，同時做好眼晴和粘膜的防護措施。

2.進行血清或血液操作時，應用移液器小心吸取，不能傾倒。

3.移液管使用完后應完全浸入適當?shù)南疽褐校葑銐蜷L的時間，然后再丟棄或高壓滅菌后重復使用。

4.準備適當?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出的樣品。5.帶有血凝塊的廢棄樣品管，在加蓋后置于適當?shù)娜萜鲀?nèi)高壓滅菌。二.組織勻漿器和研磨器的生物安全操作

可能造成的危害因素為氣溶膠，溢漏和容器破碎。

1.使用實驗室專用的結構上可以最大限度避免氣溶膠產(chǎn)生的組織勻漿器，homogenizer。當使用勻漿器處理危險度3級以上的微生物時，應在生物安全柜中進行操作。

2.盡量選用在轉子軸承和墊圈處有防漏設計的機型。器具的蓋，管和瓶體應處于良好狀態(tài)，無裂縫或變形。3.使用勻漿器或超聲處理器，sonicator時，應選擇有一定強度的透明塑料罩設備，并在操作后進行消毒處理。這些儀器也可以在生物安全柜內(nèi)覆蓋塑料蓋后操作。

4.玻璃研磨器,glassgrinder外部應使用吸收材料包裹，戴手套操作，以采用聚四乙烯塑料研磨器較為安全。操作和打開研磨器時應當在生物安全柜內(nèi)進行。

三.攪拌器和振蕩器的生物安全操作

可能造成的主要危害為氣溶膠，飛濺物和溢出物。

1.使用實驗室專用的攪拌器,stirrer和混勻器,vortex.2.使用這些儀器前，所使用的管子，蓋子，杯子和瓶子都應保持完好，無裂縫，無變形。采用結實的螺旋蓋培養(yǎng)瓶，瓶口裝有防護濾膜。

3.在混勻，振蕩的過程中，容器的壓力會增加，所以裝容液的容器應控制樣品量，含有感染性材料的氣溶膠可能從容器和蓋子之間的空隙逸出。4.使用攪拌器和振蕩器,oscillator時，應有防護裝置，并在生物安全柜中操作。特別在使用渦旋振蕩器時，必須在生物安全柜內(nèi)操作，操作的容器必須是密閉的，以免產(chǎn)生氣溶膠和液體飛濺而污染工作臺面。四.離心機使用的安全操作技術

可能造成的危害因素為氣溶膠，飛濺物和離心管液體泄露。在離心過程中可以產(chǎn)生高速運動的氣溶膠顆粒，在傳統(tǒng)開口的I級和II級生物安全柜內(nèi)，也不能防護這些產(chǎn)生的氣溶膠。1.在使用離心機時，應按操作程序使用離心機，保持離心機有良好的機械性能。

2.離心管和裝液體的容器應為厚壁玻璃，最好為塑料制品，應檢查是否破損。

3.用于離心的試管和標本容器應當始終牢固蓋緊。采用封閉式的吊桶，離心杯和轉頭。固定角轉頭要加蓋離心，用前要檢查密封圈是否完好。水平轉頭最好選用風屏密閉式的離心機。4.離心機吊桶，套管，離心管必須按重量配對，準確配平，空離心桶應當用水來平衡，而不能使用鹽溶液。離心管中溶液不能裝過量，應留有適當空間。5.對危險度3級和4級的微生物，必須使用可封口的離心桶。生物安全管理組織體系

我國的實驗室生物安全管理組織體系由國家、地區(qū)、單位上級主管部門、實驗室所在單位和實驗室五個層面構成。國家病原微生物實驗室生物安全專家委員會

組成由國務院衛(wèi)生主管部門和獸醫(yī)主管部門會同國務院有關部門與病原學、免疫學、檢驗醫(yī)學、流行病學、預防獸醫(yī)學、環(huán)境保護和實驗室管理等方面的專家組成。職責承擔從事高致病性病原微生物相關實驗活動實驗室的設立與運行的生物安全評估和技術咨詢、論證工作。地區(qū)病原微生物實驗室生物安全專家委員會

組成由省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生主管部門和獸醫(yī)主管部門會同同級人民政府有關部門組織病原學、免疫學、檢驗醫(yī)學、流行病學、預防獸醫(yī)學、環(huán)境保護和實驗室管理等方面的專家組成。職責承擔本地區(qū)實驗室設立和運行的技術咨詢工作。單位或上級主管部門病原微生物實驗室生物安全委員會

組成由病原微生物實驗室所在單位或上級主管部門成立的生物安全委員會。

職責制定所在單位的生物安全規(guī)章制度、操作規(guī)范和標準操作程序等；對某些研究方案進行審查和風險程度評估；負責日常監(jiān)督和檢查。

實驗室感染控制管理機構

組成該實驗室具有病原微生物有關的傳染病防治知識的機構或人員。

職責承擔實驗室感染控制工作，定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌毒種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢物處置等規(guī)章制度的實施情況。生物安全委員會的組成

生物安全委員會制定所在單位的生物安全政策和操作規(guī)范，研究方案涉及感染性因子，動物使用和重組DNA時，生物安全委員會應進行審查。其它工作還包括危險度評估，制定新的安全政策和仲裁安全事件糾紛。

生物安全委員會的組成

⒈生物安全官員⒉生物科學研究人員⒊醫(yī)務人員⒋動物科學研究人員⒌技術人員⒍實驗室管理人員生物安全官員

在一個研究機構，生物安全官員可以是微生物學家或者是一位專業(yè)人員，他們可以以兼職的形式來完成這一職責，必須具有良好的微生物學實驗室工作背景和實驗室安全工作的經(jīng)驗。⒈定期的生物安全檢查⒉確保所有工作人員都接受了適當?shù)慕逃团嘤枹硨λ腥藛T進行繼續(xù)安全教育⒋為工作人員提供新的安全操作程序和資料⒌參與感染性物質(zhì)和有毒物品意外事故的處理和調(diào)查實驗室負責人

組成由實驗室負責人或任命的具有專業(yè)知識的實驗室生物安全負責人。

職責對所有員工和實驗室來訪者的安全負責。2、生物安全管理制度規(guī)章制度

1.人員培訓制度

2.實驗室準入制度

3.安全計劃審核制度

4.安全檢查制度

5.事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報告制度

6.危險標識制度

7.記錄制度

管理規(guī)范

1.實驗室安全手冊

2.食品、飲料及類似物品

3.化妝品、發(fā)、珠寶

4.免疫

5.個人物品

6.內(nèi)務行為

7.洗手

8.接觸生物源性材料的安全工作行為

9.減少接觸有害氣溶膠行