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文檔簡介
實(shí)驗(yàn)九醬油中氨基酸總量的測定
—甲醛法(微型滴定)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)步驟注意事項(xiàng)儀器試劑問題討論數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解醬油的用途及其制備。2.掌握醬油中氨基酸含量測定的原理和方法。3.學(xué)會微型滴定操作。4.掌握移液管和容量瓶的使用。實(shí)驗(yàn)原理氨基酸是一類兩性物質(zhì),在溶液中以偶極離子的形式存在,不能用直接法滴定氨基酸上的羧基。
氨基與甲醛加成后,由于羥基為吸電子基團(tuán),氮原子上電子云密度顯著降低,消弱了它接受質(zhì)子的能力,使氨基的堿性消失,則可用強(qiáng)堿如NaOH來滴定氨基酸的羧基,從而測定醬油中氨基酸的總量。儀器與試劑1.儀器微型滴定管(3mL)、容量瓶(100mL)、移
液管(5mL、10mL)、錐形瓶(25mL)、燒
杯、電子天平(0.01g)、抽濾裝置等。2.試劑醬油、HCHO(18%)、NaOH(約0.1mol·L-1)、
活性炭、酚酞指示劑(0.04%醇溶液)、濾紙等
實(shí)驗(yàn)步驟醬油脫色減壓過濾微型滴定定容100mL用移液管取10.00mL醬油,加入4g活性炭,加熱煮沸,脫色(攪拌)10min。減壓過濾墊2層濾紙,傾注法過濾,洗滌時每次用水5mL,洗2-3次。醬油脫色定容將濾液轉(zhuǎn)移至容量瓶中,并洗滌抽濾瓶2-3次,定容至100mL。
固液分離技術(shù)——減壓過濾
容量瓶、比色管的使用——定容操作微型滴定從容量瓶中吸取5.000mL醬油稀釋溶液,加3d酚酞,用NaOH滴定多余的酸.再加入中性甲醛4mL(18%),放置1min后,用NaOH滴定,終點(diǎn)顏色為微紅色。主要操作1.移液操作
(1)移液管準(zhǔn)備:自來水清洗三次,蒸餾水潤洗3次,管壁外的水用濾紙擦干,管內(nèi)的水用洗耳球吹干。移取溶液時,再用待取液潤洗3次。
(2)取液:右手拿移液管,左手拿洗耳球,將溶液吸至刻度線以上,食指封口。
(3)放液:減輕食指壓力,緩慢將溶液放至刻度處,將移液管口與承接容器輕靠,移液管豎直,承接容器傾斜,將溶液緩慢放至承接容器中(半滴處理)。2.定容操作
檢漏—洗滌—無損轉(zhuǎn)移—直立混勻—定容(1)檢漏:容量瓶裝滿水,倒置、靜置1min。(2)洗滌:自來水洗三次,蒸餾水潤洗三次。(3)無損轉(zhuǎn)移:將溶液無損轉(zhuǎn)移至容量瓶中。(4)直立混勻:2/3刻度處,不蓋容量瓶蓋子搖勻。(5)定容:加入蒸餾水至刻度線,搖勻。3.微型滴定操作
微型滴定管的使用與酸堿滴定管相似(1)洗滌時類似移液管。
(2)插入塑料尖嘴以減少半滴誤差,
尖嘴可重復(fù)使用。
(3)讀數(shù)時3位小數(shù)。
項(xiàng)目IIIIII中和醬油中其它酸NaOH滴定的終體積Ve/mLNaOH滴定的初體積V0/mLNaOH中和酸體積V/mL氨基酸滴定NaOH滴定的終體積Ve/mLNaOH滴定的初體積V0/mLNaOH滴定氨基酸的體積V/mL氨態(tài)氮含量(g·100mL-1)平均值(g·100mL-1)偏差相對平均偏差數(shù)據(jù)處理注意事項(xiàng)1.抽濾瓶洗滌干凈,抽濾時墊2層濾紙。2.洗滌時少量多次,每次用水5mL。3.用小燒杯取NaOH溶液。4.甲醛禁止敞口放置,滴一份加一份。5.微型滴定管的讀數(shù)。6.移液管和容量瓶的使用。問題討論1.實(shí)驗(yàn)所用中性甲醛為什么呈微紅色?
答:甲醛中常含有微量甲酸,應(yīng)預(yù)先以酚酞為指示劑,用NaOH溶液中和至溶液呈微紅色。2.NaOH為非基準(zhǔn)試劑,采用什
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