胎膜早破檢測(cè)試劑盒培訓(xùn)資料

深藍(lán)?IGFBP-1Test胎膜早破檢測(cè)試劑盒

Diagnosisof

PermatureRuptureOfMembranes(PROM)胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1檢測(cè)試劑盒（膠體金法）內(nèi)容★PROM定義、發(fā)生率、常規(guī)處理方法★PROM產(chǎn)生原因及危害性★目前PROM常用的診斷方法★

PROM檢測(cè)新方法★深藍(lán)IGFBP-1免疫層析試紙?zhí)ツぴ缙疲≒ROM）凡孕齡＜37孕周的胎膜破裂稱為胎膜早破，又稱為早產(chǎn)(未足月)胎膜早破。胎膜早破是早產(chǎn)和需要進(jìn)入加急病房的新生兒并發(fā)癥（感染、敗血癥、小腸結(jié)腸炎）的最常見原因之一。不能正確地診斷胎膜早破會(huì)導(dǎo)致不能實(shí)施恰當(dāng)?shù)漠a(chǎn)科治療措施胎膜早破發(fā)生率孕婦中有10％被診斷出患有胎膜早破問題。超過50％的懷孕婦女在各種醫(yī)療場(chǎng)所接受胎膜早破測(cè)驗(yàn)。胎膜早破導(dǎo)致了25％－35％的早產(chǎn)發(fā)生。胎膜早破（PROM）常規(guī)處理方法在治療胎膜早破時(shí)，醫(yī)生們會(huì)權(quán)衡延長(zhǎng)孕期和產(chǎn)生嚴(yán)重母嬰綜合癥的風(fēng)險(xiǎn)。處理胎膜早破的方法包括：▲臥床和骨盆支持——促進(jìn)羊水的重新聚集并且避免感染▲引產(chǎn)——減少感染的可能▲宮縮抑制劑——在胎膜早破出現(xiàn)后采用預(yù)防性子宮硫酸鎂來延長(zhǎng)潛伏期.▲皮質(zhì)類固醇——減輕呼吸窘迫癥狀▲抗生素——延長(zhǎng)孕期，減少絨毛膜羊膜炎，新生兒膿血癥，產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎，心室出血備注：根據(jù)不同孕齡，由臨床醫(yī)生根據(jù)孕婦綜合情況確定是保胎治療、避免感染還是中止妊娠行剖腹手術(shù)等胎膜早破產(chǎn)生原因胎膜早破的發(fā)生與多種因素有關(guān)，常見的原因有：1、羊膜炎癥：生殖道病原微生物上行感染，導(dǎo)致胎膜炎癥，使胎膜局部張力下降導(dǎo)致破裂；2、羊膜腔壓力升高：常見于羊水過多或多胎妊娠；3、胎膜受壓不均：胎位異常、骨盆異?；蛱壕薮髮?dǎo)致頭盆不對(duì)稱時(shí)，胎兒先露部（最先進(jìn)入骨盆入口的胎兒部位）不能很好的入盆，導(dǎo)致胎膜受壓不均發(fā)生破裂；或由于先天性或創(chuàng)傷導(dǎo)致宮頸內(nèi)口松弛，胎兒先露部的羊膜囊突入松弛的宮頸內(nèi)口，至胎膜受壓不均及發(fā)育不良而破裂胎膜早破產(chǎn)生原因

4、胎膜發(fā)育不良：缺乏某些營(yíng)養(yǎng)因素，如維生素C、鋅或銅等，可致使胎膜發(fā)育不良，張力下降而破裂；另外，某些細(xì)胞因子可破壞羊膜囊而致胎膜早破。

5、子宮頸功能不全：在非妊娠的狀態(tài)下，子宮頸內(nèi)口可以無(wú)阻力地?cái)U(kuò)大到8.0號(hào)即可以診斷子宮頸功能不全,子宮頸功能不全主要表現(xiàn)在內(nèi)口松弛和峽部缺欠。

6、創(chuàng)傷和機(jī)械性刺激：主要分為醫(yī)源性和非醫(yī)源性兩類，非醫(yī)源性常見的為妊娠晚期的性交活動(dòng)；醫(yī)源性的包括多次羊膜腔穿刺，多次陰道檢查和剝膜引產(chǎn)等胎膜早破危害性1、胎膜早破與難產(chǎn)和感染常?；橐蚬a(chǎn)道及胎兒異常（如骨盆形態(tài)異常、胎兒巨大或發(fā)育畸形等難產(chǎn)因素）既是胎膜早破的常見誘因，胎膜早破又可導(dǎo)致宮內(nèi)感染及羊水減少，因此而發(fā)生宮縮乏力、胎兒宮內(nèi)窘迫，致使難產(chǎn)和剖腹產(chǎn)機(jī)率增加。2、胎膜早破常常會(huì)給準(zhǔn)媽媽和胎兒造成嚴(yán)重的后果。在胎膜突然破裂的瞬間，隨著大量羊水流出，可發(fā)生臍帶脫垂。脫垂的臍帶受胎先露壓迫，宮壁緊裹胎體，影響胎盤血液循環(huán)，可能引起胎兒宮內(nèi)缺氧，這時(shí)醫(yī)生就不得不做剖腹產(chǎn)手術(shù)。

胎膜早破危害性3、胎膜早破還可引起胎盤早剝（胎盤在胎兒娩出前剝離），可導(dǎo)致胎兒死亡及準(zhǔn)媽媽大出血、凝血功能障礙，甚至死亡，危害寶寶和媽媽的生命安全，增加剖腹產(chǎn)率。4、感染是胎膜早破給母體造成的嚴(yán)重后果，感染的程度常常與破膜時(shí)間有關(guān)。胎膜早破超過24小時(shí)，感染率增加5～10倍，準(zhǔn)媽媽的感染首先表現(xiàn)為子宮內(nèi)膜及子宮肌層的炎癥，進(jìn)一步可導(dǎo)致感染中毒性休克的發(fā)生。而胎兒的感染可發(fā)生新生兒窒息、肺炎、敗血癥甚至導(dǎo)致新生兒死亡胎膜早破（PROM）胎膜早破是發(fā)生于臨產(chǎn)前的胎膜破裂，發(fā)病率最高可達(dá)17%;產(chǎn)科常見并發(fā)癥之一，常導(dǎo)致母嬰患病和死亡：早產(chǎn)（最常見）難產(chǎn)胎兒窘迫癥母嬰感染產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎胎兒死亡*AmFamPhysician2006;73:659-64,665-6破膜48小時(shí)孕婦分娩后，感染率為5%～20%，敗血癥率為1：145，死亡率為1：5500。*婦產(chǎn)科學(xué)。人民衛(wèi)生出版社。破膜超過48小時(shí)新生兒感染率高達(dá)100%。*《中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志》2011年第01期

目前PROM的診斷方法15Technique:

羊水是堿性的，可以將pH試紙變色。PerformanceMetrics:陽(yáng)性結(jié)果錯(cuò)誤率高達(dá)17.4%陰性結(jié)果錯(cuò)誤率為12.9%靈敏度90.7%特異性77.2%Drawbacks:

精液、血液、尿液、BV等會(huì)造成干擾。

目前PROM診斷方法一——pH/硝嗪試紙F(tuán)riedman,MLDiagnosisofrupturedmembranesAJOG1969104;544-55016Technique:

通過顯微鏡觀察羊水干樹枝狀結(jié)晶PerformanceMetrics:陽(yáng)性結(jié)果錯(cuò)誤率5-30%陰性結(jié)果錯(cuò)誤率12.9%靈敏度51.4%(無(wú)分娩)特異性70.8%(無(wú)分娩)Drawbacks:顯微鏡，醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)，靈敏度低。

目前PROM診斷方法二——羊齒狀結(jié)晶

ReeceEA,Amnioticfluidarborization

Obstet

Gynecol64:248-250,198417Technique:

觀察陰道后穹窿出現(xiàn)羊水池Accuracy:

主觀性強(qiáng)，與醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)有關(guān)。Drawbacks:

窺鏡檢查；其它液體干擾。目前PROM診斷方法三——羊水池18Technique:

超聲檢查可以檢測(cè)到羊水過少，提示存在胎膜破裂的可能。Accuracy:

單獨(dú)使用超聲檢查，結(jié)果可信度不高。一般和其它指標(biāo)合用來確診。Drawbacks:費(fèi)時(shí)；費(fèi)錢

目前PROM診斷方法四—超聲波檢查19Technique:

將稀釋的靛藍(lán)胭脂紅注射到羊膜腔中，通過陰道內(nèi)衛(wèi)生棉球是否被染色判斷胎膜是否發(fā)生破裂。Accuracy:

診斷胎膜破裂的金標(biāo)準(zhǔn)。Drawbacks:

準(zhǔn)確性高，但是具有高度侵襲性（需要羊膜穿刺術(shù)），價(jià)格昂貴。

目前PROM診斷方法五——羊膜腔灌注染料傳統(tǒng)診斷方法檢測(cè)的問題★

傳統(tǒng)方法的要不侵襲性高，要不準(zhǔn)確度不夠，或者兩者都有?！?/p>

約3%的無(wú)任何癥狀的PROM，傳統(tǒng)方法無(wú)法檢出（除羊膜腔灌注染料法，此法極少應(yīng)用）★費(fèi)時(shí)、費(fèi)力21“…ferntestisneithersensitivenorspecificenoughfordiagnosticdeterminationofprematureruptureofmembranes.Werecommendagainstroutinelyprovidingferntestingaloneforthedetectionofrupturedmembranes.”（羊齒狀結(jié)晶法的靈敏度和特異性均不足以診斷PROM，我們不推薦單獨(dú)以此指標(biāo)來檢測(cè)胎膜破裂）“…pH/nitrazinetestissensitiveonlywhenusedinwomenforwhommembranestatusisknown.…thetestdoesnotappeartobesufficientlysensitiveorspecificenoughfordiagnosticdeterminationofprematureruptureofmembranes.”（pH/硝嗪法只有在婦女的胎膜狀態(tài)已知時(shí)才是靈敏的，這種方法對(duì)于檢測(cè)PROM沒有足夠的靈敏度和特異性。NACB.LaboratoryMedicinePracticeGuidelines2007.p142-143.

傳統(tǒng)診斷方法檢測(cè)的問題診斷現(xiàn)狀方法原理性能缺點(diǎn)硝秦(pH)試紙羊水呈堿性，因此會(huì)使硝秦試紙變成藍(lán)色敏感性高，特異性差1、容易污染；2、容易造成假陽(yáng)性；3、準(zhǔn)確度不高。羊齒狀結(jié)晶陰道液圖片，通過顯微鏡觀察羊齒植物狀結(jié)晶敏感性差，特異性高1、需要顯微鏡，需要專業(yè)培訓(xùn)；2、容易污染，導(dǎo)致假陽(yáng)性或者假陰性；3、準(zhǔn)確度不高。積液檢查在陰道后穹隆觀察羊水池依靠醫(yī)生的主觀判斷1、主觀；

2、尿液，精液等液體很容易被認(rèn)為是羊水；3、準(zhǔn)確度不高超聲波利用超聲波技術(shù)檢測(cè)羊水的量只能用于確診需要配有專業(yè)的儀器和專家。羊膜腔染料灌注將有色染料注入羊膜腔，在20到30分鐘之內(nèi)觀測(cè)陰道內(nèi)是否有有色液體流出檢測(cè)胎膜破裂的“金標(biāo)準(zhǔn)”1、具有高度入侵性2、可能導(dǎo)致孕期出血，感染，治療性胎膜破裂，和流產(chǎn)。診斷現(xiàn)狀存在的問題準(zhǔn)確度不高聯(lián)合使用費(fèi)時(shí)工作量大專業(yè)培訓(xùn)。。。臨床需求準(zhǔn)確、快速、安全、方便適用整個(gè)孕期25目標(biāo)1:

尋找羊水中的抗原需遵循以下原則:在羊水中要有很高的濃度；在陰道分泌物中含量很低(當(dāng)胎膜完整時(shí)）目標(biāo)2:

可以開發(fā)具有與標(biāo)志性抗原結(jié)合的抗體，且不和其它蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)或干擾；目標(biāo)3:

開發(fā)準(zhǔn)確、快速的免疫層析的方法檢測(cè)PROM

——尋找新的PROM的標(biāo)志性蛋白PROM檢測(cè)新方法:從上世紀(jì)70年代開始，陸續(xù)從羊水中發(fā)現(xiàn)多種特異性蛋白。PlacentalAlphaMicroglobulin-1(胎盤α微球蛋白-1)PAMG-1PlacentalAlphaMicroglobulin-2(胎盤α微球蛋白-2)PAMG-2AlphaFetaProtein(甲胎蛋白）AFPProlactin(促乳素）PLInsulin-likeGrowthFactorbindingprotein-1胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白－1(IGFBP-1)FetalFibronectin胎兒纖維連接蛋白(fFN)尋找新的PROM的標(biāo)志性蛋白胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白—1★IGFBP-1負(fù)責(zé)胰島素樣生長(zhǎng)因子的儲(chǔ)存和轉(zhuǎn)運(yùn)，是由母兒肝臟細(xì)胞和妊娠蛻膜所產(chǎn)生；IGFBP-1是妊娠3個(gè)月后直到分娩前羊水中最主要的蛋白質(zhì)之一?！镌谌焉飲D女血清及羊水中發(fā)現(xiàn)IGFBP-1，IGFBP-1在羊水中的體積分?jǐn)?shù)比母親血液中高100～1000倍，其他體液較少，宮頸黏液、精液和尿液對(duì)實(shí)驗(yàn)均無(wú)影響?！锂?dāng)發(fā)生胎膜破裂時(shí)，羊水中的IGFBP-1可通過胎膜破口漏出到宮頸陰道中，可作為胎膜早破的檢測(cè)標(biāo)志?！餀z測(cè)IGFBP-1診斷PROM與孕齡大小無(wú)關(guān)，對(duì)足月及未足月妊娠孕婦具有同樣的診斷價(jià)值。ActaObstetGynecolScand1998;77:295-297J.Obstet.Gynecol.Res.1998:24:411-417★由于羊水/血清濃度的差異大，IGFBP-1可用來預(yù)測(cè)胎膜早破和診斷無(wú)明顯羊水流出的隱匿性胎膜早破，且測(cè)試時(shí)不受血液，精液的影響。★IGFBP-1檢測(cè)PROM的靈敏度100%，特異性92%（84%陽(yáng)性預(yù)測(cè)率和100%陰性預(yù)測(cè)率）

EuropeanJ.Obstetrics&GynecologyandReproductiveBiology2005(12):159-163..\歐州婦產(chǎn)雜志IGFBP.pdf胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白—129

▲

胎兒纖維連接蛋白是子宮絨毛膜細(xì)胞外的基質(zhì)成分，存在于絨毛膜和蛻膜之間，主要由滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生。

▲

由于孕21周以后，絨毛膜與蛻膜的融合阻止了fFN的釋放，而使正常的孕婦在22-35孕周時(shí)，fFN的含量極低。

▲只有在絨毛膜與蛻膜分離、絨毛膜與蛻膜界面的細(xì)胞外基質(zhì)遭到機(jī)械損傷或蛋白水解酶的降解時(shí)，fFN才可見于宮頸陰道分泌物中。

競(jìng)品—胎兒纖維連接蛋白(fFN)在正常妊娠的22-3▲

胎兒纖維連接蛋白是子宮絨毛膜細(xì)胞外的基質(zhì)成分，存在于絨毛膜和蛻膜之間，主要由滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生。

▲

由于孕21周以后，絨毛膜與蛻膜的融合阻止了fFN的釋放，而使正常的孕婦在22-35孕周時(shí)，fFN的含量極低。

▲只有在絨毛膜與蛻膜分離、絨毛膜與蛻膜界面的細(xì)胞外基質(zhì)遭到機(jī)械損傷或蛋白水解酶的降解時(shí)，fFN才可見于宮頸陰道分泌物中。

5周之間，宮頸陰道分泌物中的fFN的含量<50ng/ml。在此期間，如fFN含量≥50ng/ml，則表明有可能發(fā)生早產(chǎn)。

fFNishighinmaternalbloodandseminalfluid.ChorionicreleaseoffFNcanbemistakenforPROMeventhoughthemembranesareintact.(fFN在母親的血液中和精液中含量高，所以當(dāng)這些存在是，即使胎膜完好，也可能被誤診為PROM）

Erdemogluetal.ActaObstetriciaetGynecologicaScandinavica.2004,Page:622-626ThesensitivityandspecificityoffFnforthedetectionofPROMare90.5%and61.0%respectively.(fFn檢測(cè)PROM的靈敏度為90.5%，特異性只有61.0%）

Omuetal.MedicalPrincipleandPractice.1997,Page:1-831深藍(lán)?IGFBP-1Test☆

是一步免疫層析分析技術(shù)，結(jié)果準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)單，特別適合于孕檢、床邊檢查與家庭自查?！罹芎Y選配對(duì)單克隆抗體，針對(duì)羊水中的標(biāo)志蛋白——IGFBP-1，結(jié)果非常穩(wěn)定與可靠?！钌钏{(lán)?IGFBP-1Test

檢測(cè)范圍很寬，

IGFBP-1濃度(20ng/ml至350μg/ml)均能檢出?？旖葑疃?0秒最長(zhǎng)不超過6分鐘適應(yīng)我國(guó)就診人數(shù)多的現(xiàn)狀提高醫(yī)療效率孕婦更早得到最佳處理降低并發(fā)癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)“一過即出線”安全不良事件為“0”避免操作者與檢測(cè)樣本和檢測(cè)試劑的直接接觸減輕對(duì)環(huán)境的潛在污染簡(jiǎn)單、方便配備齊全即開即用無(wú)需特殊培訓(xùn)，節(jié)約社會(huì)資源避免錯(cuò)誤操作和結(jié)果錯(cuò)判適用范圍——胎膜早破的首選輔助診斷工具：1、疑似病例的診斷；2、疑難病例的診斷；3、需要提供更多客觀診斷依據(jù)的診斷；4、高危孕婦的日常監(jiān)測(cè)；5、羊水量少需要確定是否胎膜早破的診斷；6、需要排除胎膜早破可能性的其他病例的診斷；。。?！貏e是當(dāng)前就診人數(shù)多、診斷壓力大、醫(yī)患矛盾突出的醫(yī)療環(huán)境下，要求醫(yī)務(wù)工作者提供客觀證據(jù)，也要求醫(yī)生具有自我保護(hù)的能力！☆該產(chǎn)品主要原材料全部采用進(jìn)口優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。其中，配對(duì)的單克隆抗體、硝酸纖維素膜均優(yōu)選國(guó)際頂尖企業(yè)產(chǎn)品，通過實(shí)驗(yàn)比較，該產(chǎn)品相比國(guó)內(nèi)外其它同類產(chǎn)品，檢測(cè)結(jié)果具有更高的靈敏度與特異性。☆孕37周前針對(duì)胎膜早破特別是隱匿性胎膜早破；孕37周后針對(duì)胎膜破裂，可預(yù)測(cè)分娩時(shí)間：據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道試驗(yàn)陽(yáng)性后24h~48h內(nèi)正常分娩；而試驗(yàn)陰性者24h~48h內(nèi)均未有臨床癥狀。深藍(lán)?IGFBP-1Test☆試紙條：含PVC膠版、吸水紙、硝酸纖維素膜、玻璃纖維膜、聚酯纖維膜、羊抗鼠多克隆抗體、胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1單克隆抗體A和胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1單克隆抗體B。☆棉拭子☆樣本管：內(nèi)含10mM，pH=7.4的PBS緩沖液1.0mL。IGFBP-1檢測(cè)試劑盒組成深藍(lán)?IGFBP-1Test檢測(cè)步驟第一步:

將棉拭子置于陰道中（5－7厘米深）取樣。第二步:

將棉拭子置于緩沖液中旋轉(zhuǎn)稀釋1min。第三步:

取出棉拭子，將試紙條置于含有樣本的緩沖液中。第四步:5-10min后取出試紙條，讀結(jié)果，15min后結(jié)果無(wú)效。

→→深藍(lán)?IGFBP-1Test結(jié)果判斷1.陽(yáng)性：在檢測(cè)區(qū)（T）及控制區(qū)（C）各出現(xiàn)一條帶，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。2.陰性：僅在控制區(qū)（C）出現(xiàn)一條色帶，檢測(cè)結(jié)果為陰性。3.無(wú)效：控制區(qū)（C）無(wú)色帶出現(xiàn)，表明試驗(yàn)無(wú)效，應(yīng)重新進(jìn)行檢測(cè)。陽(yáng)性陰性無(wú)效CT☆特異性強(qiáng)：針對(duì)性檢測(cè)羊水中的IGFBP-1；☆靈敏度高：1μL羊水量即可檢出，可檢測(cè)出隱匿性的胎膜早破；☆快速準(zhǔn)確：5~10分鐘即可讀結(jié)果；☆操作方便：不需要擴(kuò)陰鏡或其他設(shè)備；☆抗干擾性強(qiáng)：不受血液、精液、尿液和宮頸黏液的影響。☆人為因素影響少，無(wú)需專業(yè)知識(shí)。深藍(lán)?IGFBP-1Test特點(diǎn)以下癥狀推薦使用本產(chǎn)品1.感染：孕期出現(xiàn)過婦科感染，如陰道炎、宮頸炎容易引起胎膜感染，導(dǎo)致胎膜破裂。因此，妊娠晚期應(yīng)禁止性生活，預(yù)防生殖道感染，以確保母子安全。對(duì)出現(xiàn)過感染的孕婦，至少在孕中后期進(jìn)行多次檢查。2.有習(xí)慣性流產(chǎn)或早產(chǎn)病史；孕期應(yīng)進(jìn)行檢查，并應(yīng)讓孕婦家庭備用，檢查陽(yáng)性應(yīng)立即來醫(yī)院進(jìn)一步檢查3.妊娠周期異常情況如陰道分泌物突然增多，必須及時(shí)檢查，檢查頻率最少兩次，至少有一次應(yīng)在分泌物明顯增多的情況下測(cè)試；以下癥狀推薦使用本產(chǎn)品4.妊高征、胎位異常、雙胎妊娠、羊水過多孕婦：由于羊膜腔內(nèi)壓力過高，容易發(fā)生胎膜早破。臀位、橫位及頭盆不稱的孕婦，可因羊膜腔內(nèi)壓力不均而發(fā)生胎膜早破，如果醫(yī)院診斷為以上癥狀，建議醫(yī)生至少開三次檢查量讓孕婦在家庭自查，只要發(fā)現(xiàn)一次有陽(yáng)性，必須立即到醫(yī)院進(jìn)行進(jìn)一步的診斷。5.創(chuàng)傷和機(jī)械性刺激之后，立即進(jìn)行檢查，第二天或者第三天再進(jìn)行一次檢查；創(chuàng)傷和機(jī)械性刺激主要分為醫(yī)源性和非醫(yī)源性2類。非醫(yī)源性常見的為妊娠晚期的性交活動(dòng)；醫(yī)源性的包括多次羊膜腔穿刺，多次陰道檢查和剝膜引產(chǎn)等以下癥狀推薦使用本產(chǎn)品6.先天性羊膜發(fā)育異常及遺傳性羊膜過薄，由于胎膜的強(qiáng)度主要依靠