人過氧化物酶pod說明書

書--谷研生物公司銷售本試劑 研究使用檢測范圍5U/L-120使用目的

本試劑盒用于測定人、血漿及相關液體樣本中過氧化物酶（POD）含量。本試劑盒應抗體夾心法測定標本中人過氧化物酶（POD）水平。用純化的人過氧（POD），再與HRP標記的過氧化物酶（POD）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化物酶（POD）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人過氧化物酶（POD）濃度。試劑盒組130倍濃縮洗滌20ml×17終止6ml×12酶標試6ml×18標準品（2400.5ml×13酶標包被12孔×89標準品稀釋1.5ml×146ml×1說明1顯色劑A顯色劑B液

6ml×16ml×1/

封板 2密封 1標本后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性操作步 釋5號標準150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋4號標準150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋

3號標準2號標準1號標準

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔50μl然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備洗滌：揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如重復5次，拍干加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外溫育：操作同3洗滌：操作同5A50μlB50μl，輕輕震蕩混勻，3715分鐘終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結計以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計封板膜只限使用，以避免交叉污染底物請避光保存嚴格