動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)上課

動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)上課主要技術(shù)植物細胞工程技術(shù)動物細胞工程技術(shù)植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合胚胎移植單克隆抗體技術(shù)核移植基礎(chǔ)

資料：燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學們想一想如何來治療該病人？取該患者的皮膚進行細胞培養(yǎng),獲得足量的細胞后再移植。一、動物細胞培養(yǎng)（一）動物細胞培養(yǎng)的過程結(jié)合圖2-16，閱讀P44最后一段至P46第一段結(jié)束。1、找出關(guān)鍵詞并理解它們的含義。2、敘述動物細胞培養(yǎng)的過程。細胞貼壁細胞的接觸抑制原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞懸液3、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？不能。動物細胞培養(yǎng)的結(jié)果：使細胞數(shù)目增多。通常取動物胚胎或幼齡動物的組織、器官因為其分化程度低、增殖能力強，更容易培養(yǎng)。說明細胞與細胞間的主要物質(zhì)是蛋白質(zhì)1.動物細胞培養(yǎng)對培養(yǎng)的材料有要求嗎？3.用胰蛋白酶處理，組織就會分散成單個細胞，說明了什么？2.為什么在培養(yǎng)前要將組織分散成單個細胞？成塊的組織不利于培養(yǎng)，分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng)。4.胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什么？胰蛋白酶除了可以消化細胞間的蛋白外，長時間的作用也會消化細胞膜蛋白，因此必須控制好胰蛋白酶的處理時間。5.人類一般保存的是哪類細胞呢？為什么？保存10代以內(nèi)的細胞。因為10－50代部分細胞的細胞核型可能發(fā)生變化，有少部分還發(fā)生突變向癌細胞方向發(fā)展。細胞懸浮液10代細胞50代細胞無限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞系如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細胞株和細胞系？遺傳物質(zhì)改變遺傳物質(zhì)未改變（二）動物細胞培養(yǎng)的概念（P44）就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和增殖。原理：細胞增殖想一想：動物細胞培養(yǎng)的基本原理是什么？（三）動物細胞培養(yǎng)條件能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？1、無菌、無毒的環(huán)境對培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進行無菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素;定期更換培養(yǎng)液；2、營養(yǎng)葡萄糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等動物血清、血漿3、溫度和pH溫度36.5±0.5度，pH7.2～7.44、氣體環(huán)境O2和CO2（95%空氣和5%CO2）O2是細胞代謝所必需的。CO2維持培養(yǎng)液的pH。（四）動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用1、生產(chǎn)生物制品

病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；3、用于檢測有毒物質(zhì)及毒性；2、動物基因工程離不開動物細胞的培養(yǎng)；4、培養(yǎng)正常或各種病變的細胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究。閱讀P46-47獲得細胞或細胞產(chǎn)物細胞的全能性細胞數(shù)目增多一般為植物體培養(yǎng)結(jié)果快速繁殖、培育脫毒作物等培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清促生長因子蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細胞增殖原理動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目植物細胞和動物細胞培養(yǎng)的比較復(fù)習：2、敘述動物細胞培養(yǎng)的過程。5、動物細胞培養(yǎng)的條件。1、動物細胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？3、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？4、為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？二、動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物克隆就是無性繁殖，具體地說，是指一個共同的祖先，通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細胞或個體。a.分子水平上：b.細胞水平上：c.個體水平上：1.什么是克?。恳话阒窪NA克隆。指一個單一的細胞分裂所形成的細胞群體。指基因型完全相同的兩個或一個群體。2、克隆動物能否用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得？為什么？目前不能。因為動物細胞的全能性隨著分化程度的提高逐漸受到限制。目前，用動物體細胞克隆的動物，實際上是通過核移植來實現(xiàn)的。

動物體細胞核移植技術(shù)1.回憶克隆羊“多莉”的培育過程Ａ母綿羊Ｂ母綿羊乳腺細胞卵細胞早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠核移植融合后的卵細胞（MⅡ卵母細胞）減數(shù)第二次分裂中期2.結(jié)合P48圖2-21，敘述克隆高產(chǎn)奶牛的培育過程。將供體細胞注入去核卵母細胞核移植胚胎移植供體細胞培養(yǎng)1、對比多莉羊和課本高產(chǎn)奶牛的克隆過程，找出操作過程的不同點？2、討論分析上述哪一種措施更科學？并說明理由？MⅡ卵母細胞細胞質(zhì)中含有的物質(zhì)更易支持胚胎的全程發(fā)育，用它作受體更容易成功。將供體細胞注入受體細胞，使克隆動物更像供體動物，操作也方便。思考與討論：（1）多莉克隆過程中受體細胞是去核卵細胞，高產(chǎn)奶?？寺∵^程中受體細胞是去核卵母細胞。（2）多莉克隆過程是將供體細胞核注入受體細胞，而高產(chǎn)奶牛的克隆過程是將供體細胞注入受體細胞。１、在體細胞的細胞核移植到受體卵母細胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細胞的核？為使核移植動物的核遺傳物質(zhì)全部來自有利用價值的動物提供的細胞。２、用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞，為什么？10代以內(nèi)的細胞一般保持正常二倍體的核型，未發(fā)生突變。討論：3、體細胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物是對體細胞供體動物進行了100%的復(fù)制嗎？為什么？克隆動物絕大部分DNA來自供體細胞核，但核外還有少部分DNA（如線粒體DNA）來自受體卵母細胞。不是動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成為一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。（克隆動物）動物核移植胚胎細胞核移植體細胞核移植（三）體細胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景閱讀P49-501、畜牧業(yè)方面：2、醫(yī)藥衛(wèi)生方