【課件】2.2.1動物細胞培養(yǎng)課件人教版（2019）高中生物選擇性必修3

在治療大面積燒傷時，通常采用的辦法是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植。【從社會中來】但對這樣的病人來說，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，而且產(chǎn)生免疫排斥反應。那么，怎樣才能獲得大量的自體健康皮膚？能不能用自體皮膚的單個細胞培養(yǎng)出可供移植的皮膚？科學家通過動物細胞培養(yǎng)構建了人造皮膚皮膚燒傷2.2動物細胞工程二、動物細胞融合一、動物細胞培養(yǎng)三、動物體細胞核移植動物細胞工程一、動物細胞培養(yǎng)

從動物體中取出相關組織，將它們分散成單個細胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細胞生長和增殖。胚胎或幼齡動物的細胞較成體的細胞更易培養(yǎng)動物細胞工程的基本技術細胞增殖地位原理培養(yǎng)對象

動物細胞培養(yǎng)（一）動物細胞培養(yǎng)的條件（三）干細胞培養(yǎng)及應用（二）動物細胞培養(yǎng)的過程糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等動物血清：含人類未知、細胞生長增殖所必需的物質(zhì)。

將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按種類和所需量嚴格配制的培養(yǎng)基。動物細胞培養(yǎng)常用培養(yǎng)液。合成培養(yǎng)基（一）動物細胞培養(yǎng)的條件加抗生素無菌操作95%空氣+5%O2的CO2培養(yǎng)箱定期更換培養(yǎng)液細胞代謝所必需維持培養(yǎng)液的pH值無毒無菌CO2O2溫度pH36.5±0.5℃7.2~7.4動物胚胎或幼齡動物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個細胞加培養(yǎng)液細胞懸浮液10代細胞部分細胞“癌變”，無限傳代動物細胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成動物體50代細胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞貼壁剝離、分瓶細胞分化程度低，增殖能力強去掉組織間蛋白出現(xiàn)接觸抑制1.培養(yǎng)過程：（二）動物細胞培養(yǎng)的過程（二）動物細胞培養(yǎng)的過程（2）將組織分散成單個細胞時為什么要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理？胃蛋白酶可以嗎？胰蛋白酶可以將動物組織細胞間的蛋白質(zhì)成分酶解，使細胞分散開，獲得單個細胞。胃蛋白酶不可以，pH不適宜。思考-討論:（1）幼齡動物的細胞與老齡動物的細胞比較，分化程度低的細胞與分化程度高的細胞比較，哪些細胞更易于培養(yǎng)？為什么？資料：動物細胞生長特性細胞貼壁2.培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的名詞：細胞的接觸抑制（1）細胞貼壁—懸液中分散的細胞貼附在瓶壁生長的現(xiàn)象；（2）接觸抑制—

當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖的現(xiàn)象。原代培養(yǎng)——初次培養(yǎng)傳代培養(yǎng)——分瓶后的培養(yǎng)（3）原代培養(yǎng)把第1代細胞的培養(yǎng)與傳10代以內(nèi)的細胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。（4）傳代培養(yǎng)

當原代培養(yǎng)的細胞生長停止，這時如果要使細胞繼續(xù)生長，就要及時用胰蛋白酶等，使細胞從瓶壁上解離下來，然后加入新的培養(yǎng)液，將細胞分離稀釋，并從原培養(yǎng)瓶內(nèi)轉接到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)的過程。（5）細胞株從原代培養(yǎng)細胞群中篩選出進行傳代培養(yǎng)的細胞，能傳到40-50代，其遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化。（6）細胞系傳到40-50代后有部分細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去。細胞懸浮液細胞株10代細胞50代細胞細胞系無限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)遺傳物質(zhì)改變原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、細胞株、細胞系四者之間的關系：注意思考-討論動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)有什么相同和不同之處？動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶10代細胞50代細胞無限傳代單個細胞加培養(yǎng)液回顧植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)流程：離體的植物器官、組織或細胞愈傷組織根、芽植物體脫分化再分化接種至培養(yǎng)基動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結果培養(yǎng)目的獲得細胞及代謝產(chǎn)物細胞的全能性許多細胞植物體快速繁殖、培育無病毒植株等葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基細胞增殖植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較：例1.下列屬于動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別()A.動物細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與植物的不同B.動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行C.動物細胞培養(yǎng)過程中可發(fā)生基因重組，而植物組織培養(yǎng)不能D.植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細胞的全能性A1.干細胞：存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。包括胚胎干細胞和成體干細胞等。2.胚胎干細胞：簡稱ES細胞，存在于早期胚胎中，具有分化成為成年動物體內(nèi)任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能。（1）造血干細胞存在于骨髓、臍帶血、外周血，可分化成各種血細胞和免疫細胞全能干細胞多能干細胞（2）神經(jīng)干細胞

取自神經(jīng)系統(tǒng)，可分化成神經(jīng)細胞(3)精原干細胞專能干細胞（三）干細胞培養(yǎng)及其應用3.成體干細胞4.iPS細胞的培養(yǎng)和應用iPS細胞（誘導多能干細胞）將特定基因或特定蛋白導入細胞用小分子化合物誘導形成獲取方法移植取成纖維細胞等iPS細胞轉入相關因子細胞發(fā)生轉化分化病人胰島細胞神經(jīng)元血細胞腸上皮細胞心肌細胞肝細胞iPS細胞用于治療人類疾病示意圖例2.某醫(yī)院接生了一名嬰兒，醫(yī)院為他保留了臍帶血，若后來他患了胰島素依賴型糖尿病，就可以通過臍帶血中的干細胞為其治療。關于這個實例說法正確的()A.用干細胞培育出人體需要的器官來治療疾病，需要激發(fā)細胞的所有全能性B.用臍帶血干細胞能治療這個孩子的所有疾病C.如果要移植用他的干細胞培育出的器官，需要用到細胞培養(yǎng)技術D.如果要移植用他的干細胞培養(yǎng)出的器官，應該長期給他使用免疫抑制藥物C例3.在將動物組織塊分散成單個細胞時，可以使用胰蛋白酶。由此不能推測出來的是()A.動物細胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系B.胰蛋白酶可能會對動物細胞造成損傷C.處理時一定要注意處理時間、加酶量D.換用胃蛋白酶也能起到相同的作用D(2)培養(yǎng)先在B瓶中進行。瓶中的培養(yǎng)基成分有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和

動物血清

等。當細胞分裂生長到

相互接觸

時，就會停止增殖，需用胰蛋白酶處理后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，稱為

傳代培養(yǎng)

。(3)有一類不正常的動物細胞，體外培養(yǎng)不受接觸抑制機制的制約而表現(xiàn)為“瘋長”，這類細胞最可能是

癌細胞

。例4.左圖為動物細胞培養(yǎng)過程示意圖，請回答以下幾個問題：（1）容器A中的動物器官或組織首先要剪碎，