藥物分析藥物鑒別實驗PPT

第二章藥物的鑒別試驗一、概述藥物的鑒別試驗（identificationtest）是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物化學(xué)方法來判斷藥物的真?zhèn)?。二、鑒別實驗的項目（一）

性狀藥物的性狀（description）反映了藥物特有的物理性質(zhì)，一般包括外觀、溶解度和物理常數(shù)等。

1、外觀2、溶解度

3、物理常數(shù)

物理常數(shù)是鑒定藥品質(zhì)量的重要指標。其測定結(jié)果不僅對藥品具有鑒別意義，也反映了該藥品的純雜程度。藥典收載的物理常數(shù)包括：相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。

折光率(20℃):指光線在空氣中進行的速度與供試品中進行速度的比值

比旋度:一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度吸收系數(shù)：摩爾吸收系數(shù)ε（L/mol·cm）百分吸收系數(shù)：在一定波長下溶液濃度在1%（W/V）,厚度為1cm的吸收度,(藥典采用本法)（ml/g·cm）吸光度A=εbc

ε：摩爾吸光系數(shù)b：溶液厚度C：溶液摩爾濃度（二）一般鑒別試驗

一般鑒別試驗（generalidentificationtest）是依據(jù)某一類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或理化性質(zhì)的特征，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)巍o機藥物是根據(jù)其組成的陰離子和陽離子的特殊反應(yīng)；對有機藥物則大都采用典型的官能團反應(yīng)。此法只能鑒別為哪一類藥物,不能證實是哪一種藥物.

1、有機氟化物2、有機酸鹽3、芳香第一胺類4、托烷生物堿類5、無機金屬鹽6、無機酸根

（三）專屬鑒別試驗藥物的專屬鑒別試驗（specificidentificationtest）是證實某一種藥物的依據(jù)，它是根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性不同，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)巍?、有機氟化物

氧瓶燃燒法破壞后用堿吸收供試品-------------------------------------+茜素氟藍試液

+醋酸鈉的醋酸溶液pH=4.3+硝酸亞鈰試液----------藍紫色2、有機酸鹽（1）水楊酸供試品+三氯化鐵------------中性呈紅色弱酸性呈紫色（2）酒石酸供試品（中性）+氨制硝酸銀（加熱）-------銀鏡3、芳香第一胺類供試品+稀鹽酸+亞硝酸鈉+堿性β萘酚試液----橙黃色到猩紅色沉淀4、托烷生物堿類供試品+發(fā)煙硝酸（在水浴上蒸干）----黃色殘渣（冷卻）乙醇（2D）+氫氧化鉀（1粒）------------------------------------------深紫色5、無機金屬鹽類（1）鈉、鉀、鈣鹽的焰色反應(yīng)鉑絲+鹽酸濕潤+蘸取供試品+無色火焰燃燒鈉鹽-----鮮黃色鉀鹽-----紫色鈣鹽-----磚紅色（2）銨鹽供試品+氫氧化鈉（加熱）紅色濕潤石蕊試紙------變藍濕潤硝酸亞汞濾紙------變黑（1）氯化物

氨水硝酸供試品+硝酸+硝酸銀----白色沉淀-------溶解----白色沉淀6、無機酸根

加熱濕潤碘化鉀淀粉試紙供試品+二氧化錳+硫酸---------氯氣---------------------變藍（2）硫酸鹽

鹽酸或硝酸供試品+氯化鋇-----白色沉淀-------------------不溶

醋酸銨或氫氧化鈉供試品+醋酸鉛---白色沉淀--------------------------溶解

三、鑒別方法

（一）化學(xué)鑒別方法

1、呈色反應(yīng)鑒別法2、沉淀生成反應(yīng)鑒別法3、熒光反應(yīng)鑒別法4、氣體生成反應(yīng)鑒別法

5、測定生成物的熔點1、呈色反應(yīng)鑒別法①三氯化鐵呈色反應(yīng)：含酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基的藥物；②異羥肟酸鐵反應(yīng)：芳酸及酯類、酰胺類；③茚三酮呈色反應(yīng)：脂肪氨基；④重氮化—偶合顯色反應(yīng)，芳伯基或水解后產(chǎn)生芳伯基；⑤氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)。2、沉淀生成反應(yīng)鑒別法（1）與金屬離子生成沉淀；（2）與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）生成沉淀；（3）其它沉淀反應(yīng)。3、熒光反應(yīng)鑒別法藥物本身發(fā)射熒光，與硫酸、溴、間苯二酚反應(yīng)后發(fā)射熒光；4、氣體生成反應(yīng)鑒別法藥物與化學(xué)物質(zhì)在加熱條件下生成氣體；5、測定生成物的熔點法:應(yīng)用較少（二）光譜鑒別法1、紫外光譜鑒別法（UV）：測結(jié)構(gòu)中共軛系統(tǒng)；優(yōu)點：多數(shù)的藥物分子含有特征吸收光譜的基團，可作為鑒別的依據(jù)，可進行簡單的定性分析，鑒定共軛發(fā)色團，推斷未知物骨架，可進行定量分析及測定配合物配位比和穩(wěn)定常數(shù)缺點：不同的有機化合物具有不同的吸收光譜，但吸收光譜較簡單，必須采用多規(guī)定參數(shù)法提高專屬性示例一、二、三2、紅外光譜鑒別法紅外光譜法是一種專屬性很強、應(yīng)用較廣（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥、特別適用于用其他方法不易區(qū)分的同類藥物，如磺胺類、甾體激素類和半合成抗生素類藥品。

3、質(zhì)譜（MS）通過帶電粒子碎片按質(zhì)荷比大小排列的譜圖是唯一可以確定分子式的方法；4、核磁共振（NMR）原子核在磁場中選擇性吸收電磁波，從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，吸收的電磁波的頻率不同，產(chǎn)生共振吸收的位置不同，表現(xiàn)為化學(xué)位移不同，從而表征不同的分子結(jié)構(gòu)H核或C核的化學(xué)位移(三)X射線粉末衍射法提供晶體的空間結(jié)構(gòu)信息（四）色譜鑒別法

1、薄層色譜鑒別法

瑞士CAMAGSCANNER3薄層掃描儀島津CS-9000雙波長薄層掃描儀1、薄層色譜將吸收劑或支持劑均勻鋪在玻璃板上（或聚酯薄膜塑料或鋁箔上），把要分離分析的樣品點在薄層色譜板上，用溶劑展開，在日光或紫外光下觀察所獲得的斑點，從而達到分離、分析、鑒定目的。例:藥物中特殊雜質(zhì)的檢查(醋酸可的松中其他甾體的檢查)(1)布板(2)點樣(3)顯色(4)鑒定（1）常用吸附劑或支持

原點至色譜斑點中心的距離(2)比移值Rf==------------------------------------------原點至展開劑前沿的距離供試品的Rf值與標準品的Rf值比較,由此確定供試品的成份.例:硫酸阿米卡星的薄層色譜法鑒別試驗(P35)(1)布板:硅膠H(2)配溶液(供試品)(3)硫酸阿米卡星標準品溶液(4)點樣標準品與供試品分別點樣(5)展開:氯仿:甲醇:濃氨水:水=1:4:2:1展開-------晾干(6)顯色:噴0.2%茚三酮的正丁醇溶液---100℃加熱10min------出現(xiàn)斑點(7)對比:分析標準品和供試品斑點顏色和位置是否相同.2、高效液相色譜鑒別法

氣相色譜鑒別法3、紙色譜鑒別法（五）生物學(xué)法（六）藥物鑒別方法新動向1、儀器方法用于藥物的鑒別數(shù)量大大增加，尤其是紅外光譜法和高效液相色譜法。2、制劑廣泛采用IR法鑒別。3、鑒別條目簡練，選擇專屬的方法進行鑒別，平均每個品種收載2條左右。

四、鑒別試驗條件

鑒別試驗的目的是判斷藥物的真?zhèn)巍?/p>

（一）溶液的濃度:必須嚴格規(guī)定（二）溶液的溫度：加快速度（三）溶液的酸堿度：保持活性（四）試驗的時間：有機物需一定的反應(yīng)時間（五）干擾成分的存在：分離干擾

五、鑒別試驗的靈敏度（一）反應(yīng)靈敏度和空白試驗在一定的條件下，能在盡可能稀的溶液中觀測出盡可能少量的供試品，反應(yīng)對這一要求所能滿足的程度，即稱為反應(yīng)的靈敏度（sensitivity）。它以兩個相互有關(guān)的量，即最低檢出量（minimumdetectablequantity）（又稱檢出限量）和最低檢出濃度（minimumdetectableconcentration）（又稱界限濃度）來表示。所謂空白試驗，就是在供試品鑒別試驗完全相同的條件下，除不加供試品外，其他試劑均同樣加入而進行的試驗。（二）提高反應(yīng)靈敏度的方法

1、加入與水互不相溶的有機溶劑提取濃集2、改進觀測方法作業(yè)：1、藥典收載的物理常數(shù)包括哪些？2、吸收系數(shù)有幾種表示方法？中國藥典收載的是哪種形式？3、何謂空白試驗？4、如何鑒別鈉、鉀、鈣、銨鹽？5、如何鑒別氯化物、硫酸鹽、有機氟化物？6、如何鑒別水楊酸、酒石酸鹽？7、如何鑒別芳香第一胺類、托烷生物堿類？

附一、折光率測定法定義：利用測定物質(zhì)的折光率來進行定性定量的分析方法，叫折光法。折光率是用折光計來測定的，常用阿貝折光計測定。（一）折光的一般原理：光線自一種透明介質(zhì)進入另一個透明介質(zhì)的時候，由于兩種介質(zhì)密度不同，光進行的速度發(fā)生變化，所以，光線就發(fā)生如圖折射：習(xí)題二1、（）。A.百分吸收系數(shù)B.比旋度C.折光率D.熔點E.沸點CDAABE2、在藥物比旋度的計算公式[α]tD=（100×α）/（L×C）中（）A.t是25℃，C的單位是g/100mL，L的單位是cmB.t是25℃，C的單位是g/mL，L的單位是cmC.t是20℃，C的單位是g/mL，L的單位是cmD.t是20℃，C的單位是g/100mL，L的單位是cmE.t是20℃，C的單位是g/mL，L的單位是cm3、藥品質(zhì)量標準中的鑒別試驗是判斷（）A、已知藥品的真?zhèn)蜝、未知藥品的真?zhèn)蜟、藥品的純度D、藥品的療效E、藥品的穩(wěn)定性4、物質(zhì)的折光率與下列因素有關(guān)（）。

A.光線的波長

B.透光物質(zhì)的溫度

C.光路的長短

D.物質(zhì)對光的敏感度

E.雜質(zhì)含量9、旋光度（）。

A.流體藥藥物的物理性質(zhì)

B.不加供試品的情況下，按樣品測定方法，同法操作

C.用對照品代替樣品同法操作

D.用作藥物的鑒別，也可反映藥物的純度

E.可用于藥物的鑒別、檢查和含量測定DAB

D

E5、偏振光旋轉(zhuǎn)的角度（）。

A.折射

B.黏度

C.熒光

D.旋光度

E.相對密度6、雜質(zhì)檢查一般（）。

A.為限度檢查

B.為含量檢查D.檢查最大允許量

C.檢查最低量E.用于原料藥檢查7、空白試驗（）。

A.流體藥藥物的物理性質(zhì)

B.不加供試品的情況下，按樣品測定方法，同法操作

C.用對照品代替樣品同法操作

D.用作藥物的鑒別，也可反映藥物的純度

E.可用于藥物的鑒別、檢查和含量測定8、稱取葡萄糖10.00g，加水溶解并稀釋至100.0mL，于20℃用2dm測定管，測得溶液的旋光度為+10.5°，求其比旋度（）。A.52.5°B.-26.2°C.-52.7°D.+52.5°E.+10510、表示該法測量的重現(xiàn)性（）。A.精密度B.準確度C.定量限D(zhuǎn).相對誤差E.偶然誤差A(yù)BABCDE12、配