標(biāo)準(zhǔn)解讀
GB/T 16287-1996 是一項(xiàng)中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),全稱為《食品中淀粉的測(cè)定方法 酶-比色法》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了一種使用酶催化反應(yīng)結(jié)合比色分析技術(shù)來測(cè)定食品中淀粉含量的方法。以下是標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的具體解讀:
標(biāo)準(zhǔn)適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中淀粉含量的測(cè)定,但不適用于含有高濃度還原糖或強(qiáng)烈色素干擾物質(zhì)的食品樣本,因?yàn)檫@些物質(zhì)可能會(huì)影響檢測(cè)的準(zhǔn)確度。
測(cè)定原理
該方法基于淀粉在淀粉酶的作用下水解為麥芽糖,隨后麥芽糖在麥芽糖酶的進(jìn)一步作用下轉(zhuǎn)化為葡萄糖。通過添加特定試劑使葡萄糖與試劑發(fā)生顯色反應(yīng),形成有色化合物,其顏色深淺與樣品中淀粉含量成正比。利用分光光度計(jì)在特定波長(zhǎng)下測(cè)定該有色化合物的吸光度,即可計(jì)算出樣品中淀粉的含量。
試劑與材料
標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)列出了所需試劑的種類、配制方法及標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備步驟,包括淀粉酶溶液、麥芽糖酶溶液、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液以及顯色試劑等。
操作步驟
- 樣品準(zhǔn)備:對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)處理,如去脂、磨碎、均質(zhì)等,確保淀粉充分釋放。
- 水解反應(yīng):將處理后的樣品與淀粉酶溶液混合,在適宜條件下(如溫度、時(shí)間)進(jìn)行水解。
- 二次水解:加入麥芽糖酶繼續(xù)水解,將產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為葡萄糖。
- 顯色反應(yīng):向水解產(chǎn)物中加入顯色試劑,于特定條件下反應(yīng)一段時(shí)間后,形成穩(wěn)定的有色化合物。
- 吸光度測(cè)定:使用分光光度計(jì)在規(guī)定波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值。
- 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制與樣品測(cè)定:事先用不同濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后根據(jù)樣品的吸光度值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得對(duì)應(yīng)的淀粉含量。
精密度與準(zhǔn)確度
標(biāo)準(zhǔn)提供了重復(fù)性和再現(xiàn)性試驗(yàn)的要求,以確保不同實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的一致性,并規(guī)定了方法的回收率試驗(yàn),用于驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度。
試驗(yàn)報(bào)告
要求測(cè)試報(bào)告應(yīng)包含樣品信息、實(shí)驗(yàn)條件、測(cè)定結(jié)果及必要的計(jì)算過程,確保測(cè)試結(jié)果的可追溯性和透明度。
注意事項(xiàng)
雖然標(biāo)準(zhǔn)結(jié)尾未直接列出總結(jié)性內(nèi)容,但在實(shí)際操作中應(yīng)注意控制實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性和試劑的質(zhì)量,避免干擾因素影響測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外,對(duì)于特殊食品樣本,可能需要預(yù)先進(jìn)行預(yù)處理方法的優(yōu)化,以減少干擾物質(zhì)的影響。
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- 廢止
- 已被廢除、停止使用,并不再更新
- 1996-04-10 頒布
- 1996-12-01 實(shí)施
文檔簡(jiǎn)介
ICS67.040X04中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16287—1996食品中淀粉的測(cè)定方法酶-比色法MethodfordeterminationofstarchinfoodEnzyme-colorimetricmethod1996-04-10發(fā)布1996-12-01實(shí)施國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布
次前言1范圍原理武劑4儀器和設(shè)備5試樣的制備試液的制備7分析步驃分析結(jié)果的表述9允許差附錄A(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)淀粉葡萄糖音酶、葡萄糖氧化酶、過氧化物酶的技術(shù)要求、試驗(yàn)方法及判定規(guī)則
GB/T16287-1996食品中淀粉測(cè)定方法,一般采用化學(xué)方法--酸水解法。由于酸水解淀粉時(shí),樣品中的其他糖類被分解為還原糖(單糖)造成淀粉的測(cè)定結(jié)果偏高。本標(biāo)準(zhǔn)采用酶-比色法是在檢索了近20年74篇國(guó)外文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上.經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)、驗(yàn)證而制定的。要使食品中的淀粉含量測(cè)定準(zhǔn)確,必須使淀粉完全溶解。本標(biāo)準(zhǔn)吸取了法國(guó)Cuher.J.C1982年總結(jié)的有效溶解方法,即二甲基亞碾法,達(dá)到了使淀粉完全溶解的目的淀粉酶解后的產(chǎn)物——葡萄糖的測(cè)定方法,與GB/T16285—1996保持一致。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:中國(guó)農(nóng)星北方食品監(jiān)測(cè)中心。本標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)全國(guó)食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)秘書處審核。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:張宗城、劉寧、郝煜。
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中淀粉的測(cè)定方法CB/T16287-1996比法Methodfordeterminationofstarehinfood-Enzyme-colorimetricmethod1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用酶-比色法測(cè)定食品中淀粉的方法、本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中淀粉的測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)最低檢出限量為0.09″g(淀粉)/mL(試液)。2原理淀粉在淀粉葡萄糖音酶(AGS)催化下,最終水解為葡萄糖。葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧條件下,催化BD-葡萄糖(葡萄糖水溶液)氧化,生成D-葡萄糖酸--內(nèi)酯和過氧化氫。受過氧化物酶(POD)催化,過氧化氫與4-氮基安替比林和苯酚生成紅色配亞胺。在505nm波長(zhǎng)處測(cè)配亞胺的吸光度,計(jì)算食品中淀粉的含量。C.Hi:O:+O:3試劑3.1組合試劑盒1號(hào)瓶:內(nèi)含淀粉葡萄糖音酶(amyloglucosidase)200U(活力單位)、檸檬酸、檸檬酸三鈉;2號(hào)瓶:內(nèi)含0.2mol/L磷酸鹽縵沖液(pH=7.0)200mL,其中含4-氮基安替比林為0.00154mol/L:3號(hào)瓶:內(nèi)含0.022mol/L苯酚溶液200mLi4號(hào)瓶:內(nèi)含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)800U(活力單位)過氧化物醇(辣根·peroxidase)2000U(活力單位)。1、2、3、4號(hào)瓶須在4℃左右保存。3.2酶試劑溶液3.2.1將1號(hào)瓶中的物質(zhì)用重蒸館水溶解,使其體積為66mL。輕輕播動(dòng)(勿劇烈搖動(dòng))使醇完全溶解。此溶液即為淀粉葡萄糖苷酶試劑溶液,其中檸檬酸(緩沖溶液)濃度為0.1mol/L,pH-4.6。在4℃左右保存,有效期1個(gè)月。3.2.2將2號(hào)瓶與3號(hào)瓶中的溶液充分混合:3.2.3將4號(hào)瓶中的酶溶
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