GB/T 18636-2017藍(lán)舌病診斷技術(shù)

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T18636—2017

代替

GB/T18636—2002

藍(lán)舌病診斷技術(shù)

Diagnostictechniquesforbluetongue

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T18636—2017

目次

前言

…………………………Ⅲ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

臨床診斷

3…………………1

流行病學(xué)

3.1……………1

臨床癥狀

3.2……………1

病理變化

3.3……………2

結(jié)果判定

3.4……………2

病毒分離

4…………………2

器材

4.1…………………2

試劑

4.2…………………2

試驗程序

4.3……………2

病毒鑒定

4.4……………4

結(jié)果判定

4.5……………4

免疫酶染色

5………………4

器材

5.1…………………4

試劑

5.2…………………4

試驗程序

5.3……………4

試驗成立條件

5.4………………………5

結(jié)果判定

5.5……………5

抗原捕獲酶聯(lián)免疫吸附試驗

6(AC-ELISA)……………5

器材

6.1…………………5

試劑

6.2…………………5

樣品

6.3…………………5

試驗設(shè)計

6.4……………5

試驗程序

6.5……………5

試驗成立的條件

6.6……………………6

結(jié)果判定

6.7……………6

定型微量中和試驗

7………………………6

器材

7.1…………………6

試劑

7.2…………………6

試驗準(zhǔn)備

7.3……………7

篩檢試驗程序

7.4………………………7

試驗成立的條件

7.5……………………8

結(jié)果判定

7.6……………8

蝕斑及蝕斑抑制定型試驗

8………………8

器材

8.1…………………8

Ⅰ

GB/T18636—2017

試劑

8.2…………………9

蝕斑試驗程序

8.3………………………9

蝕斑抑制試驗程序

8.4…………………9

結(jié)果判定

8.5……………9

反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

9(RT-PCR)……………………9

器材

9.1…………………9

試劑

9.2…………………10

試驗程序

9.3……………10

試驗成立的條件

9.4……………………11

結(jié)果判定

9.5……………11

熒光檢測

10RT-PCR……………………11

器材

10.1………………11

試劑

10.2………………11

試驗程序

10.3…………………………12

閾值設(shè)定

10.4…………………………13

試驗成立的條件

10.5…………………13

結(jié)果判定

10.6…………………………13

瓊脂免疫擴散試驗

11(AGID)…………13

器材

11.1………………13

試劑

11.2………………13

試驗程序

11.3…………………………14

結(jié)果判定

11.4…………………………14

競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗

12(C-ELISA)…………………15

器材

12.1………………15

試劑

12.2………………15

試驗程序

12.3…………………………15

讀數(shù)和抑制率計算

12.4………………16

試驗成立的條件

12.5…………………16

結(jié)果判定

12.6…………………………16

診斷結(jié)果判定

13…………………………16

疑似病例

13.1…………………………16

確診病例

13.2…………………………16

隱性感染

13.3…………………………16

附錄規(guī)范性附錄細(xì)胞培養(yǎng)液的制備

A()………………17

附錄規(guī)范性附錄免疫酶染色試驗用溶液的配制

B()…………………18

附錄規(guī)范性附錄酶聯(lián)免疫試驗和定型微量中和試驗用溶液的配制

C()……………19

附錄資料性附錄方法

D()Karber……………………21

附錄規(guī)范性附錄蝕斑及蝕斑抑制定型試驗

E()………22

附錄規(guī)范性附錄試驗用溶液和引物的配制

F()RT-PCR……………23

附錄規(guī)范性附錄熒光引物和探針的合成與配制

G()RT-PCR……24

附錄規(guī)范性附錄瓊脂平板的制備

H()…………………25

Ⅱ

GB/T18636—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)代替藍(lán)舌病診斷技術(shù)與相比除編輯性修改外

GB/T18636—2002《》,GB/T18636—2002,,

主要技術(shù)變化如下

:

增加了臨床診斷

———;

增加了反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測方法

———(RT-PCR);

增加了熒光檢測方法

———RT-PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院中華人民共和國深圳出入境檢驗檢驗局

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人李華春朱建波花群義肖雷宋建領(lǐng)李樂高林苗海生

:、、、、、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)歷次版本發(fā)布情況為

:

———GB/T18636—2002。

Ⅲ

GB/T18636—2017

藍(lán)舌病診斷技術(shù)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了藍(lán)舌病診斷的技術(shù)方法和試驗程序

(Bluetongue,BT)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于反芻動物藍(lán)舌病的診斷流行病學(xué)調(diào)查及檢疫所述方法包括臨床診斷病原分離和

、。、

鑒定病原核酸檢測以及血清學(xué)檢測其中

、,:

病毒分離適用于從動物的血液臟器和精液中分離藍(lán)舌病病毒

———、(BluetongueVirus,BTV);

免疫酶染色和抗原捕獲酶聯(lián)免疫吸附試驗

———(AntigenCaptureEnzyme-LinkedImmunosorbent

適用于對分離到的病毒進行血清群的鑒定

Assay,AC-ELISA);

定型微量中和試驗和蝕斑及蝕斑抑制定型試驗適用于對分離到的進行血清型的鑒定

———BTV;

反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和熒光

———(Reverse-TranscriptionPolymeraseChainReaction,RT-PCR)

檢測適用于動物的血液臟器和精液中核酸的檢測也適用于對分離到的病毒

RT-PCR、BTV,

進行血清群鑒定

;

瓊脂免疫擴散試驗和競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗

———(AgarGelImmunodiffusion,AGID)

適用于血清樣品中抗

(CompetitionEnzyme-LinkedImmunosorbentAssay,C-ELISA)BTV

體的檢測

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本

。,

文件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()