GB/T 19915.1-2005豬鏈球菌2型平板和試管凝集試驗操作規(guī)程

ICS07.100.30C53中華人民共和國國家標準GB/T：19915.1—2005豬鏈球菌2型平板和試管凝集試驗操作規(guī)程ProcedureofplateandtubeagglutinationforStreptococcussuistype22005-09-27發(fā)布2005-11-01實施中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局愛布中國國家標準化管理委員會

GB/T19915.1-2005前豬鏈球菌2型是鏈球菌屬的成員，其致病菌株可致豬鏈球菌病,引起豬敗血癥、腦膜炎等。人可通過傷口感染該菌,并導致發(fā)病和死亡。為了通過檢測豬血清中豬鏈球菌2型的抗體,進行豬鏈球菌2型病的檢測和監(jiān)測，特制定本標準本標準由國家標準化管理委員會提出。本標準由全國動物防疫標準化技術委員會歸口本標準由中華人民共和國江蘇出入境檢驗檢疫局和中國檢驗檢疫科學院負責起草本標準主要起草人：陳國強、張敬友、張常印、唐泰山、姜、王凱民、林祥梅、韓雪清、吳紹強、劉建、賈廣樂、梅琳。本標準為首次發(fā)布。

GB/T19915.1-2005豬鏈球菌2型平板和試管凝集試驗操作規(guī)程范圍本標準規(guī)定了豬鏈球菌2型平板和試管凝集試驗的操作技術要求本標準適用于豬及其他各種家畜豬鏈球菌2型抗體的檢測規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而，鼓勵根據本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB/T6682-1992分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3試劑和材料3.1試劑3.1.1標準抗原：由指定單位提供,按說明書使用.使用時須回至室溫,并充分搖勾。3.1.2標準陽性血清：由指定單位提供，按說明書使用.使用時須回至室溫,并充分搖勾。3.1.3標準陰性血清：由指定單位提供，按說明書使用，使用時須回至室溫,并充分搖勾。3.1.4試驗用蒸留水：GB/T6682-1992中的三級水3.1.5稀釋液：0.5%石炭酸生理鹽水(含0.5%石炭酸、0.85%NaCl)3.2材料3.2.1玻璃板：要求潔凈,劃成每格3cmX3cm的區(qū)域，每一格下留少許位置.用于填寫血清號。3.2.2移液器和(或)可調連續(xù)加樣器及配套的移液器槍頭3.2.3試管架和試管：規(guī)格為13mmX100mm.圓底.潔凈3.2.4被檢血清：按常規(guī)方法采血分離血清，血清必須新鮮,無明顯蛋白凝固.無溶血,無腐敗氣味運送和保存血清樣品時,應防止血清凍結和受熱,以免影響凝集價。若3天內不能送到實驗室.可用冷藏方法運送血清。試驗時須回至室溫。4操作方法4.1平板凝集試驗4.1.1將玻璃板上各格標上陽性血清、陰性血清和被檢血清號，每格各加25.L平板凝集抗原4.1.2在各格凝集抗原旁分別加入陽性血清、陰性血清和相應的被檢血清25PL..4.1.3用牙簽或移液器槍頭攪動被檢血清和抗原使之均勾混合,形成直徑約2cm的液區(qū)。輕微搖動.室溫下于4min內觀察結果。4.1.4每次操作以不超過20份血清樣品為宣,以免樣品干燥而不易觀察結果4.2試管凝集試驗4.2.1稀釋被檢血清4.2.1.1每份被檢血清用6支試管，標記檢驗編號后各管加入0.5mL稀釋液4.2.1.2取被檢血清0.5mL.加入第1管,充分混勺.從第1管中吸取0.5mL加入到第2管，混合均勾后.再從第2管吸取0.5mL至第3管.如此倍