GB/T 23874-2009飼料添加劑木聚糖酶活力的測定分光光度法

犐犆犛６５．１２０

犅４６

中華人民共和國國家標準

犌犅／犜２３８７４—２００９

飼料添加劑木聚糖酶活力的測定

分光光度法

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２００９０５２６發(fā)布２００９１００１實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

書

犌犅／犜２３８７４—２００９

前言

本標準的附錄Ａ為資料性附錄。

本標準由全國飼料工業(yè)標準化技術(shù)委員會提出并歸口。

本標準由中國農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)部飼料工業(yè)中心、武漢新華揚生物有限公司、廣東溢多利生物技術(shù)股份

有限公司負責起草。

本標準主要起草人：陸文清、曹云鶴、劉興海、詹志春、劉亞力、陳清華。

Ⅰ

書

犌犅／犜２３８７４—２００９

飼料添加劑木聚糖酶活力的測定

分光光度法

１范圍

本標準規(guī)定了用分光光度法測定飼料添加劑中木聚糖酶的活力。

本標準適用于飼料添加劑木聚糖酶產(chǎn)品，最低檢出量為１０．０Ｕ／ｇ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

３原理

木聚糖酶能將木聚糖降解成寡糖和單糖。還原性寡糖和單糖在沸水浴條件下可以與３，５二硝基

水楊酸（ＤＮＳ）試劑發(fā)生顯色反應。反應液顏色的深度與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，而還原糖的生成

量又與反應液中木聚糖酶的活力成正比。因此，通過分光比色測定反應液顏色的強度，可以計算反應液

中木聚糖酶的活力。

在３７℃、ｐＨ為５．５０的條件下，每分鐘從濃度為５ｍｇ／ｍＬ的木聚糖溶液中降解釋放１μｍｏｌ還原

糖所需要的酶量為一個酶活力單位Ｕ。

４試劑與溶液

除特殊說明外，所用的試劑均為分析純，水均為符合ＧＢ／Ｔ６６８２中規(guī)定的二級水。

４．１氫氧化鈉溶液，濃度為２００犵／犔

稱取氫氧化鈉２０．０ｇ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．２乙酸溶液，濃度為０．１犿狅犾／犔

吸取冰乙酸０．６０ｍＬ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．３乙酸鈉溶液，濃度為０．１犿狅犾／犔

稱取三水乙酸鈉１．３６ｇ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．４乙酸乙酸鈉緩沖溶液，濃度為０．１犿狅犾／犔，狆犎為５．５０

稱取三水乙酸鈉２３．１４ｇ，加入冰乙酸１．７０ｍＬ。再加水溶解，定容至２０００ｍＬ。測定溶液的ｐＨ。

如果ｐＨ偏離５．５０，再用乙酸溶液（４．２）或乙酸鈉溶液（４．３）調(diào)節(jié)至５．５０。

４．５木糖溶液（犆５犎１０犗５），濃度為１０．０犿犵／犿犔

稱取無水木糖１．０００ｇ，加乙酸乙酸鈉緩沖溶液（４．４）溶解，定容至１００ｍＬ。

４．６木聚糖溶液，濃度為１００犿犵／犿犔

稱取木聚糖（ＳｉｇｍａＸ０６２７１））１．００ｇ，加入０．３２ｇ氫氧化鈉，再加入９０ｍＬ