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文檔簡介
尿液干化學與沉渣第一頁,共二十八頁,2022年,8月28日一、尿液檢驗目的
尿液檢驗是臨床上最常用的重要檢測項目之一,主要用于泌尿生殖系統(tǒng)疾病、肝膽疾病、代謝性疾?。ㄈ缣悄虿〉龋┘捌渌到y(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷、治療監(jiān)測及健康普查。第二頁,共二十八頁,2022年,8月28日二、尿干化學分析儀
化學分析儀又稱尿液分析儀(urineanalyzer),是用干化學方法檢測尿中某些成分,有半自動和全自動兩大類。第三頁,共二十八頁,2022年,8月28日1.尿液分析儀的試劑帶
試劑帶采用多層膜結(jié)構,第一層尼龍膜起保護作用,防止大分子物質(zhì)對反應的污染;第二層絨制層,包括碘酸鹽層和試劑層,碘酸鹽層可破壞維生素C等干擾物質(zhì),試劑層主要與尿液中所測定物質(zhì)發(fā)生化學反應,產(chǎn)生顏色變化;第三層是吸水層,可使尿液均勻快速地浸入,并能抑制尿液流到相鄰反應區(qū);最后一層選取尿液不浸潤的塑料片作為支持體。第四頁,共二十八頁,2022年,8月28日第五頁,共二十八頁,2022年,8月28日尿液分析儀工作原理分析儀采用專用的試紙帶,通過測定試帶顏色變化,求得尿液中各種成份的濃度。第六頁,共二十八頁,2022年,8月28日
尿液分析儀一般采用雙波長法測定試劑塊的顏色變化。測定波長:它是被測試劑塊的敏感特征波長;參比波長:是被測試劑塊不敏感的波長,用于消除背景光和其它雜散光的影響。各種試劑塊都有相應的測定波長,其NIT、KET、BIL、URO原的測定波長為550nm,pH、GLU、PRO、VitC、BLD的測定波長為620nm。各試劑塊所選用的參考波長為720nm。第七頁,共二十八頁,2022年,8月28日2.儀器結(jié)構與組成
尿液分析儀一般由機械系統(tǒng)、光學系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。第八頁,共二十八頁,2022年,8月28日(二)檢測參數(shù):
目前常用的檢測參數(shù)包括酸堿度、蛋白質(zhì)、葡萄糖、酮體、膽紅素、尿膽原、紅細胞或血紅蛋白(或隱血)、亞硝酸鹽、白細胞、比重、維生素C等(下圖)第九頁,共二十八頁,2022年,8月28日第十頁,共二十八頁,2022年,8月28日方法學評價主要優(yōu)點:標本用料少;速度快、項目多;重復性好、準確性高;適于大批量標本篩檢。第十一頁,共二十八頁,2022年,8月28日主要不足:
①不能替代病理性尿標本檢查,對白細胞、管型、結(jié)晶的檢測屬于間接檢測。
不利判斷紅細胞的形態(tài)特征。第十二頁,共二十八頁,2022年,8月28日②蛋白質(zhì)在PH3.2條件下,四溴酚藍產(chǎn)生的陰離子與帶陽離子的蛋白質(zhì)結(jié)合使顏色發(fā)生改變,這種現(xiàn)象稱指示劑蛋白誤差法。
測尿蛋白以清蛋白為主,對球蛋白、血紅蛋白、本周蛋白和黏蛋白不夠靈敏,故“陰性”不能排除這些蛋白的存在。對于高緩沖的堿性尿可能得到假陽性結(jié)果。如果尿液被季銨鹽類化合物及某些防腐劑或清洗劑污染也會導致假陽性。第十三頁,共二十八頁,2022年,8月28日③葡萄糖是在過氧化物酶的作用下生產(chǎn)葡萄糖酸和過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶作用下釋放新生態(tài)氧[O],[O]氧化KI發(fā)生顏色改變。
第十四頁,共二十八頁,2022年,8月28日④酮體尿酮體包括乙酰乙酸、丙酮、β-羥丁酸三種。尿中乙酰乙酸在堿性條件下與亞硝基鐵氰化鈉反應,不與丙酮或β-羥丁酸反應。第十五頁,共二十八頁,2022年,8月28日⑤白細胞白細胞試塊主要與粒細胞中的酯酶反應,而單核細胞、淋巴細胞中無酯酶,故需結(jié)合顯微鏡檢查。
第十六頁,共二十八頁,2022年,8月28日⑥VitC該項目并非用于人體內(nèi)VitC的定量,而是用于判斷試帶法其它檢測項目的結(jié)果是否可靠,高濃度的VitC對葡萄糖、膽紅素、血、亞硝酸鹽會產(chǎn)生嚴重的負干擾。第十七頁,共二十八頁,2022年,8月28日三、尿液有形成分分析儀檢查
傳統(tǒng)的尿有形成分檢查是在顯微鏡下檢查離心沉淀后的尿有形成分,費時費力、誤差大、重復性差、不能定量、受人為因素影響、無統(tǒng)一質(zhì)控物、難以進行室內(nèi)質(zhì)控。1988年,美國國際遙控影響系統(tǒng)有限公司研制生產(chǎn)了世界上第一臺高速攝影機式尿有形成分自動分析儀。隨著現(xiàn)代科技的進步,目前,有形成分分析儀主要有2大類:①尿有形成分直接鏡檢影像分析儀②流式細胞術和電阻抗檢測相結(jié)合的全自動尿有形成分分析儀。
第十八頁,共二十八頁,2022年,8月28日(一)影像式尿有形成分分析儀:其原理與人工顯微鏡鏡檢原理基本相似,都是直觀地觀察有形成分的形態(tài),在相差顯微鏡下數(shù)碼攝影系統(tǒng)對每個層流經(jīng)過的標本攝像,計算機進行圖像分析,提取有形成分的大小、對比度、質(zhì)地、形狀特征,運用形態(tài)識別軟件自動識別和分類尿液有形成分。與普通顯微鏡法相比,具有無污染、定量、簡便等優(yōu)點。但對雜質(zhì)多的標本可導致圖像模糊難以準確辨認,假陽性率高;有些結(jié)晶和真菌易被誤認為紅細胞,往往需要依靠傳統(tǒng)顯微鏡檢查。第十九頁,共二十八頁,2022年,8月28日(二)全自動尿有形成分分析儀
其設計思路與顯微鏡檢測原理不同,應用了流式細胞術和電阻抗分析原理。下面以Sysmex
UF系列
為例作簡要介紹:第二十頁,共二十八頁,2022年,8月28日第二十一頁,共二十八頁,2022年,8月28日1.儀器組成:主要包括光學檢測系統(tǒng)、液壓系統(tǒng)、電阻抗檢測系統(tǒng)等第二十二頁,共二十八頁,2022年,8月28日2.尿液有形成分染色:其染料成分主要有9-氮雜菲:主要染色白細胞的核酸成分,在480nm光激發(fā)時產(chǎn)生610nm橙黃色光波,用于區(qū)別有核與無核細胞(白、紅細胞,病理管型與透明管型等).羧花氰:其穿透能力強,主要與細胞膜(紅細胞膜、核膜線粒體等)的脂質(zhì)成分發(fā)生非特異性結(jié)合,用于區(qū)別WBC體積大?。ㄈ缟掀ぜ毎c白細胞的區(qū)別)。第二十三頁,共二十八頁,2022年,8月28日
3.尿液有形成分檢測:
定量稀釋的尿標本經(jīng)稀釋、加溫、染色后進入鞘液流動池,單個縱列的有形成分經(jīng)氬激光光束照射,產(chǎn)生不同程度的熒光強度(熒光強度與有形成分和染料的結(jié)合程度成正比),結(jié)合前向散射光和側(cè)向散射光的信號分析尿中有形成分。綜合分析做出紅細胞、白細胞、細菌、管型等的散點圖及定量報告,最后得到每份尿標本的直方圖和散點圖。第二十四頁,共二十八頁,2022年,8月28日第二十五頁,共二十八頁,2022年,8月28日4.方法學評價:
全自動尿有形成分分析儀較顯微鏡檢查有明顯優(yōu)勢:①不需離心,可自動進樣。②標本用量少,快速、高效。③方法程序統(tǒng)一,易于標準化和質(zhì)量控制。第二十六頁,共二十八頁,2022年,8月28日Sysmex
UF系列
尿沉渣分析儀
目前在中國的儀器保有數(shù)量大約有800臺左右,并且隨著尿常規(guī)定量檢查的不斷的普及,數(shù)量仍呈一個上升的趨勢。UF項目具有檢測速度快、結(jié)果準確、重復性好、自動進樣、自動混均、自動化程度高等優(yōu)點,但是該項目的檢測成本較高,原裝試劑的每人份的檢測成本大約平均在8元錢,儀器的平均購置成本大約在50萬左右。按照五年的使用周期,一年的折舊費是十萬元,若以一年4
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