標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 31801-2015 丁香疫霉菌檢疫鑒定方法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn)，主要針對丁香疫霉菌（Phytophthora syringae）的檢疫和鑒定提供了一套標(biāo)準(zhǔn)化的方法。該標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境植物及其產(chǎn)品的檢驗檢疫工作，以及國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域?qū)Χ∠阋呙咕M(jìn)行檢測時參照使用。

標(biāo)準(zhǔn)中詳細(xì)規(guī)定了從樣品采集、處理到最終結(jié)果判定的一系列步驟。首先，在采樣環(huán)節(jié)，明確了不同類型的植物材料應(yīng)如何正確地獲取樣本；接著是樣本的預(yù)處理過程，包括清洗、切割等操作，以確保后續(xù)實(shí)驗的有效性。對于病原體的分離培養(yǎng)，則介紹了適宜的培養(yǎng)基種類及條件設(shè)置，以便于觀察到典型菌落特征。此外，還列舉了幾種常用的分子生物學(xué)技術(shù)如PCR擴(kuò)增等，用于進(jìn)一步確認(rèn)疑似病例是否確實(shí)為丁香疫霉菌感染。最后，根據(jù)上述各階段所獲得的數(shù)據(jù)信息，結(jié)合形態(tài)學(xué)特征與基因序列比對結(jié)果，給出明確的鑒定結(jié)論。

整個流程涵蓋了傳統(tǒng)微生物學(xué)方法與現(xiàn)代分子生物學(xué)手段相結(jié)合的方式，旨在提高檢測準(zhǔn)確性的同時也保證了效率。通過遵循此標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)下的操作規(guī)程，可以有效地識別并控制丁香疫霉菌的傳播風(fēng)險，從而保護(hù)農(nóng)作物免受其侵害。


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....

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  • 現(xiàn)行
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  • 2015-07-03 頒布
  • 2015-11-27 實(shí)施
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文檔簡介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T31801—2015

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPhytophthorasyringaeKleb.

2015-07-03發(fā)布2015-11-27實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

GB/T31801—2015

*

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20159

*

書號

:155066·1-49875

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T31801—2015

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國檢驗檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人杜洪忠羅加鳳吳品珊嚴(yán)進(jìn)

:、、、。

Ⅰ

GB/T31801—2015

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了丁香疫霉菌的檢疫鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于針對丁香疫霉菌寄主的苗木枝條枝葉果實(shí)及其夾帶土壤和介質(zhì)中丁香疫霉菌的

、、、

鑒定

。

2儀器和用具

21儀器

.

生物顯微鏡超凈工作臺光照培養(yǎng)箱電子天平高壓滅菌鍋冰箱擴(kuò)增儀熒光

,,,(1/1000g),,,PCR,

擴(kuò)增儀電泳儀凝膠成像儀高速冷凍離心機(jī)恒溫水浴鍋

PCR,,,,。

22用具

.

燒杯三角瓶量筒試管培養(yǎng)皿酒精燈鑷子剪刀解剖刀接種針載玻片蓋玻片塑料研杵

,,,,,,,,,,,,,

移液器移液器吸頭離心管液氮罐

,,,。

3試劑材料和培養(yǎng)基

、

31試劑

.

β谷甾醇匹馬霉素氨芐青霉素鈉鹽利福平鈉鹽五氯硝基

-,(pimaricin),(ampicillin),(rifampicin),

苯惡霉靈瓊脂糖乙二胺四乙

(pentachloronitrobenzene),(hymexazol),CaCO3,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,

酸四鈉鹽十六烷基三甲基溴化銨無水乙醇

(EDTA),NaOH,NaOAc,KCl,Tris,(CTAB),TAE,(etha-

三氯甲烷異丙醇異戊醇核酸染料

nol),(chloroform),(isopropanol),(isoamylalcohol),SYBRGreenI,

蛋白酶Taq聚合酶通用引物和實(shí)時熒光引物和及

K,DNA,dNTP,ITS5ITS4,PCRPS-FPS-RTaq-

探針

Man-MGBPS-Pr。

32材料

.

瓊脂粉汁夏櫟葉片或蘋果或梨鮮橙皮或杜鵑葉片

,V8,,。

33培養(yǎng)基

.

培養(yǎng)基培養(yǎng)基鮮橙皮培養(yǎng)基杜鵑葉片培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基具

PDA,V8,V8,V8,PARPH-V8。

體配方參見附錄

A。

4檢疫鑒定方法

41癥狀檢查

.

檢查寄主植物的根莖葉果實(shí)等部位對有枯萎

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