標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 34739-2017 動(dòng)物狂犬病病毒中和抗體檢測(cè)技術(shù)》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，旨在提供一種科學(xué)、規(guī)范的方法來(lái)測(cè)定動(dòng)物體內(nèi)針對(duì)狂犬病病毒的中和抗體水平。該標(biāo)準(zhǔn)適用于獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室對(duì)家養(yǎng)或野生動(dòng)物進(jìn)行狂犬病免疫效果評(píng)估時(shí)使用。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)，中和抗體是指能夠阻止狂犬病病毒侵入宿主細(xì)胞并復(fù)制的特異性免疫球蛋白。這些抗體的存在及其濃度可以反映個(gè)體對(duì)于狂犬病的免疫力狀態(tài)。本標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了采用快速熒光灶抑制試驗(yàn)（RFFIT）方法來(lái)進(jìn)行中和抗體滴度測(cè)定的具體步驟，包括樣品準(zhǔn)備、實(shí)驗(yàn)材料與試劑的選擇、操作流程以及結(jié)果判讀等方面內(nèi)容。

在執(zhí)行過(guò)程中，首先需要從待測(cè)動(dòng)物體內(nèi)采集血液樣本，并從中分離出血清作為測(cè)試對(duì)象。接著，按照特定比例將血清稀釋后與已知量的狂犬病病毒混合，在適宜條件下孵育一段時(shí)間。之后，將上述混合液接種至單層培養(yǎng)的敏感細(xì)胞上繼續(xù)培養(yǎng)，觀(guān)察是否形成熒光灶。通過(guò)比較不同稀釋度下熒光灶數(shù)量的變化情況，可以確定出能夠完全抑制病毒生長(zhǎng)的最大血清稀釋倍數(shù)，即為該樣品中的中和抗體滴度值。


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....

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  • 2017-11-01 頒布
  • 2018-05-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34739—2017

動(dòng)物狂犬病病毒中和抗體檢測(cè)技術(shù)

Detectingtechniqueofneutralizationantibodyagainstrabiesvirusinanimals

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T34739—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)參考世界動(dòng)物衛(wèi)生組織年版國(guó)際陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典狂犬病的相關(guān)

(OIE)2013《》2.1.13

內(nèi)容

。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人扈榮良張守峰劉曄張菲

:、、、。

Ⅰ

GB/T34739—2017

動(dòng)物狂犬病病毒中和抗體檢測(cè)技術(shù)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用于動(dòng)物狂犬病血清中和抗體定量測(cè)定的熒光抗體病毒中和試驗(yàn)的血清樣

(FAVN)

品采集實(shí)驗(yàn)操作方法及結(jié)果判定

、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物個(gè)體狂犬病免疫效果的定量測(cè)定群體免疫覆蓋率監(jiān)測(cè)及狂犬病流行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682—2008

實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB19489—2008

3縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

抗生素胰蛋白酶乙二胺四乙酸

ATV:--(Antibiotic-Trypsin-Versene)

乳倉(cāng)鼠腎細(xì)胞系

BHK-21:(BabyHamsterKidney-21)

生物安全級(jí)實(shí)驗(yàn)室

BSL-2:2(BiosafetyLaboratoryLevel2)

狂犬病標(biāo)準(zhǔn)攻擊毒株

CVS:(ChallengeVirusStandard)

熒光抗體病毒中和試驗(yàn)

FAVN:(FluorescentAntibodyVirusNeutralizationTest)

異硫氰酸熒光黃

FITC:(FluoresceinIsothiocyanate)

細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

MEM:(Eagle’sMinimumEssentialMedium)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(Phosphate-BufferedSaline)

半數(shù)細(xì)胞感染量

TCID50:(MedianTissueCultureInfectiveDose)

4試劑和材料

除非另有規(guī)定僅使用分析純?cè)噭?/p>

,。

41水二級(jí)水

.:GB/T6682—2008,。

42商品化的狂犬病陰性標(biāo)準(zhǔn)犬血清

.。

43商品化的狂犬病陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)犬血清用前稀釋至

.,0.5IU/mL。

44標(biāo)記的抗狂犬病病毒抗體用見(jiàn)稀釋成工作液現(xiàn)用現(xiàn)配

.FITC,PBS(0.01mol/L,pH7.4,A.1),。

45見(jiàn)

.MEM(A.2)。

46細(xì)胞培養(yǎng)用抗生素溶液見(jiàn)

.(A.3)。

47抗生素胰蛋白酶乙二胺四乙酸溶液見(jiàn)

.--(ATV)(A.4)。

48固定液

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