GB/T 34796-2017水溶液中核酸的濃度和純度檢測紫外分光光度法

ICS07080

A40.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34796—2017

水溶液中核酸的濃度和純度

檢測紫外分光光度法

Quantificationandpurityanalysisofnucleicacidconcentrationin

solution—Ultravioletspectrophotometry

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T34796—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國生化檢測標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國測試技術(shù)研究院生物研究所上海市計(jì)量測試技術(shù)研究院中國測試技術(shù)研

:、、

究院四川中測生物科技有限公司

、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人譚和平周李華許麗劉剛馬麗俠李妍葉德萍梁文王智丁敏孫登峰

:、、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34796—2017

水溶液中核酸的濃度和純度

檢測紫外分光光度法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了使用紫外分光光度法檢測水溶液中核酸的濃度和純度的原理樣品制備及檢測方法

、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于水溶液中核酸的濃度和純度檢測可對濃度在及以上的水溶液核酸樣品定

,5ng/μL

量檢測和純度分析

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

實(shí)驗(yàn)室計(jì)

GB/T11165pH

雙光束紫外可見分光光度計(jì)

GB/T26813

移液器檢定規(guī)程

JJG646

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

4原理

核酸中嘌呤和嘧啶堿基有共軛雙鍵具有吸收紫外光的性質(zhì)其最大吸收值在波長為

,,250nm~

之間堿基與戊糖磷酸形成核苷酸后其最大吸收峰不會改變最大吸收波長約吸收

270nm。、,260nm,

低峰在在波長處單位值的光密度相當(dāng)于雙鏈濃度為單鏈

230nm。260nm,1ODDNA50μg/mL、

及為單鏈寡核苷酸為利用此量和濃度關(guān)系可用于計(jì)算核酸樣品

DNARNA40μg/mL、33μg/mL,,

的濃度

。

5試劑和材料

除非另有規(guī)定本方法所用試劑均為分析純水為規(guī)定的一級水

,,GB/T6682。

51DNA標(biāo)準(zhǔn)溶液

.

小牛胸腺標(biāo)準(zhǔn)溶液

DNA。

52三羥甲基氨基甲烷緩沖液1mol/LTris-HClpH74

.(,.)

稱取置于燒杯中加入去離子水充分?jǐn)嚢枞芙庥?/p>