高中生物人教版生物技術實踐專題5DNA和蛋白質技術 高質作品

課時訓練14血紅蛋白的提取和分離基礎夯實1.下列關于凝膠色譜柱的操作,正確的是()A.將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴B.將橡皮塞下部用刀切出凹穴C.插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D.將尼龍網(wǎng)剪成與橡皮塞下部一樣大小的圓片答案：A2.使用SDS—聚丙烯酰胺電泳的過程中,不同蛋白質的電泳遷移率完全取決于()A.電荷的多少B.分子的大小C.肽鏈的多少 D.分子形狀的差異答案：B3.在血紅蛋白的整個提取過程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A.防止血紅蛋白被氧氣氧化B.血紅蛋白是一種堿性物質,需磷酸中和C.磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),維持其結構和性質答案：D4.蛋白質的提取和分離分為哪幾步?()A.樣品處理、凝膠色譜操作、SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化C.樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定D.樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定答案：C5.下列關于DNA的粗提取實驗和血紅蛋白的提取實驗,敘述正確的是()(導學號52260066)A.前者選擇雞血細胞作為實驗材料較好,后者選擇哺乳動物成熟的紅細胞作為實驗材料較好B.樣品預處理時,前者靜置1天處理除去上清液;后者需要加入清水,反復低速短時間離心洗滌,至上清液無黃色C.在DNA粗提取實驗中,往2mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時,應該緩慢加入,直到出現(xiàn)黏稠物即止D.洗滌紅細胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機鹽等答案：A6.下列關于凝膠色譜柱的裝填,除哪項外均為正確解釋?()A.交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG-75)“G”表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示凝膠得水值B.色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡,必須重裝C.用300mL物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12hD.凝膠用自來水充分溶脹后,配成凝膠懸浮液答案：D7.下列各項中,一般不影響在凝膠色譜法分離蛋白質中的分離度的是()A.層洗柱高 B.層洗柱的直徑C.緩沖溶液 D.樣品的分布答案：B8.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質分子,其分子大小、電荷的性質和電荷量情況如下圖所示,下列有關蛋白質分離的敘述正確的是()A.若將樣品以2000r/min的速度離心10min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質,則分子甲移動速度最快C.將樣品裝入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子丙也保留在袋內(nèi)D.若用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質分子,則分子甲和分子丙形成的電泳帶相距最遠答案：C9.下列關于凝膠色譜法的原理及操作,不正確的是()A.是利用凝膠把分子大小不同的物質分離開的一種方法B.在洗脫過程中,大分子不能進入凝膠內(nèi)部而最先流出,而小分子可以進入凝膠內(nèi)部而流速緩慢,以致最后流出C.凝膠內(nèi)部有很微細的多孔網(wǎng)狀結構,其孔隙大小與被分離的物質分子的大小無相應關系D.一般情況下,凝膠對要分離的物質沒有吸附作用,因此所有要分離的物質都應該被洗脫出來答案：C10.在裝填色譜柱時,不得有氣泡存在的原因是()A.氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序,影響分離效果B.氣泡阻礙蛋白質的運動C.氣泡能與蛋白質發(fā)生化學反應D.氣泡會在裝填凝膠的時候使凝膠不緊密答案：A能力提升11.下面說法不正確的是()A.在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH基本不變B.緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成C.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程D.透析袋能使大分子自由進出,而將小分子保留在袋內(nèi)答案：D12.下列關于樣品的加入和洗脫的操作,不正確的是()A.加樣前,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面的下面B.用吸管小心地將1mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端,不要破壞凝膠面C.加樣后,打開下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi)D.等樣品完全進入凝膠層后,關閉下端出口答案：A13.血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分,負責血液中O2和部分CO2的運輸。請根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問題。(1)將實驗流程補充完整:A為,B為。凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)而分離蛋白質。

(2)洗滌紅細胞的目的是去除,洗滌次數(shù)過少,無法除去;離心速度過高和時間過長會使一同沉淀,達不到分離的效果。洗滌干凈的標志是。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是。

(3)在洗脫過程中加入物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為的目的是

。

如果紅色區(qū)帶,說明色譜柱制作成功。

解析：本題考查血紅蛋白提取和分離的實驗步驟和基本操作。答案：(1)血紅蛋白的釋放樣品的加入和洗脫蛋白質相對分子質量的大小(2)雜蛋白(血漿蛋白)血漿蛋白白細胞和淋巴細胞離心后的上清液中沒有黃色蒸餾水和甲苯(3)準確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境,保持體外的pH和體內(nèi)的一致均勻一致地移動14.下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置,請回答下列問題。(導學號52260067)(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分,其在紅細胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質具有功能。

(2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是;乙裝置中,C溶液的作用是。

(3)甲裝置用于,目的是。用乙裝置分離蛋白質的方法叫,是根據(jù)分離蛋白質的有效方法。

(4)用乙裝置分離血紅蛋白時,待時,用試管收集流出液,每5mL收集一管,連續(xù)收集。

解析：A表示磷酸緩沖液,B表示血紅蛋白溶液,C表示緩沖液。甲裝置可對血紅蛋白粗分離,血紅蛋白留在透析袋中,而小分子物質進入緩沖液。乙裝置中的緩沖液(C)可對色譜柱中的血紅蛋白進行洗脫。答案：(1)運輸(2)磷酸緩沖液洗脫血紅蛋白(3)透析(粗分離)去除樣品中相對分子質量較小的雜質凝膠色譜法相對分子質量的大小(4)紅色的蛋白質接近色譜柱底端15.下面是某研究小組開展的“豬血漿某白蛋白的提取及相對分子質量測定”研究,請協(xié)助完成有關問題。材料儀器:新鮮豬血、低速冷凍離心機、透析袋、電泳儀等?；瘜W試劑:pH為的緩沖液、檸檬酸鈉、奈氏試劑(與NH4+反應出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀)、飽和(NH4)2SO實驗步驟:(1)樣品獲取:向新鮮豬血中加入,靜置一段時間后取上層血漿。

(2)鹽析法粗提蛋白質。①向血漿中加入一定體積的飽和(NH4)2SO4溶液,使(NH4)2SO4的濃度達到50%,充分混合后靜置、離心,取沉淀物。②向沉淀物中加入適量生理鹽水使之溶解,再向其中加入一定體積的飽和(NH4)2SO4溶液,使(NH4)2SO4的濃度達到33%,充分混合后靜置、離心,取沉淀物。③重復步驟①②2~3次,最后用生理鹽水將沉淀溶解即得粗提品。鹽析粗提取“血漿某白蛋白”的主要原理是,重復步驟①②的主要目的是。

(3)透析除鹽:將粗提品裝入透析袋,以pH為的緩沖液做透析液,每隔4h更換一次透析液,每次更換前利用奈氏試劑檢測透析液中NH4+的量。利用緩沖液做透析液的目的是。檢測中,若觀察到透析液時(4)凝膠色譜法分離:透析后的樣品經(jīng)凝膠柱洗脫,獲得純凈血漿某白蛋白樣品。(5)相對分子質量測定:化學物質SDS能使蛋白質變性,解聚成單條肽鏈。在聚丙烯酰胺凝膠電泳中加入一定量的SDS,使電泳遷移率完全取決于肽鏈的分子大小。右圖為本實驗中用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血漿某白蛋白的結果。根據(jù)電泳結果,某同學得出“提取的血漿某白蛋白有兩條肽鏈”的結論,這種說法可靠嗎?理由是

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解析：(1)為防止血液凝固,在采血容器中要預先加入抗凝血劑檸檬酸鈉。(2)利用血漿某白蛋白在一定濃度(NH4)2SO4溶液中的溶解度低的特性去除雜蛋白。(3)過酸、過堿、溫度過高都會使蛋白質變性。(5)電泳的原理是利用待分離樣品中