GB/T 36815-2018藍(lán)莓果腐病菌檢疫鑒定方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36815—2018

藍(lán)莓果腐病菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofDiaporthevacciniiShear

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T36815—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國天津出入境檢驗(yàn)檢疫局

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人羅加鳳崔鐵軍劉躍庭張瑩黃國明廖芳

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T36815—2018

藍(lán)莓果腐病菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了藍(lán)莓果腐病菌的分離培養(yǎng)致病性測定及分子生物學(xué)檢測方法

、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于藍(lán)莓果腐病菌寄主種苗植株和果實(shí)中藍(lán)莓果腐病菌的檢疫鑒定

、。

2藍(lán)莓果腐病菌的基本信息

中文名藍(lán)莓果腐病菌

:

學(xué)名Diaporthevaccinii

:Shear

無性學(xué)名Phomopsisvaccinii

:ShearN.E.Stevens&H.F.Bain

英文名

:fruitrotofblueberry,Phomopsiscankerofblueberry,uprightdiebackofcranberry

分類地位藍(lán)莓果腐病菌Diaporthevaccinii屬真菌界子囊菌門

:(Shear)(Fungi),(Ascomycota),

子囊菌綱間座殼目間座殼科間座殼屬Diaporthe

(Ascomycetes),(Diaporthales),(Diapouthaceae),()。

傳播途徑病菌依靠帶菌種苗和果實(shí)進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播

:。

藍(lán)莓果腐病菌的其他信息參見附錄

A。

3方法原理

病原菌的為害癥狀分離培養(yǎng)性狀形態(tài)特征致病性測定參見附錄附錄附錄及

、、、(A、B、C)ITS1/

核酸序列比對結(jié)果作為藍(lán)莓果腐病菌的檢疫鑒定依據(jù)

ITS4。

4儀器用具和主要試劑

41儀器用具

.

411儀器

..

體視顯微鏡生物顯微鏡超凈工作臺生物培養(yǎng)箱電子天平高壓滅菌鍋常規(guī)冰箱

、、、、、、(-20℃),

擴(kuò)增儀電泳儀凝膠成像儀高速冷凍離心機(jī)恒溫水浴鍋

PCR、、、、。

412用具

..

滅菌培養(yǎng)皿直徑三角瓶鑷子手術(shù)剪手術(shù)刀接種針一次性注射器

(90mm~100mm)、、、、、、

棉紗脫脂棉酒精燈塑料研杵可調(diào)微量加樣器

(1mL)、、、、、。

42主要試劑

.

乙二胺四乙酸十二烷基磺酸鈉氯仿異戊醇三氯甲烷乙醇氯化鉀

(EDTA)、(SDS)、Tris-HCl、、、、、、

氯化鎂蛋白酶引物Taq聚合酶等分子生物學(xué)試劑或用植物組織及真菌基因組提取

、K、ITS1/ITS4、,

試劑盒提取葡萄糖瓊脂青霉素鏈霉素乳酸次氯酸鈉

DNA。、、、、、2.0%(NaClO)。

酸性馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基