GB/T 36843-2018梨衰退植原體檢疫鑒定方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36843—2018

梨衰退植原體檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofCandidatusPhytoplasmapyri

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T36843—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國福建出入境檢驗(yàn)檢

:、

疫局

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人王有福李鑫于文濤劉冉馮茜茜于爽王秀芬張寅寅黑多爾劉卉秋

:、、、、、、、、、、

胡強(qiáng)曹冬梅

、。

Ⅰ

GB/T36843—2018

梨衰退植原體檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了梨衰退植原體Candidatus的檢疫和鑒定方法

Phytoplasmapyri。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于薔薇科及夾竹桃科等植株及其繁殖材料和傳播介體中梨衰退植原體的檢疫和鑒定

。

2梨衰退植原體基本信息

中文名梨衰退植原體

:

學(xué)名Candidatus

:PhytoplasmapyriSeemüller&Schneider

英文名

:peardecline;Parry?sdisease;peachyellowleafroll;pearleafcurl;pearmoria

分類地位細(xì)菌界硬壁菌門柔膜菌綱非固醇菌原體目

:(Bacteria),(Firmicutes),(Mollicutes),

非固醇菌原體科植原體屬Phytoplasma植

(Acholeplasmatales),(Acholeplasmataceae),(),16SrⅩ-C

原體組

。

其他信息參見附錄

A。

3方法原理

梨衰退植原體癥狀和基因特性作為本標(biāo)準(zhǔn)鑒定方法的依據(jù)

。

4儀器設(shè)備和主要試劑

41儀器設(shè)備

.

定性儀定量儀超凈工作臺高壓滅菌鍋高速冷凍離心機(jī)臺式冷凍離心機(jī)純水儀

PCR、PCR、、、、、、

臺式小型離心機(jī)冰箱旋渦震蕩器微量進(jìn)樣器電泳儀水浴鍋凝膠成像系統(tǒng)等

、、、、、、。

42主要試劑

.

除非另有說明在分析中僅使用分析純試劑和去離子水反應(yīng)體系用雙蒸水提取試

,。PCR。DNA

劑可參照附錄準(zhǔn)備其他試劑比如各種溶液緩沖液和培養(yǎng)基等檢測方法特有的按附錄附錄

B,,、,C、D

和附錄要求準(zhǔn)備商品化試劑參見其使用說明

E。。

植物提取試劑盒預(yù)混液超純水分子量標(biāo)記及

DNA、PCR(PCRPremix)、、DNA(DNAMarker)

提取試劑等

DNA。

核酸提取研磨液三水合磷酸氫二鉀磷酸二氫鉀

(100mL):(K2HPO4·3H2O),2.17g;

蔗糖牛血清白蛋白聚乙烯吡咯烷酮

(KH2PO4),0.41g;,10g;(BSA),0.15g;(PVP-10),2g。pH7.6

高溫滅菌保存

,4℃。

提取液調(diào)至

DNA:Tris-HCl,100mmol/L;EDTA,100mmol/L;NaCl,250mmol/L;pH8.0。